Kvalitatívna analýza PCR pre hepatitídu C

Share Tweet Pin it

Hepatitída je vážna choroba, ktorá má mnoho príčin vzniku. Jadrom jeho vývoja je priame alebo nepriame poškodenie pečene. Vzhľadom na jeho dôležitosť pre celý organizmus je možné iba odhadnúť, akú zlou je patológia. V tomto článku sa budeme podrobnejšie venovať charakteristikám kurzu a laboratórnej diagnostike hepatitídy C.

Príčinou tohto ochorenia je vírusové činidlo, ktoré sa týka patogénov obsahujúcich RNA. Má charakteristickú vlastnosť - schopnosť mutovať, čiže zmeniť štruktúru. Kvôli tejto infekcii uniká napadnutie imunitného systému a vo väčšine prípadov vedie k chronickému zápalu pečene.

Vzhľadom na existenciu rôznych podtypov vírusu by sa výber liekov mal vykonať s prihliadnutím na výsledky genotypizácie. Napriek dlhej štúdii o ochorení a zvláštnostiach štruktúry HCV nebolo možné vyvinúť špecifickú očkovaciu látku proti tejto chorobe.

Problémy s včasnou diagnózou sú v asymptomatickom priebehu hepatitídy, čo vedie k tomu, že človek sa pri fáze cirhózy obracia na lekára. Na zistenie nákazy v čase sú potrebné pravidelné fyzické vyšetrenia. Len laboratórne vyšetrenie krvi môže identifikovať HCV a zabrániť infekcii iných. Skutočnosť, že nosič infekcie už dlho nevie o patológii a pokračuje v prenosu vírusu zdravým ľuďom.

Trasy prenosu

Vírus sa vo väčšine prípadov šíri cez krv, pretože obsahuje najväčšiu koncentráciu patogénnych látok. Preto sa infekcia prenáša:

  • s hemodialýzou;
  • pri pichnutí ihlou;
  • v priebehu boja, keď je koža zranená a dochádza k hemokontaktu;
  • s transfúziou krvi (transfúzia krvi).

Pravdepodobnosť infekcie s dôvernou intímnosťou je zanedbateľná, pretože sperma a vaginálny výtok obsahujú malý počet patogénov. Riziko infekcie sa významne zvyšuje, ak je ohrozená celistvosť sliznice pohlavných orgánov. Toto sa pozoruje u agresívneho a análneho sexu.

Pokiaľ ide o vertikálny spôsob prenosu infekcie, vykonáva sa v procese práce. V období gravidity nemôže patogén preniknúť do placenty do embrya. Prirodzene sa patogénna látka prenáša na dieťa pri traume jeho pokožky, keď je pozorovaný kontakt s krvou matky.

Po preniknutí patogénu do zdravého organizmu začína syntéza protilátok, čo je ochrana proti infekcii a patrí do imunitných štruktúr. Sú zistené počas počiatočnej štúdie osoby pomocou ELISA.

Na potvrdenie diagnózy sa pacient podrobuje polymerázovej reťazovej reakcii. Ide o analýzu identifikácie genetického materiálu patogénneho činidla a stanovenie vírusovej záťaže.

Laboratórna diagnostika hepatitídy C

Laboratórna diagnostika začína enzýmovou imunotestou. Jeho hlavnou úlohou je odhaliť protilátky proti patogénu. Jeho účinnosť je takmer 95%. Vďaka tomuto výskumu v predklinickej fáze je možné identifikovať nosič vírusu a poslať ho na ďalšie vyšetrenie.

Kvalitatívna analýza ELISA indikuje prítomnosť alebo neprítomnosť imunoglobulínov v krvi pacienta. Jeho výsledok môže byť "pozitívny" alebo "negatívny". Po obdržaní prvého variantu odpovede osoba ide na ďalšiu skúšku - PCR. Jeho cena závisí od kvality reagencií a laboratória. Náklady na polymerázovú reťazovú reakciu môžu dosiahnuť 4 000 rubľov.

Vlastnosti PCR

Pri polymerázovej reťazovej reakcii umožňuje dokonca aj malé množstvo biologického materiálu odhadnúť vírusovú záťaž v krvi, tj vypočítať koncentráciu patogénov v jednom mililitroku tekutiny.

S nástupom PCR bola diagnóza hepatitídy omnoho jednoduchšia. Analýza umožňuje identifikovať HCV RNA, stanoviť stupeň infekčného procesu a infekčnosť nosiča vírusu.

Existuje niekoľko typov genetickej diagnostiky:

  1. kvalitatívna analýza PCR pre hepatitídu C - potvrdzuje prítomnosť alebo neprítomnosť HCV v krvi vyšetrovaného:
  2. kvantitatívne, vďaka čomu je možné vypočítať koncentráciu vírusov a stanoviť stupeň ochorenia. Výsledok je uvedený v IU / ml alebo v kópiách / ml (v závislosti od laboratória);
  3. genotypizácia je potrebná na stanovenie genotypu HCV. To je potrebné pre presný výber liekov, ktoré budú v tomto prípade najúčinnejšie. Analýza nepriamo naznačuje závažnosť patologického procesu v pečeni. Takže s tretím genotypom patogénu sa najčastejšie pozoruje steatóza, ktorej vývojom je nahromadenie tuku v hepatocytoch (jeho bunkách). Okrem toho typ vírusu ovplyvňuje výsledok a trvanie terapeutického kurzu.

Kvalitatívna analýza PCR pre hepatitídu C

Prvým krokom v laboratóriu je štúdium biologického materiálu na prítomnosť HCV RNA. Je dôležité mať na pamäti, že kvalitatívna analýza hepatitídy C má určitú úroveň citlivosti, a preto nemôže vždy dať správnu odpoveď. V tomto prípade sa odporúča vykonať opakovanú laboratórnu diagnostiku s použitím iných činidiel.

Aby sa získali spoľahlivé výsledky, mal by sa použiť testovací systém s citlivosťou najmenej 50 IU / ml.

Výsledok diagnózy môže byť buď "pozitívny", alebo "negatívny". Ak sa patogén nenachádza v krvi, štúdia sa končí. Keď je vo vzorke detekovaná patogénna látka, vykoná sa kvantitatívny počet vírusového zaťaženia.

Falošná negatívna odpoveď sa dosiahne, ak je narušený technologický proces, napríklad aktívne komponenty, ktoré utláčajú konštrukciu kópií patogénu, vstupujú do prostredia. Preto nie je možné zobraziť skutočný obraz krvi, kvôli ktorému nie je diagnostikovaná ľudská infekcia.

Falošne pozitívny výsledok možno získať, ak bola zberná rúrka pre biologický materiál, ako aj prostredie pre štúdiu kontaminované. Okrem toho je takáto analýza reakcie možná so zmiešanou infekciou, keď je pečeň ovplyvnená niekoľkými vírusmi, napríklad hepatitída C a D.

Indikácie pre kvalitatívny výskum

Lekár môže pacientovi priradiť kvalitatívnu štúdiu na detekciu RNA vírusu hepatitídy C:

  • keď dostane pozitívnu alebo pochybnú odpoveď enzýmovej imunoanalýzy;
  • na overenie diagnózy;
  • stanovenie vírusovej záťaže;
  • staging štádia choroby;
  • diagnostikovanie zmiešaných infekcií. Často hepatitída C postihuje pečeň súčasne s vírusom "D";
  • stanovenie terapeutickej taktiky pri zohľadnení genotypu patogénu;
  • hodnotenie dynamiky zmien na pozadí liečby antivírusovými liekmi.

Výhody polymerázovej reťazovej reakcie zahŕňajú:

  1. vysokú citlivosť technológie, ktorá umožňuje zistenie faktu infekcie v predklinickej fáze;
  2. identifikácia genetického materiálu patogénu a nie protilátky proti nemu;
  3. možnosť vytvorenia podtypu patogénneho činidla;
  4. vysoká rýchlosť diagnostiky, pretože nie je potrebné vysievať materiál na živné médium, ale stačí použiť špecifické testovacie systémy. Osoba dostane výsledok po 5 hodinách;
  5. univerzálnosť. Analýza umožňuje identifikovať akýkoľvek genetický materiál (RNA, DNA). Z tohto dôvodu doktor dokáže potvrdiť hepatitídu C a iné choroby (B);
  6. možnosť detekcie latentnej infekcie.

Kvantitatívny výskum

Pri štúdiu krvi s polymerázovou reťazovou reakciou je možné vypočítať počet patogénov vo fixnom objeme biologického materiálu. Indikátor je uvedený v IU / ml. Z dôvodu analýzy je možné stanoviť stupeň infekčnosti pacienta, stanoviť stupeň infekčného procesu a tiež zhodnotiť účinnosť farmakoterapie.

Na základe PCR odborník rozhodne, ktoré dávky liekov môžu blokovať šírenie patogénov. Okrem toho sa stanoví trvanie antivírusovej liečby a prognóza života. Je dôležité mať na pamäti, že testovacie systémy sú veľmi citlivé, takže metóda umožňuje potvrdiť infekciu človeka aj v predklinickej fáze.

genotypu

Vzhľadom na schopnosť príčinného činidla mutovať, určiť taktiku liečby a výber antivírusových liekov je potrebný jej genotyp. Napríklad liečba hepatitídy HCV 1 trvá 48 týždňov, pozitívny trend sa pozoroval iba v 60% prípadov. Genotypy 2 a 3 majú priaznivejšiu prognózu. Antivírusové lieky sú predpísané počas 8 mesiacov a ich účinnosť dosahuje 85%.

Podľa štatistických údajov sú vo väčšine prípadov registrované HCV 1, 2 a 3 na území Ruskej federácie.

Pri dešifrovaní laboratórnej štúdie možno takúto odpoveď uviesť - "nie je zadaná". To znamená, že vírus cirkuluje v obehovom systéme pacienta, ktorý testovací systém nemôže rozpoznať. Výsledok analýzy v tomto prípade naznačuje infekciu osoby atypickej pre danú zemepisnú oblasť pôvodcu.

Ako získať spoľahlivé výsledky?

Na kvalitatívny výskum PCR na detekciu RNA príčinného pôvodcu hepatitídy C preukázali správne výsledky, je potrebné splniť požiadavky na prípravu na laboratórnu diagnostiku:

  1. odber vzoriek krvi sa vykonáva na prázdny žalúdok a "hladová" medzera by nemala byť kratšia ako 8 hodín;
  2. dva dni pred štúdiom sa odporúča prerušiť konzumáciu alkoholu a odmietnuť ostré, tučné a údené jedlá;
  3. zrušiť zavedenie liekov, ktoré znižujú zrážanlivosť krvi, ako napríklad heparín. Ak sú tieto lieky predpísané z dôvodu života, mali by ste o tom informovať lekára. Okrem toho by odborník mal vedieť o prijatí iných liekov, ktoré môžu mať vplyv na výsledok laboratórneho testu;
  4. V predvečer zberu biologického materiálu by nemali byť vykonávané fyzioterapeutické postupy a vystavené ťažkej fyzickej námahe.

Výsledky analýzy môžu ovplyvniť nielen osoba, ktorá daruje krv, ale aj iné faktory, a to:

  • zlá zber krvi;
  • nedodržiavanie odporúčaní týkajúcich sa prepravy biologického materiálu;
  • nedostatočná odborná príprava laboratórnych pracovníkov;
  • nedodržiavanie výskumných techník;
  • zavedenie antikoagulancií (heparínu) v predvečer odberu krvi. Táto skupina liekov znižuje zrážanlivosť, čím spomaľuje prácu činidiel.

V rôznych laboratóriách môže byť diagnostická odpoveď mierne odlišná, ale tieto chyby neovplyvňujú konečný výsledok štúdie.

Osobitná pozornosť sa venuje typom testovacích systémov, ktoré sa používajú v laboratóriu. Často sa uprednostňujú reaktanty s vysokou citlivosťou. To je dôležité pre pacientov s nízkou vírusovou záťažou, pretože je ťažké ich zistiť.

Ako často sa vykonáva laboratórna skúška?

Primárne sa polymerázová reťazová reakcia uskutočňuje u ľudí, ktorí boli testovaní na protilátky proti vírusu hepatitídy v imunoteste. V tomto prípade je určený na potvrdenie skutočnosti infekcie osoby a stanovenie štádia choroby. Analýza navyše umožňuje určiť podtyp vírusu, ktorý je obzvlášť dôležitý pri výbere liekov.

Ďalšie obdobie povinného laboratórneho testovania je 3 mesiace od začiatku antivírusovej liečby. Diagnóza poskytuje možnosť zhodnotiť účinnosť liekov, upraviť dávku alebo ju nahradiť.

Okrem základných analýz sa PCR môže vykonať dodatočne v priebehu 4 a 24 týždňov od začiatku liečby. Pozitívna prognóza ochorenia je potvrdená znížením vírusovej záťaže po troch mesiacoch liečby. Napríklad by sa mala znížiť z 1 milióna IU / ml na niekoľko sto tisíc.

Ak koncentrácia patogénnych látok v krvi zostane na rovnakej úrovni alebo mierne stúpa, znamená to neúčinnosť antivírusových látok a vyžaduje ich výmenu. Pomocou PCR na konci liečby je možné potvrdiť zotavenie pacienta.

Na správnu interpretáciu výsledkov laboratórnej diagnózy je potrebná konzultácia s odborníkom na hepatológiu alebo špecialistu na infekčnú chorobu. Vzhľadom na vysoký výskyt falošných odpovedí na test ELISA sa analýza používa výhradne na primárne vyšetrenie. Na dôkladnejšie vyšetrenie pacienta sa používa polymerázová reťazová reakcia.

Myslíte si, že je nemožné vyliečiť hepatitídu C?

Dnes, moderné lieky a nové generácie sofosbuvir Daklatasvir s 97-100% pravdepodobnosťou navždy ťa uzdraví z hepatitídy C. Najnovším liek je k dispozícii v ruštine na oficiálnej predstaviteľ indického farmgiganta ZYDUS Heptiza. Objednaný tovar dodá kuriér do 4 dní, platba po prevzatí. Získajte bezplatnú konzultáciu o používaní moderných liekov, ako aj informácie o spôsoboch nákupu, ktoré môžete získať na oficiálnej webovej stránke dodávateľa Zydus v Rusku.

RNA vírusu hepatitídy s tým, čím je

Vírus hepatitídy C (HCV) je zodpovedná za približne 20% akútnej hepatitídy, 60 až 70% pacientov v chronickej hepatitídy, a približne 30% cirhózy a rakoviny pečene. HCV, objavený v roku 1989, je RNA vírus rodu flavivirus z čeľade Togaviridae, veľkosť 40-60 nm, s prevahou obsahu lipidov. Existuje najmenej šesť genotypov a 50 sérotypov HCV. Znalosť genotypu alebo sérotypu (špecifické protilátky genotypu) HCV je užitočná pre odporúčania a liečbu. HCV je prenášaný prostredníctvom kontaktu s kontaminovanou krvou alebo krvnými kontaminovanej prípravky: transfúziou krvi, použitie ihiel a striekačiek po inej osoby bez sterilizácie alebo zle sterilizované, tetovanie, očkovanie nesterilizovaná zariadenia zdieľajú kefka holiaci doplnky, pinzety, manikúra kit. Prítomné v biologických tekutinách (slín, mlieka, vaginálne sekréty, spermy, atď.), Ale v nižšej koncentrácii, než vírus B môžu byť prenášané z matky na plod. Úroveň vertikálneho prenosu u tehotných žien s anti-HCV pozitívnym účinkom sa odhaduje na 2,7-4,4%. Tento ukazovateľ dosahuje hodnotu 5,4-8,6% u tehotných žien s koinfekciou s HCV-HIV. Približne 85% akútnej formy prechádza do chronickej formy. Hepatocelulárny karcinóm môže nastať u približne 20% pacientov s cirhózou pečene (medián 30 rokov) a 1-5% pacientov infikovaných HCV.


Začiatok choroby je zákerný, vírus sa nazýva časová bomba alebo jemný vrah. Sérologické okná medzi prítomnosťou HCV a detekciou anti-HCV sa líšia u rôznych pacientov. Súčasné imunologické testy detegujú protilátky v priemere 7-8 týždňov po nástupe choroby. V prípade spontánneho zotavenia môže anti-HCV pretrvávať počas celého života alebo postupne klesať, kým nezmizne niekoľko rokov. U pacientov s chronickou infekciou pretrváva anti-HCV na dobu neurčitú. Medzi populáciami s nižším rizikom je počet ľudí, ktorí nedokážu diagnostikovať, 0,5 až 1%.


Analýza HCV RNA (stanovenie HCV RNA), často označované ako PCR analýza hepatitídy C je štúdium krvi, ktorý umožňuje identifikáciu genetického materiálu priamo na vírus hepatitídy B (každý vírus - RNA je jedna častica). Tento test sa najčastejšie uskutočňuje pomocou PCR, teda názvom PCR hepatitídy C. Existujú kvalitatívne a kvantitatívne analýzy pre HCV RNA.


Kvalitatívna analýza naznačuje prítomnosť vírusu v krvi. Tento test sa má vykonať u všetkých pacientov, ktorí majú protilátky proti hepatitíde C. Jeho výsledok môže byť zistený alebo nezistený. Referenčné hodnoty (hodnota, ktorá by mala byť normálna) - neboli zistené. Zistený výsledok môže naznačovať, že vírus sa množí a infikuje všetky nové pečeňové bunky. Kvalitatívny test PCR má určitú citlivosť. To znamená, že ak je vírus prítomný v krvi vo veľmi nízkej koncentrácii (pod hranicou citlivosti metódy), výsledok sa nedá dosiahnuť. Preto je pri vykonávaní kvalitatívnej PCR u pacientov s nízkou virémiou (koncentrácia vírusu) napríklad pod antivírusovou terapiou dôležitá znalosť citlivosti diagnostického systému. Na kontrolu virologickej odpovede počas antivírusovej liečby je žiaduce použiť diagnostický systém s citlivosťou najmenej 50 IU / ml.

Príprava pacienta: Doručenie krvi na prázdny žalúdok

materiál: Plazma krvi.

RNA vírusu hepatitídy C, kvantitatívne stanovenie

Čo je RNA vírusu hepatitídy C, kvantifikácia?

Kvantifikácia RNA vírusu hepatitídy pomocou PCR.

Analytické indexy: detekcia RNA vírusu hepatitídy C pomocou polymerázovej reťazovej reakcie (PCR) a stanovenie vírusovej záťaže v krvnej plazme.

Zistiteľný fragment je konzervatívnou časťou genómu vírusu hepatitídy C. Špecifickosť definície je 98%. Citlivosť stanovenia je z 600 IU / ml vírusových častíc v krvnej plazme.

Prečo je dôležité urobiť RNA vírusu hepatitídy C, kvantifikácia?

Kvantitatívna charakterizácia obsahu RNA vírusu hepatitídy C v klinických vzorkách je dôležitá pre posúdenie účinnosti antivírusovej liečby a má prognostickú hodnotu na určenie chronickej hepatitídy. V prípade, že koncentrácia vírusu je nižšia 8h105 IU / ml (2x106 kópií / ml), počas liečby prognózy výhodné, keď vyššie - potom odporúčame používanie iných liečebných režimov. Vírusová záťaž pod 8x105 IU / ml (2x10 kópií / ml) spolu s definíciou genotypu vírusu je nezávislý a najpresnejší parameter účinnosti liečby. Zníženie koncentrácie RNA vírusu hepatitídy C do tretieho dňa od zahájenia liečby o 85% je rýchlym a presným parametrom na predpovedanie účinnosti liečby vedúcej k včasnej virologickej odpovedi.

Aké sú príznaky RNA vírusu hepatitídy C, kvantifikácia?

Indikácie na účely analýzy:

  • Pozitívny kvalitatívny test na prítomnosť RNA vírusu hepatitídy C v krvnom sére.
  • Určovanie taktiky liečby pacientov.
  • Presné hodnotenie účinnosti liečby.

Na čo sa obávate? Chcete získať podrobnejšie informácie o RNA vírusu hepatitídy C, kvantifikácii alebo inej analýze? Alebo potrebujete navštíviť lekára? Môžete to urobiť dohodnite si s lekárom - Klinika eurolaboratórium vždy k vašim službám! Najlepší lekári vás preskúmajú, poradia sa, poskytnú potrebnú pomoc a diagnostikujú. Môžete tiež zavolajte lekára doma. klinika eurolaboratórium je vám otvorená nepretržite.

Ako kontaktovať kliniku:
Telefónne číslo našej kliniky v Kyjeve: (+38 044) 206-20-00 (viackanálové). Tajomník klinickej ordinácie vám vyzdvihne pohodlný deň a hodinu návštevy lekára. Naše súradnice a pokyny sú uvedené tu. Pozrite podrobnejšie informácie o všetkých službách kliniky na jej osobnej stránke.

Ak ste v minulosti vykonali akýkoľvek výskum, uistite sa, že získate výsledky v ordinácii lekára. Ak nebudú vykonané štúdie, urobíme všetko potrebné v našej klinike alebo s našimi kolegami na iných klinikách.

Je potrebné dôkladne sa zaoberať stavom vášho zdravia vo všeobecnosti. Existuje veľa chorôb, ktoré sa v prvom rade nezjavujú v našom tele, ale nakoniec sa ukazuje, že sa už bohužiaľ už liečia príliš neskoro. Preto je to jednoducho potrebné niekoľkokrát do roka podstúpiť lekárske vyšetrenie. nielen na prevenciu hroznej choroby, ale aj na udržanie zdravého myslenia v tele a v tele ako celku.

Ak sa chcete spýtať lekára na otázku - použite sekciu konzultácie online. Možno nájdete odpovede na vaše otázky a čítanie tipy na starostlivosť o seba. Ak máte záujem o recenzie o klinikách a lekároch - pokúste sa nájsť informácie, ktoré potrebujete na fóre. Registrujte sa tiež na zdravotnom portáli eurolaboratórium. aby ste neustále informovali o aktuálnych novinkách a aktualizáciách na webových stránkach o RNA vírusu hepatitídy C, o kvantifikácii a ďalších analýzach na webe, ktoré budú automaticky odoslané poštou.

Ak máte záujem o akékoľvek iné testy, diagnostiku a služby kliník vo všeobecnosti, alebo ak máte ďalšie otázky a návrhy - napíšte nám. určite sa vám pokúsime pomôcť.

PCR analýza

analýza HCV RNA (detekcia RNA vírusu hepatitídy C), často nazývaná PCR analýza hepatitídy C Je krvný test, ktorý vám umožňuje priamo identifikovať genetický materiál vírusu hepatitídy (každý vírus je jednou časticou RNA). Tento test je najčastejšie vykonávaný metódou PCR, a teda názvom PCR s hepatitídou C. Existujú kvalitatívne a kvantitatívne analýzy HCV RNA.

Kvalitatívna analýza indikuje prítomnosť vírusu v krvi. Tento test by sa mal vykonať pre všetkých pacientov, ktorí majú protilátky proti hepatitíde C. Jeho výsledok môže byť "detegovaný" alebo "nedetekovateľný". Referenčné hodnoty (hodnota, ktorá by mala byť normálna) sa "nezistili". Výsledok "objavený" môže naznačovať, že vírus sa množí a infikuje všetky nové pečeňové bunky. Kvalitatívny test PCR má určitú citlivosť (10-500 IU / ml). To znamená, že ak je vírus prítomný v krvi vo veľmi nízkej koncentrácii (pod hranicou citlivosti metódy), môže sa získať výsledok "nezistený". Preto je pri vykonávaní kvalitatívnej PCR u pacientov s nízkou virémiou (koncentrácia vírusu) napríklad pod antivírusovou terapiou dôležitá znalosť citlivosti diagnostického systému. Na kontrolu virologickej odpovede počas antivírusovej liečby je žiaduce použiť diagnostický systém s citlivosťou najmenej 50 IU / ml. Tieto kritériá zodpovedajú, napríklad analyzátory COBAS Amplicor HCV-TEST (analytická citlivosť 50 IU / ml, alebo 100 kópií / ml), HCV-RNA RealBest (analytická citlivosť 15 IU / ml a 38 kópií / ml), a ďalšie.

Náklady na PCR

PCR analýza, náklady čo závisí od použitých činidiel a môže sa pohybovať od 300 rubľov. až 5000 rubľov. beží od jedného dňa do týždňa.

Spôsob tiež sa tiež používa PCR pre HCV RNA transkripčný amplifikácie (TMA), má lepšiu citlivosť (v poriadku 5-10 IU / ml.), Ale táto metóda nie je ešte v Rusku cirkuluje.

Ako často mám robiť PCR proti hepatitíde C? Obvykle sa robí bezprostredne po detekcii protilátky proti hepatitíde typu C a po 4 minútach, 12 minútach, 24 týždňov antivírusovej terapie a 24 týždňov po ukončení OEM, a potom - ročne v prípade SVR.

Obr. 1. Príklad výsledkov PCR s vysokou kvalitou hepatitídy C

Kvantitatívna analýza PCR (vírusová záťaž) je testom koncentrácie vírusu (viremie) v krvi. Vírusová záťaž je počet jednotiek genetického materiálu (vírusová RNA), ktorá je prítomná v určitom objeme krvi (zvyčajne 1 ml, čo zodpovedá 1 kubickému centimeteru). Toto číslo je vyjadrené v číslach, ME / ml jednotiek (medzinárodné jednotky na mililiter). Množstvo vírusu môže byť zobrazené rôznymi spôsobmi. Napríklad 1,5 milióna IU / ml, čo zodpovedá 1 500 000 IU / ml alebo 1,5 x 106 6 IU / ml. V niektorých laboratóriách sa používajú iné jednotky merania - kópie / ml. Faktor konverzie z kópií na medzinárodné jednotky sa líši pre rôzne testovacie systémy. Približne hodnoty sa môžu prepočítať podľa vzorca 1 ME / ml = 4 kópie / ml, napríklad 5,5 x 105 5 IU / ml = 2,2 x 106 kópií / ml.

Je dôležité vedieť, že medzi koncentráciou vírusu v krvi a závažnosťou hepatitídy C nie je žiadny priamy vzťah.

Čo ovplyvňuje vírusovú záťaž?

Po prvé, infekčnosť. Čím vyššia je koncentrácia vírusu, tým väčšie je riziko prenosu vírusu napríklad sexuálnymi kontaktmi alebo vertikálnym spôsobom. Po druhé, koncentrácia vírusu ovplyvňuje účinnosť liečby (ak je liečba založená na interferóne). Nízke vírusové zaťaženie je teda priaznivým faktorom v terapii a veľmi vysoké - nepriaznivé. Kvantitatívna PCR má tiež veľký význam pri vykonávaní liečby interferónom, aby zhodnotila jeho úspech a plánovala trvanie kurzu. Takže s rýchlou odpoveďou na liečbu a nízkou virémiou pred liečbou sa dá skrátiť čas liečby. Naopak, s pomalým poklesom koncentrácie vírusu sa môže HTV predĺžiť.

Aké zaťaženie sa považuje za nízke a čo je vysoké?

Vysoké zaťaženie sa považuje za viac ako 800 x 10 3 alebo 800 000 ME / ml, čo je približne 300 x 104 alebo 3 000 000 kópií / ml. Zaťaženie nad 1 x 107 ME / ml je považované za veľmi vysoké. Medzi odborníkmi však stále neexistuje spoločné stanovisko o hodnotách, ktoré rozlišujú medzi vysokou a nízkou viremiou. V niektorých dielach je to číslo 400 000 ME / ml.

Ako často mám robiť kvantitatívny test?

Obvykle sa uskutočňuje pred liečbou a po 12. týždni liečby, aby sa vyhodnotila jeho účinnosť v prípade, že sa stále zisťuje kvalitatívny test RNA.

Výsledkom kvantitatívneho testu môže byť kvantitatívne hodnotenie virémie vo vyššie opísanom formáte, ako aj výsledky "pod meracím rozsahom" a "nezistené".

Prah citlivosti kvantitatívnej PCR je zvyčajne vyšší ako kvalitatívny prah. Pre systém COBAS AMPLICOR je teda 600 ME / ml. Výsledok "nezistený" by mohol znamenať, že kvantitatívny test a potvrdzujúci kvalitatívny test nezistili vírusovú RNA. Výsledok "pod rozsahom merania" znamená, že kvantitatívny test nezistil hepatitídu C RNA, ale vírus je prítomný vo veľmi nízkej koncentrácii (ak bol vykonaný dodatočný potvrdzujúci kvalitatívny test).

Kvalitatívna analýza hepatitídy C

Nechajte odpoveď

Kvalitatívna analýza polymerázovej reťazovej reakcie - PCR pre hepatitídu C určuje prítomnosť alebo neprítomnosť HCV v tele. V laboratóriu sa študuje štruktúra RNA, v ktorej sa nachádza vírus. Ak je detegovaný vírus C, je potrebné podstúpiť liečbu, pretože zanedbané pečeňové ochorenie má vážne dôsledky. Kvalitačná PCR sa vykoná po zotavení na potvrdenie neprítomnosti protilátok. Určené a pre preventívne vyšetrenie. Pri nízkej koncentrácii patogénu v krvi nedokáže PCR (kvalitatívna) nič zistiť, pretože diagnostický systém má svoje prahové hodnoty citlivosti. V prípade počiatočného štádia ochorenia alebo miernej formy je PCR nakoniec diagnostikovaná s ultrasenzitívnym zariadením.

Čo je RNA vírus?

Termín RNA vírusu hepatitídy C (alebo RNA vírusu hepatitídy C) sa nazýva samotné ochorenie pečene. Vírus C sa viaže na zdravú bunku tela, ktorá preniká do vnútra. V priebehu času sa šíri po celom tele, je to len dostať do krvi. Výsledkom je, že patogén preniká do pečene, spojí sa s bunkami a pracuje tvrdo. Hepatálne bunky (hepatocyty) pracujú pod vplyvom, podstupujú zmeny a z tohto zahynú. Čím dlhší je vírus C v pečeni, tým viac buniek zomrie. Postupom času sa rozvíjajú nebezpečné choroby vedúce k zhubnej degenerácii a smrti.

Infekcia pečene týmto typom vírusu sa nemôže v žiadnom prípade prejavovať zvonka. Po mnoho rokov alebo desiatky rokov sa infikovaná osoba cíti úplne zdravá a iba náhodná vyšetrenie najčastejšie odhaľuje patológiu. Pri darovaní krvi na hepatitídu sa skúma časť reťazca RNA (ribonukleovej kyseliny), ktorá je súčasťou ľudského génu (DNA). Výsledky laboratórneho výskumu by sa nemali používať na samošetrenie, pretože to je iba indikátor. Lekár určí presný obraz a ďalšiu diagnózu.

Po vykonaní: svedectvo o štúdii

Na potvrdenie HCV je priradená analýza PCR (polymerázová reťazová reakcia). PCR štúdie pomáhajú nájsť patogénny materiál v štruktúre RNA a predpísať účinnú liečbu. Určené v nasledujúcich prípadoch:

  • identifikácia príznakov zápalu pečene;
  • skríningové štúdie na prevenciu;
  • vyšetrovanie osôb v kontakte;
  • diagnostika hepatitídy zmiešaného pôvodu (definícia hlavného patogénu);
  • Určenie úrovne aktivity reprodukcie vírusu v chronickej forme;
  • cirhóza pečene;
  • na určenie účinnosti predpísanej liečby.
PCR štúdie sú pridelené lekárom na stanovenie účinnosti priebehu liečby hepatitídy.

Existuje kvalitatívna aj kvantitatívna analýza PCR. Kvantitatívna PCR ukazuje percento RNA s nosičmi vírusu v krvi a kvalitatívna PCR indikuje prítomnosť alebo absenciu vírusu. Pozitívny ukazovateľ kvality (prítomnosť RNA hepatitídy C) tiež vyžaduje kvantitatívnu štúdiu. Vysoká koncentrácia patogénu hepatitídy C súvisí s rizikom prenosu, to znamená s kontamináciou ostatných. Nízke množstvá sú lepšie spracované. Množstvo RNA vírusov v krvi sa netýka intenzity ochorenia. Analýza PCR sa tiež robí v prípade terapie interferónom, aby sa predpísalo trvanie a zložitosť liečby.

Vlastnosti kvalitatívnej analýzy PCR pre hepatitídu C

Menovaný kvalitatívnej analýze s indexom polymerázovej reťazovej reakcie, všetci pacienti, ktorí mali protilátky v krvi, pre hepatitídu C, ktorý bol chorý a výške, by mali znovu sa test. Odporúča sa, aby sa testuje na hepatitídu B a potom, v prípade, že pozitívny záver, a hepatitídy D. tiež kvalitatívne analyzovaný reakatsiya by sa malo uskutočniť v spojení s inými krvných testov. Analýzy ukážu kompletný obraz šírenia vírusu.

Z výsledkov testov bude vidieť len pozitívny test na hepatitídu C alebo negatívnu, čiže prítomnosť alebo neprítomnosť vírusu. Ak je záver "zistený", potom je vírus aktívne a naďalej aktívne. Označenie "nenájdené" označuje neprítomnosť vírusu alebo jeho malé množstvo. S týmto indikátorom by sa malo brať do úvahy skutočnosť, že analytická citlivosť diagnostických systémov je iná a RNA hepatitída C môže byť stále v krvi, ale v analýze sa nezobrazuje.

Obzvlášť citlivá metóda PCR ultra-hepatitídy C sa odhaľuje dokonca aj v nepatrných množstvách. Používa sa hybridizačná fluorescenčná štúdia, ktorá je mnohonásobne vyššia ako štandardné systémy PCR. Metóda sa používa v niekoľkých prípadoch:

  • podozrivé skryté formy hepatitídy C;
  • Diagnóza PCR nebola potvrdená patogénom, ale existujú protilátky;
  • v prípade obnovy;
  • identifikovať skorý štádiu infekcie.
Späť na obsah

Vysvetlenie analýzy

Konečné rozhodnutie v diagnostike je ovplyvnené PCR dekódovaním HCV, najmä ultrametódou. Hlavnou nevýhodou tohto výskumu je prísne dodržiavanie sterilných podmienok pre vzorku a materiály. Malá odchýlka niekedy preukazuje nepresné závery analytika, komplikuje diagnostiku a následnú liečbu. Analýza PCR na stanovenie RNA vírusu hepatitídy nie vždy ukazuje obraz choroby s dôverou, niekedy aj neprijateľné sú nepresnosti.

Pri diagnostike vírusu hepatitídy sa odporúča vykonať komplexné vyšetrenie.

Norma ukazovateľov

Neprítomnosť protilátok JgM voči RNA vo vírusovej hepatitíde C sa považuje za normu pri analýze polymerázovej reťazovej reakcie. Súčasne zistenia sérologickej analýzy naznačujú prítomnosť protilátok proti vírusu C a to je tiež v medziach normy. Kvalitatívna definícia neukazuje intenzitu ochorenia, odhaľuje len pôvodcu hepatitídy C v RNA. Takáto analýza sa po liečbe opakuje, aby sa potvrdila skutočná regenerácia.

odchýlky

Ak sú prítomné protilátky JgM proti HCV RNA, znamená to, že došlo k vzniku infekcie. Choroba je akútna alebo chronická, prejavuje sa v rôznych štádiách. Ak dôjde k poklesu počtu protilátok, analýza ukáže dosiahnutie výsledkov liečby počas regenerácie. V diagnostike sú veľmi zriedkavé prípady falošne pozitívnych zistení. Nachádzajú sa u žien počas tehotenstva a u ľudí s inými infekčnými chorobami.

RNA hepatitída s kvantitatívnou normou

Vírus hepatitídy C je schopný reprodukovať v krvných bunkách a spôsobiť lymfoproliferatívne ochorenia. Vďaka viacerým mutáciám dochádza k oslabeniu obranyschopnosti tela, objavujú sa genotypy a podtypy vírusu. Správna a včasná identifikácia konkrétneho typu závisí od účinnosti antivírusovej liečby. Nebezpečenstvo infekcie je, že choroba je asymptomatická. Celkovo 15 percent zo 100 môže mať nauzeu a vracanie, stratu hmotnosti a horúčku.

Definícia vírusu hepatitídy C

Štandardnou normou hepatitídy C sú veľkosti od 40 do 60 nm, s väčšinou lipidov, poškodenie pečene v dôsledku akútneho alebo chronického priebehu ochorenia. Hepatitída C, menovite vírus RNA z rodiny Togaviridae, je extrémne pretrvávajúca, prenášaná transfúziou krvi alebo použitím nesterilných látok, nesprávnou hygienou kúpeľňového príslušenstva, Kvantitatívna analýza umožňuje vyšetriť krv a identifikovať genetickú štruktúru infikovaného vírusu.

V prípade hepatitídy C a jej genotypov, ktoré sa majú určiť, sa vykoná kvantitatívna analýza. V závislosti od analyzátora možno určiť tri úrovne výskytu vírusu RNA.

Subtypy môžu produkovať rôzne modifikácie, takže špecifickosť a citlivosť analyzátora by mala byť stopercentná. Okrem odhalenia ochorenia u pacienta je potrebné určiť stupeň jeho závažnosti. Niektoré laboratóriá nemajú všetky údaje o definíciách vírusu RNA, existuje možnosť falošnej pozitívnej odpovede.

Štúdia hepatitídy C bude presnejšia pri štúdiu týchto ukazovateľov:

ALAT, ASAT; alkalickej fosfatázy; LDH.

Pripomínajúc výsledky týchto indikátorov a celkový stav tela, je zobrazený výsledok ukazujúci stupeň infekcie, formu a počet buniek hepatitídy C v krvi. To prispieva k hojivému procesu a účinnosti antivírusovej liečby.

Druhy analýzy hepatitídy C

Polydizovaná reťazová reakcia (PCR) poskytuje myšlienku množstva častíc DNA v analýzach pacienta a správne identifikuje pôvodcu infekcie.

Infekčné látky sa môžu prejaviť. Takéto infekčné ochorenie pečene, ako je hepatitída C, je v súčasnosti liečiteľné, keď je zistené v čase. Ak existuje podozrenie na vírus, vykoná sa analýza PCR.

Zatiaľ čo príznaky vírusu môžu byť maskované dlhú dobu, človek nemusí cítiť nástup priebehu ochorenia. Ale s dôkladným vyšetrením v 60 až 70% prípadov sa zistí hepatitída C, primárna analýza, v ktorej je ELISA, potom nasleduje PCR diagnóza. Analýza sa vykonáva v určitých obdobiach na určenie štádia ochorenia a predpísanie príslušnej liečby. Robiť bez nej, bez použitia všetkých týchto postupov, môžete, štepenie z hepatitídy.

Analýza vrátane diagnostiky PCR poskytuje obraz o chorobe, o tom, ako aktívny je vírus v rôznych obdobiach vývoja.

Najprv prichádza kvalitatívna analýza, ktorá potvrdzuje iba hypotézu o infekcii a potom kvantitatívnu, určujúcu zaťaženie pečene. Ideálnou možnosťou je negatívny výsledok pre hepatitídu C v genetickom materiáli pacienta.

Kvalitatívna a kvantitatívna analýza

Existujú kvalitatívne a kvantitatívne analýzy. Podstata prvej je, že určuje prítomnosť infekcie v krvi. A to znamená, že vírus ovplyvňuje zdravé pečeňové bunky. Ak má pacient protilátky proti hepatitíde C, ihneď sa vykoná kvalitatívna skúška. Norma, ktorá by výsledok mala vyvolať, nie je "zistená v krvi". Pri určovaní koncentrácie vírusu je potrebná znalosť citlivosti diagnostického systému, pretože analýza môže vykonávať ľudia, ktorí podstupujú antivírusovú terapiu. Citlivosť analyzátora by nemala byť nižšia ako 50 IU / ml.

Keď sa zistí vírus, vykoná sa kvantitatívna analýza, inými slovami vírusové zaťaženie, ktoré určuje koncentráciu vírusu v krvi a závažnosť ochorenia.

Vírusová RNA, ktorá je v určitom množstve krvi, je definovaná ako norma v množstve 1 ml na 1 cm kryštál. Po kvantifikácii vírusovej záťaže je možné posúdiť stupeň infekcie neinfikovaného prostredia. Akonáhle sa koncentrácia hepatitídy C zvýši v krvi, životné prostredie musí byť izolované.

V prvých štádiách je dôležité zistiť stupeň koncentrácie hepatitídy, aby sa určilo tempo rehabilitácie. Ak je miera hepatitídy C prekročená o viac ako 800 tisíc IU / ml, považuje sa to za príliš vysokú a zvýšenie na jeden milión je kritické. Ak je kvantitatívny rozsah menší ako 400 tisíc IU / ml, predpokladá sa, že kontaminácia iných sa vyskytne s menšou pravdepodobnosťou. Tento údaj jasne uvádza, že hepatitída C v tele je prítomná vo veľmi malých dávkach. Analýza nebola schopná stanoviť kvantitatívnu hodnotu RNA vírusových častíc, takže je niekoľkokrát preradená na presnosť diagnostiky.

Výsledky kvantitatívnej analýzy

Úlohou určenia množstva vírusovej záťaže v krvi pacienta je určiť rozsah infekcie pre ostatných.

Analýza hepatitídy C

umožňuje vyhodnotiť účinnosť antivírusovej terapie, úroveň infekčnosti a počet infikovaných tkanív.

Je dôležité nepovoliť progresiu ochorenia, včas prevziať preventívne opatrenia, predpísať správnu liečbu založenú na diagnostike PCR. Ak je podľa výsledkov hladina vírusovej záťaže nižšia ako 400 tisíc IU / ml, potom môže byť koncentrácia minimálna, čo naznačuje možné úplné zotavenie. Normou pre pozitívny výsledok je absencia infekcie.

Výsledky analýzy PCR:

Pozitívna odpoveď znamená, že v biologickom materiáli existuje infekcia. Analýza umožňuje určiť presný počet infikovaných buniek. Negatívna odpoveď poukazuje na neprítomnosť infekcie, ktorá bola v tele dôkladne vyhľadaná.

Kvantitatívna metóda hepatitídy C je presná a informatívna, vykonávaná na zariadeniach s vysokou citlivosťou. Dešifrovanie výsledkov analýzy umožňuje zistiť, či existuje infekcia a jej špecifickosť, aby ste videli najmenší počet infikovaných buniek na analyzátoroch s vysokou citlivosťou.

Falošne pozitívne alebo opačné výsledky analýzy zriedkavo dávajú, častejšie sa to deje v štúdiách imunoanalýzy.

Nedávno sa vo vyhľadávačoch internetových zdrojov objavuje otázka "kvantitatívna analýza hepatitídy s dekódovaním".

V skutočnosti je vírus hepatitídy bežný a nebezpečný, choroba postihuje pečeň. Jeho meno pochádza z lat. hepatitída - zápal pečene. Infekcia sa prejavuje krvou alebo sexuálnym kontaktom, u dospelých je pravdepodobnejšie, že sa zhoršia vo veku od 25 do 50 rokov.

Existuje niekoľko typov tejto choroby. Hepatitída C nemá výrazný výraz, ale v 40-70% prípadov prechádza do chronickej formy, môže spôsobiť cirhózu pečene a rakovinu. Táto choroba si vyžaduje presnú diagnózu a interpretáciu získaných údajov, pre ktoré sú metódy vyvinuté. Jednou je RNA analýza HCV RNA pomocou PCR.

RNA analýza HCV RNA pomocou PCR

RNA (ribonukleová kyselina) je druh makromolekuly, ktorá je jednou zo zložiek živých buniek. RNA je zodpovedná za kódovanie genetických informácií. Vírus hepatitídy C obsahuje molekulu RNA a je vo zvyku mutovať. Existuje šesť jeho podtypov, rovnako ako mnoho podtypov.

Choroba v chronickom štádiu vedie k fibróze pečene - rastú sa pojivové tkanivá, štruktúra orgánu sa postupne rozpadá. Fibróza je vhodná na včasnú liečbu, pretože pečeň ešte nepodrobila ničivým procesom. Na rozdiel od cirhózy, závažné ireverzibilné ochorenie pečene, pri ktorom sa fibróza môže vyvinúť bez toho, aby sa včas prijali potrebné opatrenia.

Osoba s podozrením na vírus hepatitídy určuje protilátky proti nemu. Ak nie sú prítomné - choroba je vylúčená, v ich prítomnosti sa uchýli k metóde PTSR (reťazová reakcia polimeraznoj). V molekulárnej biológii je experimentálna, ale zaujíma popredné miesto medzi metódami diagnostiky infekčných chorôb. Pomocou toho môže významne zvýšiť koncentráciu fragmentov molekúl vo vzorke. 10 dní po infekcii je už v krvi možné detegovať RNA.

Táto metóda je jediná, ktorá umožňuje identifikáciu ochorenia v počiatočných štádiách. Inými spôsobmi (napr. Biochemickým krvným testom) to nemožno urobiť, pretože pečeň ešte nie je ovplyvnená.

Analýzy hepatitídy C s dekódovaním (PCR) sú spoľahlivým indikátorom prítomnosti vírusu v krvi človeka.

Metóda bola objavená v roku 1993 biochemikou Carrie Mullisovou, za ktorú získal Nobelovu cenu. PCR bol prelom v medicíne a vede, pretože umožnil rýchlu a presnú identifikáciu infekcií v krvi a iných biologických materiáloch človeka. Inými slovami, metóda urýchlila vývoj diagnózy infekčných ochorení.

RNA analýza HCV RNA pomocou PCR je účinná z nasledujúcich dôvodov:

Má dobrú citlivosť - je zistené aj malé množstvo vírusu v krvi; určuje samotný vírus a nie jeho vedľajšie produkty; určuje sa typ patogénu.

Rozdiely v kvantitatívnej analýze HCV RNA z kvalitatívneho

Metóda PCR zahŕňa dve základné metódy štúdia biologického materiálu na vyhľadávanie vírusu hepatitídy C:

Tieto štúdie majú rôzne úlohy.

Kvalitatívna analýza hepatitídy s dekódovaním potvrdzuje prítomnosť vírusu po tom, ako boli protilátky proti tejto chorobe už zistené v krvi. Ak štúdia priniesla pozitívny výsledok, choroba sa našla. Inými slovami, osoba je infikovaná. Ak sa získa negatívny výsledok, znamená to, že osoba nie je infikovaná alebo je vírus príliš malý. Táto koncentrácia nie je týmto spôsobom detegovaná.

Okrem toho je klinický obraz choroby založený na značkách hepatitídy C a interpretácii analýzy. Hlavnými markermi sú imunoglobulíny (protilátky) M a G. Ich prítomnosť v krvi pacienta naznačuje nezvyčajný proces zdravého organizmu. Na základe prítomnosti týchto protilátok je pacient diagnostikovaný zvyčajne s primárnou diagnózou.

Kvantitatívna analýza je predpísaná pre počiatočnú detekciu protilátok a v prípade potreby pre liečbu.

Tiež je kvantitatívna analýza hepatitídy C predpísaná na detekciu zmiešanej hepatitídy (infekcia niekoľkými vírusmi).

Kvantitatívna analýza s dekódovaním sa vykonáva s účelom:

objasnenie konečnej diagnózy; zladenie prognóz týkajúcich sa priebehu ochorenia a jeho liečby - predĺženie, zníženie liečby alebo zmena taktiky; sledovanie liečby.

Medzinárodná ME / ml ukazuje, že množstvo RNA v 1 ml krvi sa skúma. Vysoký kvantitatívny indikátor naznačuje zvýšenú pravdepodobnosť infekcie inej osoby.

Aby ste zaistili, že výsledky sú správne, musíte dodržiavať predpísanú dávku predtým, ako darujete krv:

prišiel do laboratória na prázdny žalúdok, poslednýkrát si môžete vziať jedlo 8 hodín pred procedúrou; dva dni pred štúdiom je zakázané používať alkohol, mastné a vyprážané potraviny; ultrazvuk, masáž, fyzioterapia predtým, ako sa štúdia nemôže uskutočniť; za deň je príjem liekov zakázaný, ak nie je možné zrušiť príjem jednotlivých liekov, je to hlásené pred odberom krvi; pred postupom sa odporúča čo najviac znížiť fyzické a nervové zaťaženie.

Splnenie týchto požiadaviek bude kľúčom k získaniu správnych výsledkov kvantitatívnej analýzy hepatitídy C.

Dekódovanie kvantitatívnej analýzy

Po obdržaní indikátorov kvantitatívnej analýzy je potrebné dešifrovať výsledky testov na hepatitídu C. Výsledky sa vypočítajú v jednotkách ME / ml a v kópiách na ml. Na získanie výsledkov opísaných v kópii sa používa niekoľko metód.

Monitor HCV (konverzný faktor na ME - 2,7); LCX HCV RNA (konverzný faktor pre ME je 3,8).

Tabuľka. Dekódovanie kvantitatívnej analýzy HCV RNA pomocou PCR.

Medinfo.club

Portál o pečeni

Kvantitatívna analýza HCV a jeho interpretácia

Hepatitída C je choroba, ktorá sa môže reprodukovať v zdravých pečeňových bunkách a vyvolávať proliferatívne ochorenia. V dnešnom svete, kedy vírus hepatitídy B bola špecifická mutácia, ľudský imunitný systém stojí v ohrození, pretože v porovnaní s infekciou, to je zanedbateľné. Je tiež potrebné poznamenať, že nie všetci pacienti budú mať prvé príznaky ochorenia, najmä v počiatočných štádiách.

RNA analýza vírusu hepatitídy C - kvantitatívne štúdie, je rýchlosť, ktorá je prítomnosť mierneho množstvo vírusu v krvných buniek pacienta. Podľa štatistík je približne 31% pacientov úplne vyliečených z tohto ochorenia, ak je v počiatočnom štádiu.

V lekárskej praxi, lekári hovoria, že 4 milióny infikovaných symptómy a prvé príznaky neobjavujú, hoci vyspelé formy hepatitídy môže viesť k cirhóze alebo rakovine.

V súčasnej dobe sa v priebehu konania "transfúzia krvi", táto krv je testovaná na prítomnosť vírusu hepatitídy C, ako je choroba prenáša krvný transfúziou.

K dnešnému dňu svet už vyvinul drogy z hepatitídy C s účinnosťou približne 100%. Moderný farmaceutický priemysel vytvoril lieky, ktoré prakticky nemajú žiadne vedľajšie účinky. Mnohí pacienti dostanú prvé výsledky vo forme zmiernenia symptómov a zníženia vírusovej záťaže po týždni užívania. Prečítajte si viac o prípravkoch z hepatitídy z indickej výroby v našom samostatnom článku.

Na trhu spoločností na prepravu indickej medicíny na hepatitídu C "Sofosbuvir Express" sa osvedčila. Táto spoločnosť úspešne pomáha ľuďom zotaviť sa z ochorenia viac ako 2 roky. Komentáre a videá spokojných pacientov tu nájdete. Patria k viac ako 4 000 ľuďom, ktorí sa zotavili kvôli kúpeným drogám. Nezdržujte svoje zdravie v dlhom okne, prejdite na www.sofosbuvir-express.com alebo zavolajte na číslo 8-800-200-59-21

Typy štúdií PCR

PCR (polymerázová reťazová reakcia) je najmodernejšou a najužitočnejšou metódou na štúdium génu vírusu a jeho schopností. Takáto diagnostika môže vyvolať rôzne choroby a určiť ich ďalšiu mutáciu v tele pacienta.

Analýza sa uskutočňuje odobratím krvi, ktorá sa potom umiestni do špeciálnych činidiel, v ktorých dochádza k klonovaniu buniek.

Dve bunky sa vyrábajú z jednej bunky a tak ďalej. V dôsledku toho sa objavujú stovky DNA, vďaka čomu je možné diagnostikovať patogén a identifikovať vírus v počiatočnom štádiu.

Preto je PCR rozdelená do niekoľkých typov:

  • kvalitatívna analýza - rozpoznáva gény infekcie v krvi. Ak je pacient potvrdený pre kvalitatívnu analýzu, mala by sa urobiť kvantitatívna analýza na stanovenie stupňa infekcie. V dôsledku tejto diagnostiky odborníci píšu "zistené / nezistené". "Zistené" - naznačuje, že ochorenie je prítomné v tele a jeho RNA je už zistená. "Nezistené" naznačuje, že vo vzorke nie je žiadny vírusový gén, to znamená, že neexistuje hepatitída RNA. Lekári však odporúčajú vykonať druhú štúdiu po 10 dňoch.
  • kvantitatívna analýza - určuje množstvo genetického materiálu infekcie v krvi. Takáto diagnostika pomáha určiť závažnosť ochorenia a celú klinickú históriu. V dôsledku takejto analýzy je možné napísať len "Pozitívny / Negatívny / Neplatný". "Pozitívny" - zobrazuje infekčnú záťaž. Lekár spôsob diagnózy, určuje ochorenia na stanovenie účinnosti liečby na 4, 12, 16 a 24 týždňov bolezni.Esli vírusové zložky sa pohybuje v rozmedzí 8h10t IU / ml, je liečba účinná, ak vyššie uvedených parametrov - nie. "Negatívny" - gén infekcie sa nenašiel. "Neplatný" - to sa stane, keď je gén nájdený vírus v kvalitatívne, ale ktoré nie sú uvedené v kvantitatívnej analýze. Podobné je, ak je infekcia pod úrovňou.

Rozdiely v kvalitatívnych a kvantitatívnych analýzach

Vírus hepatitídy C - je diagnostikovaná predovšetkým kvantitatívne analýzou, dekódovanie je nevyhnutné pre správnu interpretáciu ochorenia. Ale cez to, že kvalitatívne a kvantitatívne metóda diagnostiky majú svoje odlišnosti, ako je úloha a úloh k výskumu - kvalitatívne - potvrdí prítomnosť infekcie po objavení vírusu protilátok a kvantitatívne - sekundárne spôsob vyvrátiť alebo potvrdenie ochorenia, aby správne a iba diagnózu,

Vysvetlenie kvantitatívneho výskumu

Po diagnostikovaní môžu výsledky interpretovať len lekári, pretože by to malo byť nie v číslach, ale v slovách. Podľa štatistiky je kvantitatívna PCR najcitlivejšou analýzou. Za účelom zistenia, či je prítomná v tele vírus, je nutné pochopiť a vedieť, že kvantitatívna analýza pre hepatitídu C, je dešifrovanie pomocou digitálneho značenia (štandard) infekcie:

RNA hepatitída s

"Detekcia génov vírusu hepatitídy C (HVC) v krvi pacienta je druhou etapou laboratórnej diagnostiky tejto infekčnej patológie. Na detekciu činidla, ktoré nemá bunkovú membránu a teda povrchové antigény, sa používa metóda polymerázovej reťazovej reakcie. Pomocou tejto metódy je to priamo molekula, v ktorej sú všetky jeho genetické informácie zakódované - RNA.

RNA - Ribonukleová kyselina spolu s DNA je súčasťou buniek všetkých živých organizmov. Vírus hepatitídy C obsahuje molekulu RNA a má schopnosť mutovať ju.

Štúdia na prítomnosť genómu HVC sa zvyčajne podáva po vykonaní všeobecného biochemického krvného testu a získa sa pozitívna protilátková odpoveď (anti-HVC).

Čo to znamená?

Výskum na protilátky proti HVC je premietanie, to znamená, že môže byť použitá pre skúmať veľké množstvo ľudí (lekári, tehotné ženy, nemocničných pacientov, darcov, injekčné užívatelia drog, HIV-pozitívne). Negatívny výsledok laboratórnej analýzy anti-HVC naznačuje, že nedošlo k žiadnej imunitnej odpovedi na vírus v krvi subjektu. V týchto prípadoch možno získať negatívny výsledok:

Ak osoba nebola nikdy infikovaná hepatitídou C.

Ak je citlivosť laboratórneho testovacieho systému nižšia ako koncentrácia anti-HVC.

Ak sa infekcia vyskytla menej ako pred 2 mesiacmi a anti-HVC v krvi stále nestačí na určenie. S falošne negatívnou odpoveďou v dôsledku ľudského faktora.

Ak sa získa výsledok, že protilátky proti HVC u pacienta detekovaná, to znamená, že sa vírus hepatitídy C je v tele subjektu v čase prieskumu alebo mal krv pred časom. Ak pozitívny výsledok pre anti-HVC existuje potreba ďalších laboratórnymi testami, ktoré detekujú genetický materiál patogénu, sa stanoví koncentrácia svojich génov (vírusová záťaž, virémia) a stanoviť genotyp.

Analýza RNA vírusu hepatitídy C

Genóm HVC v laboratóriu možno zistiť pomocou niekoľkých štúdií:

rozvetvená DNA (p-DNA);

transkripčná amplifikácia (TMA);

polymerázová reťazová reakcia (PCR).

Metóda p-DNA je lacný a jednoduchý spôsob detekcie vírusového genómu u veľkého počtu sledovaných ľudí. Jeho hlavnou nevýhodou je nízka citlivosť: detekuje HVC len pri koncentrácii nad 500 IU / ml.

Metóda transkripčnej amplifikácie deteguje nukleové kyseliny vírusu v krvnom sére. Analýza má vysokú citlivosť (5-10 IU / ml), ale ešte sa dostatočne nevyskytla do všadeprítomnej laboratórnej praxe.

Metóda PCR v Rusku je najbežnejším a cenovo dostupným laboratórnym vyšetrením s vysokou citlivosťou (od 50 do 60 IU / ml).

Test PCR sa vykonáva v akomkoľvek klinickom laboratóriu, ktoré má príslušnú akreditáciu. Veľmi dôležitou nuansou tejto diagnostickej metódy, ktorá ovplyvňuje výsledok analýzy, je citlivosť skúšobného systému používaného v laboratóriu. Napríklad citlivosť diagnostiky 60 IU / ml, ako v laboratóriách Invitro, umožňuje detegovať vírusovú RNA 3 mesiace po infekcii. Pri nízkej citlivosti testovacieho systému nemôžu byť gény patogénu detegované ani po 4 mesiacoch po infekcii.

RNA vírusu hepatitídy C: metóda PCR

Metóda PCR má mnoho výhod oproti iným laboratórnym testom na detekciu génov HVC:

vysoká citlivosť. Metóda umožňuje určiť genetický materiál patogénu aj pri jeho minimálnej koncentrácii vo vzorke;

väčšia špecifičnosť. Identifikuje gény vírusu špecifického genotypu medzi rôznymi DNA a RNA iných patogénov, čo umožňuje genotypizáciu patogénu;

vykonávanie rýchlosti. Absencia dlhého procesu kultivácie patogénu znižuje čas dosiahnutia výsledku až na niekoľko hodín; univerzálnosť analýzy.

Univerzálny postup pre štúdium umožňuje súčasné použitie jednej vzorky ľudskej krvi na detekciu genetického materiálu rôznych patogénov. Tieto výhody umožňujú považovať PCR za "zlatý štandard" laboratórnej diagnostiky vírusovej hepatitídy C spolu s enzýmovým imunologickým testom na anti-HVC.

PCR je štúdia používaná na stanovenie génov HVC v krvi vyšetrovanej osoby. Štúdia pozostáva z niekoľkých etáp:

Odber vzoriek z biomateriálu.

Zvýšte nárast koncentrácie kópií RNA vo vybranej vzorke.

Detekcia genetického materiálu pomocou špeciálnych testovacích systémov.

Po odobratí žilovej krvi pacient podstúpil umelé iniciovanie procesu opakovanej replikácie (amplifikácie, kopírovania) génov HVC.

Na tento účel sa teplota vo vnútri skúmavky s biologickým materiálom niekoľkokrát mení určitým spôsobom. Keď počet kópií RNA v skúmavke dosiahne požadovanú hodnotu, deteguje sa patogén pomocou špeciálnych diagnostických testov.

kvalita (deteguje prítomnosť vírusu),

kvantitatívna (určuje koncentráciu vírusových génov na jednotku objemu)

genotypický (stanovuje genotyp patogénu).

RNA hepatitídy C: kvalitatívna analýza

Úlohou kvalitatívnej PCR je určiť prítomnosť HVC v prezentovanom biomateriále. Táto štúdia sa zvyčajne vykonáva na skríning diagnostiky ochorenia alebo identifikáciu nosiča. Priraďte ho po tom, ako ho deteguje anti-HVC pomocou testu ELISA.

Na diagnostikovanie hepatitídy C stačí dostatočne zistiť HCV genetický materiál kvalitatívne, to znamená bez počítania jeho koncentrácie v krvnom objeme. Výsledok kvalitatívnej PCR môže byť: "detegovaná RNA" alebo "RNA nezistená".

Presnosť metódy zodpovedá 95%. Súčasne presnosť testovacích diagnostik sami dosiahne 100% a 5% je ľudský faktor, ktorý je vždy prítomný v laboratórnych štúdiách. Aby sa zabránilo falošne negatívnej analýze, najmä u ľudí s nízkou viremiou, je potrebná vysoká citlivosť diagnostického systému použitého v štúdii. Citlivosť testovacieho systému by nemala byť nižšia ako 60 IU / ml.

RNA hepatitídy C: kvantitatívna analýza

Kvantitatívna analýza je predpísaná, ak je potrebné poznať úroveň virémie v ľudskom tele. Indikácie pre túto štúdiu sú:

pozitívny výsledok kvalitatívnej PCR za predpokladu, že sú detegované protilátky proti vírusu;

stanovenie štádia patológie;

definícia vírusovej záťaže pri hepatitíde;

výber kombinácie antivírusových liekov;

Monitorovanie vírusovej odpovede na prebiehajúcu antivírusovú liečbu;

hodnotenie pravdepodobnosti prechodu akútnej hepatitídy C na chronickú.

Výsledok analýzy je vyjadrený v IU / ml (medzinárodné jednotky v 1 ml séra) alebo v kópiách / ml (počet kópií vírusových génov v 1 ml séra). Kvantitatívna PCR nemá normu: normálne by nemal byť detegovaný gén HVC v ľudskej krvi. Výsledky prieskumu sa porovnávajú s referenčnými hodnotami stanovenými pre daný stupeň vírusovej záťaže.

Takže indikátory (v IU / ml):

menej ako 4 × 10 * 5 sa považujú za nízku virémiu;

od 4 × 10 * 5 do 8 × 10 * 5 - stredné;

viac ako 8 × 10 * 5 - vysoká.

Čím viac kópií vírusovej RNA v krvi, tým agresívnejšia je choroba a tým väčšie je riziko prenosu vírusu na iné. Avšak úroveň vírusovej záťaže nie je jediným indikátorom, ktorý ovplyvňuje závažnosť priebehu patológie a ďalšiu prognózu pre pacienta: je tiež dôležitý genotyp patogénu.

Vytvorenie genotypu je nevyhnutné pre určenie správneho liečebného režimu. Určuje aj prognózu pre zdravie a život pacienta. Napríklad vírus 3 genotypu často vedie k fibróze alebo cirhóze pečene v porovnaní s pacientmi nesúcimi 1 genotyp.

Hepatitída C: analýza a interpretácia

RNA Diagnóza hepatitídy C sa nemôže robiť len na základe kvalitatívnej a / alebo kvantitatívnej PCR: stanovenie HVC a úroveň vírusovej záťaže nestačí na predpísanie adekvátnej antivírusovej liečby. Potenciálny pacient musí byť podrobne vyšetrený (klinicky, laboratórne, inštrumentálne), aby mal objektívny obraz o patológii. Správne vymenovať komplex vyšetrení na stanovenie diagnózy hepatitídy C a potom správne dešifrovať výsledky môžu len lekára.


Predchádzajúci Článok

ELISA pre vírusovú hepatitídu

Súvisiace Články Hepatitída