Čo je RNA vírusu hepatitídy C?

Štúdia RNA vírusu hepatitídy C je najdôležitejším postupom, ktorý umožňuje stanoviť trvanie a metódy liečby pacientov s veľkou presnosťou. Diagnóza ochorenia pozostáva z niekoľkých rôznych krvných testov, ako napríklad:

• markery hepatitídy C (anti-HCV);
• detekcia RNA vírusu hepatitídy C (HCV RNA).

Prvá štúdia sa uskutočňuje s prvým podozrením na hepatitídu. Druhá možnosť je najvýznamnejšia v liečbe HCV RNA, preto ju bližšie zvážte.

Čo je vírusová hepatitída C?

Vírusová hepatitída C alebo HCV je infekčné ochorenie postihujúce pečeň. Infekcia vírusom sa prejavuje krvou. Môžete sa nakaziť transfúziou krvi, keď sa nedodržiavajú pravidlá pre sterilizáciu lekárskych nástrojov. Existuje menej prípadov, kedy sa ochorenie získava sexuálne alebo od tehotnej matky k plodu. Hepatitída C je 2 typy.

Chronická hepatitída C je najnebezpečnejšia. Je to forma choroby, ktorá môže trvať celý život. Vedie k vážnym problémom vo fungovaní pečene, ako je cirhóza alebo rakovina. U 70-90% infikovaných ľudí prechádza choroba do chronickej fázy.

Najdôležitejšie nebezpečenstvo hepatitídy C spočíva v tom, že dochádza tajne, bez ikterických príznakov. V tomto prípade sa najčastejšie sťažujú na horúčku, nevoľnosť a zvracanie, telesnú slabosť, zvýšenú únavu, stratu chuti do jedla a hmotnosť. V tomto prípade sa na malom zhutnení pečeňových tkanív často vyskytuje malígna degenerácia. Z tohto dôvodu sa vírusová hepatitída C často nazýva "časová bomba" alebo "láskyplný zabijak".

Ďalšou zvláštnosťou tejto choroby spočíva v jej veľmi pomalom vývoji, odhadovanom desiatkami rokov.

Spravidla infikovaní necítia žiadne príznaky a neočakávajú ich skutočný stav. Často sa choroba môže zistiť iba vtedy, keď sa odvolávame na lekára o inej problematike.

Riziková skupina zahŕňa:

• deti, ktoré dostali vírus hepatitídy C od matky;
• drogovo závislých;
• ľudia, ktorí prepichli časti tela alebo robili tetovanie nesterilnými nástrojmi;
• dostala darcovskú krv alebo orgány (až do roku 1992, kedy nebola vykonaná hemodialýza);
• ľudí infikovaných vírusom HIV;
• Zdravotnícki pracovníci v kontakte s infikovanými pacientmi.

Určenie hepatitídy C RNA

Stanovenie RNA vírusu hepatitídy C, tiež nazývaný hepatitídy C PCR tejto štúdie biologického materiálu (krv), s ktorou možno identifikovať v tele okamžitej dostupnosti genomateriala vírusu hepatitídy B (nejaký daný vírus je jediná častica RNA).

Hlavnou skúšobnou metódou je PCR alebo metóda polymerázovej reťazovej reakcie.

Existujú dva typy krvných testov na stanovenie HCV RNA:

Skúška kvality

Vykonávanie kvalitatívnej analýzy umožňuje zistiť, či je vírus v krvi. Všetci pacienti, ktorí majú protilátky proti hepatitíde C, majú podstúpiť tento test. Jeho výsledkami získate 2 odpovede: "prítomný" alebo "chýba" vírus. Na základe výsledku pozitívneho testu je možné posúdiť aktívne násobenie vírusu, ktorý infikuje zdravé bunky v pečeni.

Test, vykonaný na vysokokvalitnú PCR, je naladený na špecifickú citlivosť od 10 do 500 IU / ml. Ak sa vírus hepatitídy nachádza v krvi so špecifickým obsahom menším ako 10 IU / ml, detekcia vírusu môže byť znemožnená. Veľmi nízka hodnota špecifického obsahu vírusu sa pozoruje u pacientov, ktorým je predpísaná antivírusová liečba. Preto je dôležité, aby citlivosť zdravotníckeho systému bola vysoká na diagnostikovanie a stanovenie kvalitatívneho výsledku pri polymerázovej reťazovej reakcii.

Často sa polymerázová reťazová reakcia C-hepatitídy uskutočňuje ihneď po nájdení zodpovedajúcich protilátok. Nasledujúce testy, keď prechádza antivírusová liečba, sa vykonávajú v 4., 12. a 24. týždni. A ďalšia analýza po ukončení PVT sa vykonáva po 24 týždňoch. Potom - raz za rok.

Kvantitatívny test

Kvantitatívna analýza PCR RNA, niekedy označovaná ako vírusová záťaž, určuje koncentráciu (špecifický obsah) vírusu v krvi. Inými slovami, vírusová záťaž je definovaná ako určité množstvo vírusovej RNA, ktorá môže byť v špecifickom množstve krvi (zvyčajne sa v kocke používa 1 ml, čo je 1 cm). Jednotky pre výsledky testov sú medzinárodné (štandardné) jednotky, rozdelené o jeden mililiter (IU / ml). Obsah vírusu niekedy vyzerá inak, závisí to od laboratórií, v ktorých sa výskum vykonáva. Pri hepatitíde C kvantifikácia niekedy používa hodnoty, ako sú kópie / ml.

Malo by byť zrejmé, že neexistuje žiadna špecifická závislosť na závažnosti C-hepatitídy na koncentrácii tohto kmeňa v krvi.

Kontrola "vírusovej záťaže" vám umožňuje určiť stupeň infekčnosti choroby. Takže riziko kontaktu s vírusom inej osoby sa zvyšuje s nárastom koncentrácie hepatitídy v krvi. Navyše vysoký obsah vírusu znižuje účinok liečby. Malá vírusová záťaž je preto veľmi úspešným faktorom úspešnej liečby.

Okrem toho test hepatitídy C a jeho stanovenie pomocou PCR zohrávajú veľkú úlohu pri aplikácii terapie proti ochoreniu a pri určovaní úspešnosti liečby. Na základe výsledkov testov sa plánuje rehabilitačný kurz. Napríklad s príliš pomalým poklesom špecifickej koncentrácie vírusu hepatitídy sa predĺži antivírusová terapia a naopak.

V modernej medicíne sa predpokladá, že zaťaženie je vyššie ako 800000 ME / ml je vysoké. Zaťaženie je vyššie ako 10000000 ME / ml. Odborníci z rôznych krajín a dodnes nemali rovnaký názor na hranice vírusovej záťaže.

Frekvencia kvantitatívneho testu

Vo všeobecnosti sa kvantitatívna analýza hepatitídy uskutočňuje pred antivírusovou liečbou a 3 mesiace po ukončení liečebných postupov na určenie kvality liečby.

Výsledkom kvantitatívneho testu bude kvantitatívne vyhodnotenie výsledkov vyššie uvedenej vzorky. V dôsledku toho sa vykreslí verdikt "pod meraným rozsahom" alebo "v krvi nebude zistený".

Parameter citlivosti kvalitatívneho testu je zvyčajne nižší ako citlivosť kvantitatívnej analýzy. Chýbajúci prepis naznačuje, že oba typy analýz nenašli RNA vírusu. S testom "pod meraným rozsahom" kvantitatívna analýza pravdepodobne nenašla hepatitídu RNA, hoci to potvrdzuje prítomnosť vírusu s veľmi malým špecifickým obsahom.

Hepatitída C a jej genotypy

Genotypizácia vírusu hepatitídy C RNA diagnostikovať prítomnosť rôznych genetických typov hepatitída C. Veda nepozná viac ako 10 typov v genómu vírusu, ale aj pre lekársku prax dostatočne rozlíšiť niekoľko genotypov, ktoré majú najväčší podiel na oblasti. Určenie genetického typu zohráva kľúčovú úlohu pri výbere časového rozvrhu liečby, čo je veľmi potrebné, ak zoberieme do úvahy širokú škálu vedľajších účinkov liekov proti hepatitíde.

Metódy liečenia vírusovej hepatitídy C

Jediným efektívnym spôsobom, ako liečiť vírus hepatitídy, je spravidla kombinácia 2 liekov: interferón-alfa spolu s ribavirínom. Oddelene tieto lieky nie sú také účinné. Odporúčané dávkovanie liekov a načasovanie aplikácie by mali predpisovať len lekár a individuálne pre každého pacienta. Liečba týmto liekom môže trvať 6 až 12 mesiacov.

Dnes nie sú lieky vynájdené, ktoré zaručujú 100% obnovu vírusu. Avšak pri správne zvolenej liečbe môže liečenie pacientov dosiahnuť až 90% počtu prípadov.

RNA vírusu hepatitídy s tým, čím je

Vírus hepatitídy C (HCV) je zodpovedná za približne 20% akútnej hepatitídy, 60 až 70% pacientov v chronickej hepatitídy, a približne 30% cirhózy a rakoviny pečene. HCV, objavený v roku 1989, je RNA vírus rodu flavivirus z čeľade Togaviridae, veľkosť 40-60 nm, s prevahou obsahu lipidov. Existuje najmenej šesť genotypov a 50 sérotypov HCV. Znalosť genotypu alebo sérotypu (špecifické protilátky genotypu) HCV je užitočná pre odporúčania a liečbu. HCV je prenášaný prostredníctvom kontaktu s kontaminovanou krvou alebo krvnými kontaminovanej prípravky: transfúziou krvi, použitie ihiel a striekačiek po inej osoby bez sterilizácie alebo zle sterilizované, tetovanie, očkovanie nesterilizovaná zariadenia zdieľajú kefka holiaci doplnky, pinzety, manikúra kit. Prítomné v biologických tekutinách (slín, mlieka, vaginálne sekréty, spermy, atď.), Ale v nižšej koncentrácii, než vírus B môžu byť prenášané z matky na plod. Úroveň vertikálneho prenosu u tehotných žien s anti-HCV pozitívnym účinkom sa odhaduje na 2,7-4,4%. Tento ukazovateľ dosahuje hodnotu 5,4-8,6% u tehotných žien s koinfekciou s HCV-HIV. Približne 85% akútnej formy prechádza do chronickej formy. Hepatocelulárny karcinóm môže nastať u približne 20% pacientov s cirhózou pečene (medián 30 rokov) a 1-5% pacientov infikovaných HCV.

Začiatok choroby je zákerný, vírus sa nazýva časová bomba alebo jemný vrah. Sérologické okná medzi prítomnosťou HCV a detekciou anti-HCV sa líšia u rôznych pacientov. Súčasné imunologické testy detegujú protilátky v priemere 7-8 týždňov po nástupe choroby. V prípade spontánneho zotavenia môže anti-HCV pretrvávať počas celého života alebo postupne klesať, kým nezmizne niekoľko rokov. U pacientov s chronickou infekciou pretrváva anti-HCV na dobu neurčitú. Medzi populáciami s nižším rizikom je počet ľudí, ktorí nedokážu diagnostikovať, 0,5 až 1%.

Analýza HCV RNA (stanovenie HCV RNA), často označované ako PCR analýza hepatitídy C je štúdium krvi, ktorý umožňuje identifikáciu genetického materiálu priamo na vírus hepatitídy B (každý vírus - RNA je jedna častica). Tento test sa najčastejšie uskutočňuje pomocou PCR, teda názvom PCR hepatitídy C. Existujú kvalitatívne a kvantitatívne analýzy pre HCV RNA.

Kvalitatívna analýza naznačuje prítomnosť vírusu v krvi. Tento test sa má vykonať u všetkých pacientov, ktorí majú protilátky proti hepatitíde C. Jeho výsledok môže byť zistený alebo nezistený. Referenčné hodnoty (hodnota, ktorá by mala byť normálna) - neboli zistené. Zistený výsledok môže naznačovať, že vírus sa množí a infikuje všetky nové pečeňové bunky. Kvalitatívny test PCR má určitú citlivosť. To znamená, že ak je vírus prítomný v krvi vo veľmi nízkej koncentrácii (pod hranicou citlivosti metódy), výsledok sa nedá dosiahnuť. Preto je pri vykonávaní kvalitatívnej PCR u pacientov s nízkou virémiou (koncentrácia vírusu) napríklad pod antivírusovou terapiou dôležitá znalosť citlivosti diagnostického systému. Na kontrolu virologickej odpovede počas antivírusovej liečby je žiaduce použiť diagnostický systém s citlivosťou najmenej 50 IU / ml.

Príprava pacienta: Doručenie krvi na prázdny žalúdok

materiál: Plazma krvi.

RNA vírusu hepatitídy C, kvantitatívne stanovenie

Čo je RNA vírusu hepatitídy C, kvantifikácia?

Kvantifikácia RNA vírusu hepatitídy pomocou PCR.

Analytické indexy: detekcia RNA vírusu hepatitídy C pomocou polymerázovej reťazovej reakcie (PCR) a stanovenie vírusovej záťaže v krvnej plazme.

Zistiteľný fragment je konzervatívnou časťou genómu vírusu hepatitídy C. Špecifickosť definície je 98%. Citlivosť stanovenia je z 600 IU / ml vírusových častíc v krvnej plazme.

Prečo je dôležité urobiť RNA vírusu hepatitídy C, kvantifikácia?

Kvantitatívna charakterizácia obsahu RNA vírusu hepatitídy C v klinických vzorkách je dôležitá pre posúdenie účinnosti antivírusovej liečby a má prognostickú hodnotu na určenie chronickej hepatitídy. V prípade, že koncentrácia vírusu je nižšia 8h105 IU / ml (2x106 kópií / ml), počas liečby prognózy výhodné, keď vyššie - potom odporúčame používanie iných liečebných režimov. Vírusová záťaž pod 8x105 IU / ml (2x10 kópií / ml) spolu s definíciou genotypu vírusu je nezávislý a najpresnejší parameter účinnosti liečby. Zníženie koncentrácie RNA vírusu hepatitídy C do tretieho dňa od zahájenia liečby o 85% je rýchlym a presným parametrom na predpovedanie účinnosti liečby vedúcej k včasnej virologickej odpovedi.

Aké sú príznaky RNA vírusu hepatitídy C, kvantifikácia?

Indikácie na účely analýzy:

• Pozitívny kvalitatívny test na prítomnosť RNA vírusu hepatitídy C v krvnom sére.
• Určovanie taktiky liečby pacientov.
• Presné hodnotenie účinnosti liečby.

Na čo sa obávate? Chcete získať podrobnejšie informácie o RNA vírusu hepatitídy C, kvantifikácii alebo inej analýze? Alebo potrebujete navštíviť lekára? Môžete to urobiť dohodnite si s lekárom - Klinika eurolaboratórium vždy k vašim službám! Najlepší lekári vás preskúmajú, poradia sa, poskytnú potrebnú pomoc a diagnostikujú. Môžete tiež zavolajte lekára doma. klinika eurolaboratórium je vám otvorená nepretržite.

Ako kontaktovať kliniku:
Telefónne číslo našej kliniky v Kyjeve: (+38 044) 206-20-00 (viackanálové). Tajomník klinickej ordinácie vám vyzdvihne pohodlný deň a hodinu návštevy lekára. Naše súradnice a pokyny sú uvedené tu. Pozrite podrobnejšie informácie o všetkých službách kliniky na jej osobnej stránke.

Ak ste v minulosti vykonali akýkoľvek výskum, uistite sa, že získate výsledky v ordinácii lekára. Ak nebudú vykonané štúdie, urobíme všetko potrebné v našej klinike alebo s našimi kolegami na iných klinikách.

Je potrebné dôkladne sa zaoberať stavom vášho zdravia vo všeobecnosti. Existuje veľa chorôb, ktoré sa v prvom rade nezjavujú v našom tele, ale nakoniec sa ukazuje, že sa už bohužiaľ už liečia príliš neskoro. Preto je to jednoducho potrebné niekoľkokrát do roka podstúpiť lekárske vyšetrenie. nielen na prevenciu hroznej choroby, ale aj na udržanie zdravého myslenia v tele a v tele ako celku.

Ak sa chcete spýtať lekára na otázku - použite sekciu konzultácie online. Možno nájdete odpovede na vaše otázky a čítanie tipy na starostlivosť o seba. Ak máte záujem o recenzie o klinikách a lekároch - pokúste sa nájsť informácie, ktoré potrebujete na fóre. Registrujte sa tiež na zdravotnom portáli eurolaboratórium. aby ste neustále informovali o aktuálnych novinkách a aktualizáciách na webových stránkach o RNA vírusu hepatitídy C, o kvantifikácii a ďalších analýzach na webe, ktoré budú automaticky odoslané poštou.

Ak máte záujem o akékoľvek iné testy, diagnostiku a služby kliník vo všeobecnosti, alebo ak máte ďalšie otázky a návrhy - napíšte nám. určite sa vám pokúsime pomôcť.

PCR analýza

analýza HCV RNA (detekcia RNA vírusu hepatitídy C), často nazývaná PCR analýza hepatitídy C Je krvný test, ktorý vám umožňuje priamo identifikovať genetický materiál vírusu hepatitídy (každý vírus je jednou časticou RNA). Tento test je najčastejšie vykonávaný metódou PCR, a teda názvom PCR s hepatitídou C. Existujú kvalitatívne a kvantitatívne analýzy HCV RNA.

Kvalitatívna analýza indikuje prítomnosť vírusu v krvi. Tento test by sa mal vykonať pre všetkých pacientov, ktorí majú protilátky proti hepatitíde C. Jeho výsledok môže byť "detegovaný" alebo "nedetekovateľný". Referenčné hodnoty (hodnota, ktorá by mala byť normálna) sa "nezistili". Výsledok "objavený" môže naznačovať, že vírus sa množí a infikuje všetky nové pečeňové bunky. Kvalitatívny test PCR má určitú citlivosť (10-500 IU / ml). To znamená, že ak je vírus prítomný v krvi vo veľmi nízkej koncentrácii (pod hranicou citlivosti metódy), môže sa získať výsledok "nezistený". Preto je pri vykonávaní kvalitatívnej PCR u pacientov s nízkou virémiou (koncentrácia vírusu) napríklad pod antivírusovou terapiou dôležitá znalosť citlivosti diagnostického systému. Na kontrolu virologickej odpovede počas antivírusovej liečby je žiaduce použiť diagnostický systém s citlivosťou najmenej 50 IU / ml. Tieto kritériá zodpovedajú, napríklad analyzátory COBAS Amplicor HCV-TEST (analytická citlivosť 50 IU / ml, alebo 100 kópií / ml), HCV-RNA RealBest (analytická citlivosť 15 IU / ml a 38 kópií / ml), a ďalšie.

Náklady na PCR

PCR analýza, náklady čo závisí od použitých činidiel a môže sa pohybovať od 300 rubľov. až 5000 rubľov. beží od jedného dňa do týždňa.

Spôsob tiež sa tiež používa PCR pre HCV RNA transkripčný amplifikácie (TMA), má lepšiu citlivosť (v poriadku 5-10 IU / ml.), Ale táto metóda nie je ešte v Rusku cirkuluje.

Ako často mám robiť PCR proti hepatitíde C? Obvykle sa robí bezprostredne po detekcii protilátky proti hepatitíde typu C a po 4 minútach, 12 minútach, 24 týždňov antivírusovej terapie a 24 týždňov po ukončení OEM, a potom - ročne v prípade SVR.

Obr. 1. Príklad výsledkov PCR s vysokou kvalitou hepatitídy C

Kvantitatívna analýza PCR (vírusová záťaž) je testom koncentrácie vírusu (viremie) v krvi. Vírusová záťaž je počet jednotiek genetického materiálu (vírusová RNA), ktorá je prítomná v určitom objeme krvi (zvyčajne 1 ml, čo zodpovedá 1 kubickému centimeteru). Toto číslo je vyjadrené v číslach, ME / ml jednotiek (medzinárodné jednotky na mililiter). Množstvo vírusu môže byť zobrazené rôznymi spôsobmi. Napríklad 1,5 milióna IU / ml, čo zodpovedá 1 500 000 IU / ml alebo 1,5 x 106 6 IU / ml. V niektorých laboratóriách sa používajú iné jednotky merania - kópie / ml. Faktor konverzie z kópií na medzinárodné jednotky sa líši pre rôzne testovacie systémy. Približne hodnoty sa môžu prepočítať podľa vzorca 1 ME / ml = 4 kópie / ml, napríklad 5,5 x 105 5 IU / ml = 2,2 x 106 kópií / ml.

Je dôležité vedieť, že medzi koncentráciou vírusu v krvi a závažnosťou hepatitídy C nie je žiadny priamy vzťah.

Čo ovplyvňuje vírusovú záťaž?

Po prvé, infekčnosť. Čím vyššia je koncentrácia vírusu, tým väčšie je riziko prenosu vírusu napríklad sexuálnymi kontaktmi alebo vertikálnym spôsobom. Po druhé, koncentrácia vírusu ovplyvňuje účinnosť liečby (ak je liečba založená na interferóne). Nízke vírusové zaťaženie je teda priaznivým faktorom v terapii a veľmi vysoké - nepriaznivé. Kvantitatívna PCR má tiež veľký význam pri vykonávaní liečby interferónom, aby zhodnotila jeho úspech a plánovala trvanie kurzu. Takže s rýchlou odpoveďou na liečbu a nízkou virémiou pred liečbou sa dá skrátiť čas liečby. Naopak, s pomalým poklesom koncentrácie vírusu sa môže HTV predĺžiť.

Aké zaťaženie sa považuje za nízke a čo je vysoké?

Vysoké zaťaženie sa považuje za viac ako 800 x 10 3 alebo 800 000 ME / ml, čo je približne 300 x 104 alebo 3 000 000 kópií / ml. Zaťaženie nad 1 x 107 ME / ml je považované za veľmi vysoké. Medzi odborníkmi však stále neexistuje spoločné stanovisko o hodnotách, ktoré rozlišujú medzi vysokou a nízkou viremiou. V niektorých dielach je to číslo 400 000 ME / ml.

Ako často mám robiť kvantitatívny test?

Obvykle sa uskutočňuje pred liečbou a po 12. týždni liečby, aby sa vyhodnotila jeho účinnosť v prípade, že sa stále zisťuje kvalitatívny test RNA.

Výsledkom kvantitatívneho testu môže byť kvantitatívne hodnotenie virémie vo vyššie opísanom formáte, ako aj výsledky "pod meracím rozsahom" a "nezistené".

Prah citlivosti kvantitatívnej PCR je zvyčajne vyšší ako kvalitatívny prah. Pre systém COBAS AMPLICOR je teda 600 ME / ml. Výsledok "nezistený" by mohol znamenať, že kvantitatívny test a potvrdzujúci kvalitatívny test nezistili vírusovú RNA. Výsledok "pod rozsahom merania" znamená, že kvantitatívny test nezistil hepatitídu C RNA, ale vírus je prítomný vo veľmi nízkej koncentrácii (ak bol vykonaný dodatočný potvrdzujúci kvalitatívny test).

RNA hepatitída s kvantitatívnou normou

Vírus hepatitídy C je schopný reprodukovať v krvných bunkách a spôsobiť lymfoproliferatívne ochorenia. Vďaka viacerým mutáciám dochádza k oslabeniu obranyschopnosti tela, objavujú sa genotypy a podtypy vírusu. Správna a včasná identifikácia konkrétneho typu závisí od účinnosti antivírusovej liečby. Nebezpečenstvo infekcie je, že choroba je asymptomatická. Celkovo 15 percent zo 100 môže mať nauzeu a vracanie, stratu hmotnosti a horúčku.

Definícia vírusu hepatitídy C

Štandardnou normou hepatitídy C sú veľkosti od 40 do 60 nm, s väčšinou lipidov, poškodenie pečene v dôsledku akútneho alebo chronického priebehu ochorenia. Hepatitída C, menovite vírus RNA z rodiny Togaviridae, je extrémne pretrvávajúca, prenášaná transfúziou krvi alebo použitím nesterilných látok, nesprávnou hygienou kúpeľňového príslušenstva, Kvantitatívna analýza umožňuje vyšetriť krv a identifikovať genetickú štruktúru infikovaného vírusu.

V prípade hepatitídy C a jej genotypov, ktoré sa majú určiť, sa vykoná kvantitatívna analýza. V závislosti od analyzátora možno určiť tri úrovne výskytu vírusu RNA.

Subtypy môžu produkovať rôzne modifikácie, takže špecifickosť a citlivosť analyzátora by mala byť stopercentná. Okrem odhalenia ochorenia u pacienta je potrebné určiť stupeň jeho závažnosti. Niektoré laboratóriá nemajú všetky údaje o definíciách vírusu RNA, existuje možnosť falošnej pozitívnej odpovede.

Štúdia hepatitídy C bude presnejšia pri štúdiu týchto ukazovateľov:

ALAT, ASAT; alkalickej fosfatázy; LDH.

Pripomínajúc výsledky týchto indikátorov a celkový stav tela, je zobrazený výsledok ukazujúci stupeň infekcie, formu a počet buniek hepatitídy C v krvi. To prispieva k hojivému procesu a účinnosti antivírusovej liečby.

Druhy analýzy hepatitídy C

Polydizovaná reťazová reakcia (PCR) poskytuje myšlienku množstva častíc DNA v analýzach pacienta a správne identifikuje pôvodcu infekcie.

Infekčné látky sa môžu prejaviť. Takéto infekčné ochorenie pečene, ako je hepatitída C, je v súčasnosti liečiteľné, keď je zistené v čase. Ak existuje podozrenie na vírus, vykoná sa analýza PCR.

Zatiaľ čo príznaky vírusu môžu byť maskované dlhú dobu, človek nemusí cítiť nástup priebehu ochorenia. Ale s dôkladným vyšetrením v 60 až 70% prípadov sa zistí hepatitída C, primárna analýza, v ktorej je ELISA, potom nasleduje PCR diagnóza. Analýza sa vykonáva v určitých obdobiach na určenie štádia ochorenia a predpísanie príslušnej liečby. Robiť bez nej, bez použitia všetkých týchto postupov, môžete, štepenie z hepatitídy.

Analýza vrátane diagnostiky PCR poskytuje obraz o chorobe, o tom, ako aktívny je vírus v rôznych obdobiach vývoja.

Najprv prichádza kvalitatívna analýza, ktorá potvrdzuje iba hypotézu o infekcii a potom kvantitatívnu, určujúcu zaťaženie pečene. Ideálnou možnosťou je negatívny výsledok pre hepatitídu C v genetickom materiáli pacienta.

Kvalitatívna a kvantitatívna analýza

Existujú kvalitatívne a kvantitatívne analýzy. Podstata prvej je, že určuje prítomnosť infekcie v krvi. A to znamená, že vírus ovplyvňuje zdravé pečeňové bunky. Ak má pacient protilátky proti hepatitíde C, ihneď sa vykoná kvalitatívna skúška. Norma, ktorá by výsledok mala vyvolať, nie je "zistená v krvi". Pri určovaní koncentrácie vírusu je potrebná znalosť citlivosti diagnostického systému, pretože analýza môže vykonávať ľudia, ktorí podstupujú antivírusovú terapiu. Citlivosť analyzátora by nemala byť nižšia ako 50 IU / ml.

Keď sa zistí vírus, vykoná sa kvantitatívna analýza, inými slovami vírusové zaťaženie, ktoré určuje koncentráciu vírusu v krvi a závažnosť ochorenia.

Vírusová RNA, ktorá je v určitom množstve krvi, je definovaná ako norma v množstve 1 ml na 1 cm kryštál. Po kvantifikácii vírusovej záťaže je možné posúdiť stupeň infekcie neinfikovaného prostredia. Akonáhle sa koncentrácia hepatitídy C zvýši v krvi, životné prostredie musí byť izolované.

V prvých štádiách je dôležité zistiť stupeň koncentrácie hepatitídy, aby sa určilo tempo rehabilitácie. Ak je miera hepatitídy C prekročená o viac ako 800 tisíc IU / ml, považuje sa to za príliš vysokú a zvýšenie na jeden milión je kritické. Ak je kvantitatívny rozsah menší ako 400 tisíc IU / ml, predpokladá sa, že kontaminácia iných sa vyskytne s menšou pravdepodobnosťou. Tento údaj jasne uvádza, že hepatitída C v tele je prítomná vo veľmi malých dávkach. Analýza nebola schopná stanoviť kvantitatívnu hodnotu RNA vírusových častíc, takže je niekoľkokrát preradená na presnosť diagnostiky.

Výsledky kvantitatívnej analýzy

Úlohou určenia množstva vírusovej záťaže v krvi pacienta je určiť rozsah infekcie pre ostatných.

Analýza hepatitídy C

umožňuje vyhodnotiť účinnosť antivírusovej terapie, úroveň infekčnosti a počet infikovaných tkanív.

Je dôležité nepovoliť progresiu ochorenia, včas prevziať preventívne opatrenia, predpísať správnu liečbu založenú na diagnostike PCR. Ak je podľa výsledkov hladina vírusovej záťaže nižšia ako 400 tisíc IU / ml, potom môže byť koncentrácia minimálna, čo naznačuje možné úplné zotavenie. Normou pre pozitívny výsledok je absencia infekcie.

Výsledky analýzy PCR:

Pozitívna odpoveď znamená, že v biologickom materiáli existuje infekcia. Analýza umožňuje určiť presný počet infikovaných buniek. Negatívna odpoveď poukazuje na neprítomnosť infekcie, ktorá bola v tele dôkladne vyhľadaná.

Kvantitatívna metóda hepatitídy C je presná a informatívna, vykonávaná na zariadeniach s vysokou citlivosťou. Dešifrovanie výsledkov analýzy umožňuje zistiť, či existuje infekcia a jej špecifickosť, aby ste videli najmenší počet infikovaných buniek na analyzátoroch s vysokou citlivosťou.

Falošne pozitívne alebo opačné výsledky analýzy zriedkavo dávajú, častejšie sa to deje v štúdiách imunoanalýzy.

Nedávno sa vo vyhľadávačoch internetových zdrojov objavuje otázka "kvantitatívna analýza hepatitídy s dekódovaním".

V skutočnosti je vírus hepatitídy bežný a nebezpečný, choroba postihuje pečeň. Jeho meno pochádza z lat. hepatitída - zápal pečene. Infekcia sa prejavuje krvou alebo sexuálnym kontaktom, u dospelých je pravdepodobnejšie, že sa zhoršia vo veku od 25 do 50 rokov.

Existuje niekoľko typov tejto choroby. Hepatitída C nemá výrazný výraz, ale v 40-70% prípadov prechádza do chronickej formy, môže spôsobiť cirhózu pečene a rakovinu. Táto choroba si vyžaduje presnú diagnózu a interpretáciu získaných údajov, pre ktoré sú metódy vyvinuté. Jednou je RNA analýza HCV RNA pomocou PCR.

RNA analýza HCV RNA pomocou PCR

RNA (ribonukleová kyselina) je druh makromolekuly, ktorá je jednou zo zložiek živých buniek. RNA je zodpovedná za kódovanie genetických informácií. Vírus hepatitídy C obsahuje molekulu RNA a je vo zvyku mutovať. Existuje šesť jeho podtypov, rovnako ako mnoho podtypov.

Choroba v chronickom štádiu vedie k fibróze pečene - rastú sa pojivové tkanivá, štruktúra orgánu sa postupne rozpadá. Fibróza je vhodná na včasnú liečbu, pretože pečeň ešte nepodrobila ničivým procesom. Na rozdiel od cirhózy, závažné ireverzibilné ochorenie pečene, pri ktorom sa fibróza môže vyvinúť bez toho, aby sa včas prijali potrebné opatrenia.

Osoba s podozrením na vírus hepatitídy určuje protilátky proti nemu. Ak nie sú prítomné - choroba je vylúčená, v ich prítomnosti sa uchýli k metóde PTSR (reťazová reakcia polimeraznoj). V molekulárnej biológii je experimentálna, ale zaujíma popredné miesto medzi metódami diagnostiky infekčných chorôb. Pomocou toho môže významne zvýšiť koncentráciu fragmentov molekúl vo vzorke. 10 dní po infekcii je už v krvi možné detegovať RNA.

Táto metóda je jediná, ktorá umožňuje identifikáciu ochorenia v počiatočných štádiách. Inými spôsobmi (napr. Biochemickým krvným testom) to nemožno urobiť, pretože pečeň ešte nie je ovplyvnená.

Analýzy hepatitídy C s dekódovaním (PCR) sú spoľahlivým indikátorom prítomnosti vírusu v krvi človeka.

Metóda bola objavená v roku 1993 biochemikou Carrie Mullisovou, za ktorú získal Nobelovu cenu. PCR bol prelom v medicíne a vede, pretože umožnil rýchlu a presnú identifikáciu infekcií v krvi a iných biologických materiáloch človeka. Inými slovami, metóda urýchlila vývoj diagnózy infekčných ochorení.

RNA analýza HCV RNA pomocou PCR je účinná z nasledujúcich dôvodov:

Má dobrú citlivosť - je zistené aj malé množstvo vírusu v krvi; určuje samotný vírus a nie jeho vedľajšie produkty; určuje sa typ patogénu.

Rozdiely v kvantitatívnej analýze HCV RNA z kvalitatívneho

Metóda PCR zahŕňa dve základné metódy štúdia biologického materiálu na vyhľadávanie vírusu hepatitídy C:

Tieto štúdie majú rôzne úlohy.

Kvalitatívna analýza hepatitídy s dekódovaním potvrdzuje prítomnosť vírusu po tom, ako boli protilátky proti tejto chorobe už zistené v krvi. Ak štúdia priniesla pozitívny výsledok, choroba sa našla. Inými slovami, osoba je infikovaná. Ak sa získa negatívny výsledok, znamená to, že osoba nie je infikovaná alebo je vírus príliš malý. Táto koncentrácia nie je týmto spôsobom detegovaná.

Okrem toho je klinický obraz choroby založený na značkách hepatitídy C a interpretácii analýzy. Hlavnými markermi sú imunoglobulíny (protilátky) M a G. Ich prítomnosť v krvi pacienta naznačuje nezvyčajný proces zdravého organizmu. Na základe prítomnosti týchto protilátok je pacient diagnostikovaný zvyčajne s primárnou diagnózou.

Kvantitatívna analýza je predpísaná pre počiatočnú detekciu protilátok a v prípade potreby pre liečbu.

Tiež je kvantitatívna analýza hepatitídy C predpísaná na detekciu zmiešanej hepatitídy (infekcia niekoľkými vírusmi).

Kvantitatívna analýza s dekódovaním sa vykonáva s účelom:

objasnenie konečnej diagnózy; zladenie prognóz týkajúcich sa priebehu ochorenia a jeho liečby - predĺženie, zníženie liečby alebo zmena taktiky; sledovanie liečby.

Medzinárodná ME / ml ukazuje, že množstvo RNA v 1 ml krvi sa skúma. Vysoký kvantitatívny indikátor naznačuje zvýšenú pravdepodobnosť infekcie inej osoby.

Aby ste zaistili, že výsledky sú správne, musíte dodržiavať predpísanú dávku predtým, ako darujete krv:

prišiel do laboratória na prázdny žalúdok, poslednýkrát si môžete vziať jedlo 8 hodín pred procedúrou; dva dni pred štúdiom je zakázané používať alkohol, mastné a vyprážané potraviny; ultrazvuk, masáž, fyzioterapia predtým, ako sa štúdia nemôže uskutočniť; za deň je príjem liekov zakázaný, ak nie je možné zrušiť príjem jednotlivých liekov, je to hlásené pred odberom krvi; pred postupom sa odporúča čo najviac znížiť fyzické a nervové zaťaženie.

Splnenie týchto požiadaviek bude kľúčom k získaniu správnych výsledkov kvantitatívnej analýzy hepatitídy C.

Dekódovanie kvantitatívnej analýzy

Po obdržaní indikátorov kvantitatívnej analýzy je potrebné dešifrovať výsledky testov na hepatitídu C. Výsledky sa vypočítajú v jednotkách ME / ml a v kópiách na ml. Na získanie výsledkov opísaných v kópii sa používa niekoľko metód.

Monitor HCV (konverzný faktor na ME - 2,7); LCX HCV RNA (konverzný faktor pre ME je 3,8).

Tabuľka. Dekódovanie kvantitatívnej analýzy HCV RNA pomocou PCR.

Markery hepatitídy C a interpretácia výsledkov kvantitatívnej analýzy HCV RNA

Nedávno sa vo vyhľadávačoch internetových zdrojov objavuje otázka "kvantitatívna analýza hepatitídy s dekódovaním".

V skutočnosti je vírus hepatitídy bežný a nebezpečný, choroba postihuje pečeň. Jeho meno pochádza z lat. hepatitída - zápal pečene. Infekcia sa prejavuje krvou alebo sexuálnym kontaktom, u dospelých je pravdepodobnejšie, že sa zhoršia vo veku od 25 do 50 rokov.

Existuje niekoľko typov tejto choroby. Hepatitída C nemá výrazný výraz, ale v 40-70% prípadov prechádza do chronickej formy, môže spôsobiť cirhózu pečene a rakovinu. Táto choroba si vyžaduje presnú diagnózu a interpretáciu získaných údajov, pre ktoré sú metódy vyvinuté. Jednou je RNA analýza HCV RNA pomocou PCR.

RNA analýza HCV RNA pomocou PCR

RNA (ribonukleová kyselina) je druh makromolekuly, ktorá je jednou zo zložiek živých buniek. RNA je zodpovedná za kódovanie genetických informácií. Vírus hepatitídy C obsahuje molekulu RNA a je vo zvyku mutovať. Existuje šesť jeho podtypov, rovnako ako mnoho podtypov.

Choroba v chronickom štádiu vedie k fibróze pečene - rastú sa pojivové tkanivá, štruktúra orgánu sa postupne rozpadá. Fibróza je vhodná na včasnú liečbu, pretože pečeň ešte nepodrobila ničivým procesom. Na rozdiel od cirhózy, závažné ireverzibilné ochorenie pečene, pri ktorom sa fibróza môže vyvinúť bez toho, aby sa včas prijali potrebné opatrenia.

Osoba s podozrením na vírus hepatitídy určuje protilátky proti nemu. Ak nie sú prítomné - choroba je vylúčená, v ich prítomnosti sa uchýli k metóde PTSR (reťazová reakcia polimeraznoj). V molekulárnej biológii je experimentálna, ale zaujíma popredné miesto medzi metódami diagnostiky infekčných chorôb. Pomocou toho môže významne zvýšiť koncentráciu fragmentov molekúl vo vzorke. 10 dní po infekcii je už v krvi možné detegovať RNA.

Táto metóda je jediná, ktorá umožňuje identifikáciu ochorenia v počiatočných štádiách. Inými spôsobmi (napr. Biochemickým krvným testom) to nemožno urobiť, pretože pečeň ešte nie je ovplyvnená.

Metóda bola objavená v roku 1993 biochemikou Carrie Mullisovou, za ktorú získal Nobelovu cenu. PCR bol prelom v medicíne a vede, pretože umožnil rýchlu a presnú identifikáciu infekcií v krvi a iných biologických materiáloch človeka. Inými slovami, metóda urýchlila vývoj diagnózy infekčných ochorení.

RNA analýza HCV RNA pomocou PCR je účinná z nasledujúcich dôvodov:

• Má dobrú citlivosť - je zistené aj malé množstvo vírusu v krvi;
• určuje samotný vírus a nie jeho vedľajšie produkty;
• určuje sa typ patogénu.

Rozdiely v kvantitatívnej analýze HCV RNA z kvalitatívneho

Metóda PCR zahŕňa dve základné metódy štúdia biologického materiálu na vyhľadávanie vírusu hepatitídy C:

Tieto štúdie majú rôzne úlohy.

Kvalitatívna analýza hepatitídy s dekódovaním potvrdzuje prítomnosť vírusu po tom, ako boli protilátky proti tejto chorobe už zistené v krvi. Ak štúdia priniesla pozitívny výsledok, choroba sa našla. Inými slovami, osoba je infikovaná. Ak sa získa negatívny výsledok, znamená to, že osoba nie je infikovaná alebo je vírus príliš malý. Táto koncentrácia nie je týmto spôsobom detegovaná.

Okrem toho je klinický obraz choroby založený na značkách hepatitídy C a interpretácii analýzy. Hlavnými markermi sú imunoglobulíny (protilátky) M a G. Ich prítomnosť v krvi pacienta naznačuje nezvyčajný proces zdravého organizmu. Na základe prítomnosti týchto protilátok je pacient diagnostikovaný zvyčajne s primárnou diagnózou.

Kvantitatívna analýza je predpísaná pre počiatočnú detekciu protilátok a v prípade potreby pre liečbu.

Tiež je kvantitatívna analýza hepatitídy C predpísaná na detekciu zmiešanej hepatitídy (infekcia niekoľkými vírusmi).

Kvantitatívna analýza s dekódovaním sa vykonáva s účelom:

• objasnenie konečnej diagnózy;
• zladenie prognóz týkajúcich sa priebehu ochorenia a jeho liečby - predĺženie, zníženie liečby alebo zmena taktiky;
• sledovanie liečby.

Aby ste zaistili, že výsledky sú správne, musíte dodržiavať predpísanú dávku predtým, ako darujete krv:

• prišiel do laboratória na prázdny žalúdok, poslednýkrát si môžete vziať jedlo 8 hodín pred procedúrou;
• dva dni pred štúdiom je zakázané používať alkohol, mastné a vyprážané potraviny;
• ultrazvuk, masáž, fyzioterapia predtým, ako sa štúdia nemôže uskutočniť;
• za deň je príjem liekov zakázaný, ak nie je možné zrušiť príjem jednotlivých liekov, je to hlásené pred odberom krvi;
• pred postupom sa odporúča čo najviac znížiť fyzické a nervové zaťaženie.

Splnenie týchto požiadaviek bude kľúčom k získaniu správnych výsledkov kvantitatívnej analýzy hepatitídy C.

Dekódovanie kvantitatívnej analýzy

Po obdržaní indikátorov kvantitatívnej analýzy je potrebné dešifrovať výsledky testov na hepatitídu C. Výsledky sa vypočítajú v jednotkách ME / ml a v kópiách na ml. Na získanie výsledkov opísaných v kópii sa používa niekoľko metód.

• Monitor HCV (konverzný faktor na ME - 2,7);
• LCX HCV RNA (konverzný faktor pre ME je 3,8).

Tabuľka. Dekódovanie kvantitatívnej analýzy HCV RNA pomocou PCR.

Odrody a nevyhnutnosť použitia PCR štúdií

Vírus hepatitídy C je vírus, ktorý obsahuje molekulu RNA. Je schopný vyhnúť sa imunitnej odpovedi tela kvôli vysokým schopnostiam pre mutáciu. Existuje šesť hlavných genotypov vírusu a mnohých podtypov. V našom regióne sú bežné najmä genotypy 1, 2 a 3.

V 75 - 80% ochorenia ide do chronickej formy, ktorá spôsobuje fibrózu pečene - stav, v ktorom je pečeňové tkanivo nahradené spojivovým tkanivom. Fibróza naopak vedie k rakovine alebo cirhóze. Hlavným spôsobom prenosu choroby je krv. Ak má osoba indikáciu na testovanie hepatitídy C, vykonajú sa dva základné testy. Identifikujte protilátky proti vírusu a v ich neprítomnosti sa verí, že nemá hepatitídu. Ak je v krvi prítomná prítomnosť protilátok proti vírusu hepatitídy, vykoná sa analýza PCR.

RNA je táto metóda určená v krvi už 10-12 dní po infekcii a indikuje, že vírus sa aktívne množí v tele. Počas tohto obdobia je jednoducho nemožné detekovať vírus iným spôsobom, pretože ešte nevytvára špecifické protilátky a poškodenia pečene sú stále neviditeľné v biochemických analýzach a biopsii.

Odrody výskumu s použitím metódy PCR

Analýza pomocou polymerázovej reťazovej reakcie má určité výhody:

1. Pri takejto štúdii je určený samotný vírus, nie produkty jeho vitálnej aktivity. V tomto prípade je možné určiť typ patogénu.
2. Táto technika má vysokú špecifickosť vďaka tomu, že sa skúma iba určitá oblasť DNA, pravdepodobnosť získania chybných výsledkov sa znižuje.
3. Má veľmi vysokú citlivosť, dokonca aj minimálne množstvo vírusu v krvi.

Existujú dve hlavné metódy krvného testovania hepatitídy C pomocou PCR: kvalitatívna a kvantitatívna PCR analýza. Na určenie prítomnosti vírusu sa používa kvalitatívna metóda. Všetkým, ktorí mali protilátky proti hepatitíde v krvi, sa urobí analýza. Výsledok môže byť iba dvoch typov: "zistené" a "nezistené", posledná hodnota sa považuje za normu.

Pozitívny výsledok testu znamená, že vo vzorke boli nájdené fragmenty vírusovej RNA, čo zase naznačuje, že osoba bola infikovaná hepatitídou. V prípade negatívneho výsledku sú možné dve možnosti: nedošlo k žiadnej infekcii alebo jej koncentrácia je taká nízka, že táto metóda nie je detekovaná.

Kvantitatívna metóda sa v podstate líši v štúdii podľa jej úloh a indikácií. Nie všetci pacienti s hepatitídou podstupujú takúto analýzu. Ako každý iný má konkrétne ciele. Určuje sa vírusová záťaž alebo kvantitatívna analýza PCR na RNA vírusu:

• určiť RNA vírusu v krvi a diagnózu "vírusovej hepatitídy";
• predpovedať chronickú hepatitídu a priebeh ochorenia;
• na monitorovanie antivírusovej liečby a rozhodovanie o tom, či sa má predĺžiť, znížiť alebo zmeniť taktiku liečby.

Štúdia sa vykonáva, ak existujú takéto indikácie:

• hepatitída C sa zistí v kvalitatívnom výskume a protilátky sa nachádzajú v krvi;
• so zmiešanou hepatitídou;
• ak je plánovaná antivírusová terapia;
• počas a po liečbe hepatitídy C;
• v prítomnosti chronickej a akútnej hepatitídy C.

Test sa vykoná na odhad počtu jednotiek vírusu v danom objeme vzorky krvi 1 cm3 alebo 1 ml. Výsledky sú uvedené na obrázkoch. Indexy sa používajú: IU / ml, čo znamená medzinárodnú jednotku na mililiter a kópie na ml, počet kópií RNA v 1 ml vzorke. Čím vyšší je kvantitatívny indikátor analýzy, tým väčšia je pravdepodobnosť prenosu vírusu na inú osobu.

P-DNA je spôsob rozvetvenej DNA. Jednoduchšia a lacnejšia metóda. Používa sa pre viac vzoriek, má nízku citlivosť od 500 IU / ml. S takou citlivosťou je možné detekovať vírus, aj keď je prítomný v krvi.

TMA je spôsob transkripčnej amplifikácie. Táto technika odhaľuje nukleové kyseliny v krvi. Má nízke náklady a pri tej istej vysokej citlivosti od 5 do 10 IU / ml. Relatívne nová technika, ktorá umožňuje urýchliť a znížiť náklady na testovanie.

Výsledky kvantitatívnej analýzy stanovenia vírusu RNA predloženej laboratóriom sa interpretujú takto:

Medinfo.club

Portál o pečeni

Kvantitatívna analýza HCV a jeho interpretácia

Hepatitída C je choroba, ktorá sa môže reprodukovať v zdravých pečeňových bunkách a vyvolávať proliferatívne ochorenia. V dnešnom svete, kedy vírus hepatitídy B bola špecifická mutácia, ľudský imunitný systém stojí v ohrození, pretože v porovnaní s infekciou, to je zanedbateľné. Je tiež potrebné poznamenať, že nie všetci pacienti budú mať prvé príznaky ochorenia, najmä v počiatočných štádiách.

RNA analýza vírusu hepatitídy C - kvantitatívne štúdie, je rýchlosť, ktorá je prítomnosť mierneho množstvo vírusu v krvných buniek pacienta. Podľa štatistík je približne 31% pacientov úplne vyliečených z tohto ochorenia, ak je v počiatočnom štádiu.

V lekárskej praxi, lekári hovoria, že 4 milióny infikovaných symptómy a prvé príznaky neobjavujú, hoci vyspelé formy hepatitídy môže viesť k cirhóze alebo rakovine.

V súčasnej dobe sa v priebehu konania "transfúzia krvi", táto krv je testovaná na prítomnosť vírusu hepatitídy C, ako je choroba prenáša krvný transfúziou.

K dnešnému dňu svet už vyvinul drogy z hepatitídy C s účinnosťou približne 100%. Moderný farmaceutický priemysel vytvoril lieky, ktoré prakticky nemajú žiadne vedľajšie účinky. Mnohí pacienti dostanú prvé výsledky vo forme zmiernenia symptómov a zníženia vírusovej záťaže po týždni užívania. Prečítajte si viac o prípravkoch z hepatitídy z indickej výroby v našom samostatnom článku.

Na trhu spoločností na prepravu indickej medicíny na hepatitídu C "Sofosbuvir Express" sa osvedčila. Táto spoločnosť úspešne pomáha ľuďom zotaviť sa z ochorenia viac ako 2 roky. Komentáre a videá spokojných pacientov tu nájdete. Patria k viac ako 4 000 ľuďom, ktorí sa zotavili kvôli kúpeným drogám. Nezdržujte svoje zdravie v dlhom okne, prejdite na www.sofosbuvir-express.com alebo zavolajte na číslo 8-800-200-59-21

Typy štúdií PCR

PCR (polymerázová reťazová reakcia) je najmodernejšou a najužitočnejšou metódou na štúdium génu vírusu a jeho schopností. Takáto diagnostika môže vyvolať rôzne choroby a určiť ich ďalšiu mutáciu v tele pacienta.

Analýza sa uskutočňuje odobratím krvi, ktorá sa potom umiestni do špeciálnych činidiel, v ktorých dochádza k klonovaniu buniek.

Dve bunky sa vyrábajú z jednej bunky a tak ďalej. V dôsledku toho sa objavujú stovky DNA, vďaka čomu je možné diagnostikovať patogén a identifikovať vírus v počiatočnom štádiu.

Preto je PCR rozdelená do niekoľkých typov:

• kvalitatívna analýza - rozpoznáva gény infekcie v krvi. Ak je pacient potvrdený pre kvalitatívnu analýzu, mala by sa urobiť kvantitatívna analýza na stanovenie stupňa infekcie. V dôsledku tejto diagnostiky odborníci píšu "zistené / nezistené". "Zistené" - naznačuje, že ochorenie je prítomné v tele a jeho RNA je už zistená. "Nezistené" naznačuje, že vo vzorke nie je žiadny vírusový gén, to znamená, že neexistuje hepatitída RNA. Lekári však odporúčajú vykonať druhú štúdiu po 10 dňoch.
• kvantitatívna analýza - určuje množstvo genetického materiálu infekcie v krvi. Takáto diagnostika pomáha určiť závažnosť ochorenia a celú klinickú históriu. V dôsledku takejto analýzy je možné napísať len "Pozitívny / Negatívny / Neplatný". "Pozitívny" - zobrazuje infekčnú záťaž. Lekár spôsob diagnózy, určuje ochorenia na stanovenie účinnosti liečby na 4, 12, 16 a 24 týždňov bolezni.Esli vírusové zložky sa pohybuje v rozmedzí 8h10t IU / ml, je liečba účinná, ak vyššie uvedených parametrov - nie. "Negatívny" - gén infekcie sa nenašiel. "Neplatný" - to sa stane, keď je gén nájdený vírus v kvalitatívne, ale ktoré nie sú uvedené v kvantitatívnej analýze. Podobné je, ak je infekcia pod úrovňou.

Rozdiely v kvalitatívnych a kvantitatívnych analýzach

Vírus hepatitídy C - je diagnostikovaná predovšetkým kvantitatívne analýzou, dekódovanie je nevyhnutné pre správnu interpretáciu ochorenia. Ale cez to, že kvalitatívne a kvantitatívne metóda diagnostiky majú svoje odlišnosti, ako je úloha a úloh k výskumu - kvalitatívne - potvrdí prítomnosť infekcie po objavení vírusu protilátok a kvantitatívne - sekundárne spôsob vyvrátiť alebo potvrdenie ochorenia, aby správne a iba diagnózu,

Vysvetlenie kvantitatívneho výskumu

Po diagnostikovaní môžu výsledky interpretovať len lekári, pretože by to malo byť nie v číslach, ale v slovách. Podľa štatistiky je kvantitatívna PCR najcitlivejšou analýzou. Za účelom zistenia, či je prítomná v tele vírus, je nutné pochopiť a vedieť, že kvantitatívna analýza pre hepatitídu C, je dešifrovanie pomocou digitálneho značenia (štandard) infekcie:

Diagnóza vírusu hepatitídy C

Vírus hepatitídy C (HCV) je vírus obsahujúci RNA z rodiny Flaviviridae. Táto infekcia je schopná reprodukovať v krvných bunkách (monocyty, neutrofily, B lymfocyty a makrofágy) a tiež poškodiť bunky pečene samotné - hepatocyty. Vzhľadom na vysoký stupeň mutácie je tento typ hepatitídy schopný vyhnúť sa vplyvu ľudského imunitného systému.

Existuje 11 genotypov a množstvo podtypov takéhoto vírusu, ktoré sa líšia v stupni poškodenia pečene a ovplyvňujú načasovanie liečby hepatitídou. Takáto paleta hepatitídy C vyžaduje rôzne metódy antivírusovej liečby. Napríklad hepatitída prvého a štvrtého genotypu sa má liečiť 48 týždňov a pre liečbu proti vírusom 2. a 3. druhu môže trvať iba 24 týždňov.

Po rýchlom teste na hepatitídu C sa dosiahol pozitívny výsledok, vykonala sa analýza PCR na identifikáciu RNA vírusu v krvných vzorkách.

PCR diagnostika

Polymerázová reťazová reakcia (PCR) je experimentálna technika na detekciu vírusov. Takáto analýza pre hepatitídu C umožňuje významné zvýšenie koncentrácie niektorých fragmentov vírusu DNA alebo RNA v predložených vzorkách. To umožňuje rozpoznať ich a dokonca aj započítať číslo.

Tento test na hepatitídu C sa uskutočňuje podľa nasledujúceho postupu:

1. Vzorka krvi (genetický materiál), ktorá môže obsahovať požadovaný gén pre hepatitídu, sa zavedie do skúmavky. Na svoje miesto špeciálne látky - priméry, sú segmenty krátkej dĺžky od požadovaného génu, ktoré sú syntetizované chemicky. V tejto nádobe je tiež pridaná DNA alebo RNA polymeráza, je schopná vytvoriť reťazce nukleovej kyseliny úplne identické s pôvodnou. K získanému zloženiu je pridaný výber voľných nukleotidov, ktoré sú špeciálnym stavebným materiálom pre DNA a RNA, z ktorých jedna obsahuje malé častice rádioaktívneho fosforu.
2. Výsledná zmes sa najprv zohreje na 95 stupňov, v dôsledku čoho sa prekladá v normálnom stave, a preto sú obe špirály DNA oslabené kvôli tomuto účinku.
3. Na pokračovanie analýzy sa liečivo ochladzuje, v tomto bode sú priméry pripojené k požadovanej oblasti genómu vírusu hepatitídy a neumožňujú tvorbe DNA do dvojitej helixy. Keď sa zmes ochladí, polymeráza vyhľadáva jednotlivé vlákna nukleotidov. Počas pripojenia tohto enzýmu kĺže pozdĺž reťazca DNA (ako blok pomocou lana) a na dvojitej špirále nie je schopný "pracovať", na tento účel sa zmes zahrieva.
4. Na predĺženie analýzy sa uskutočňuje opätovné zahrievanie, čo opäť vedie k oddeleniu nukleotidových reťazcov. Pri vykonávaní takýchto cyklov PCR vo vzorke o neznámom množstve zvyšuje hepatitídy génov v geometrických pomeroch a iných genetických materiálov vyrobených (vytvorené) v lineárnom modeli.
5. Na dokončenie štúdie sa roztok purifikuje z reziduálnych nukleotidových častíc. Oddeľujú sa elektroforézou s oddelením molekulových reťazcov DNA parametrami molekulovej hmotnosti. Takéto testy na hepatitídu pomocou PCR umožňujú určiť, či sú požadované gény vírusu prítomné v testovanej vzorke, alebo nie.

Výhodou tohto testu je veľmi vysoký prah citlivosti PCR reakcie. Takáto technika na vykonávanie diagnostiky v ideálnom prípade vyžaduje iba jeden genóm vírusu pre celú vzorku.

Okrem toho je takáto PCR úplne špecifická. V každom z génov existuje jedinečná sekvencia nukleotidov, ktorá sa podobne ako odtlačok prsta nemôže nikam opakovať. Pri tejto analýze hepatitídy C sa priméry syntetizujú takým spôsobom, že úplne zodpovedajú jedinečným častiam požadovaných génov, ktoré nemajú žiadna iná sekvencia.

Táto technika tiež umožňuje analyzovať a zistiť hepatitídu v c, čo pomáha stanoviť definitívnu diagnózu.

Takáto laboratórna analýza umožňuje získať informácie viac ako len prítomnosť alebo neprítomnosť HCV RNA alebo iného typu v krvných vzorkách. Definovaním parametra rádioaktívneho žiarenia je tiež možnosť zistiť, koľko sa pôvodne našiel požadovaný genetický materiál vo vzorke. To nám umožňuje určiť parameter takzvaného vírusového zaťaženia - koncentrácie častíc hepatitídy RNA v určitom objeme.

Kvalitatívna analýza PCR

Táto analýza umožňuje určiť prítomnosť vírusu hepatitídy v krvných vzorkách. Musí sa urobiť pre všetkých ľudí, u ktorých sa zistilo, že majú protilátky proti hepatitíde.

Výsledkom takejto štúdie môžu byť iba dve hodnoty:

• "Našiel som". Takýto pozitívny výsledok testu sa interpretuje nasledovne: v analyzovanej vzorke z biologického materiálu sa našli fragmenty RNA vírusu hepatitídy. Z toho vyplýva, že došlo k infekcii pacienta týmto vírusom. To môže naznačovať, že pôvodca hepatitídy sa v tele rozmnožuje a infikuje nové bunky a zničí pečeň.
• "Nezistil sa". Tento výsledok ukazuje, že vo vzorke, ktorý je analyzovaný v laboratóriu bolo zistené, že fragmenty RNA, ktorá je špecifická pre vírus hepatitídy C Existuje aj možnosť, že sa koncentrácia RNA vírusu-patogénu vo vzorke bol tak malý, že test nebol schopný identifikovať, V takýchto prípadoch sa hovorí, že úroveň koncentrácie je pod hranicou citlivosti testu.

Takýto test môže byť tiež falošne pozitívne alebo negatívne z dôvodu kontaminácie biologického materiálu alebo prítomnosť špecifických látok vo vzorkách, reagujúce s chemickými zložkami potrebnými pre analýzu.

Je potrebné zdôrazniť, že v akútnych fázach hepatitídy C môže kvalitatívna štúdia používajúca PCR metódu odhaliť svoju RNA len 1-2 týždne od okamihu infekcie tela. To znamená, že ochorenie môže byť identifikované dlho pred objavením sa vonkajších príznakov alebo výskytom protilátok proti hepatitíde v tele.

Odber vzoriek krvi (z žily) sa s výhodou vykonáva na prázdny žalúdok.

Kvantitatívna analýza PCR

Pomocou tejto analýzy určite úroveň koncentrácie vírusu hepatitídy u pacienta (vírusová záťaž). Takýto test musí byť predložený s cieľom odhadnúť množstvo RNA vírusu v jednotke určitého objemu.

Analýza testov na hepatitídu c, vykonávaná pomocou tejto techniky, môže mať tieto výsledky:

• Kvantitatívny ukazovateľ (v číslach)

Koncentrácia vírusu (číslo) sa uvádza číselne. Na tento účel sa používajú rôzne jednotky: buď ME / ml (medzinárodná jednotka na mililiter) alebo kópie / ml (počet kópií vírusu RNA v mililitroch). V priemere 1 IU / ml zodpovedá 4 kópiám / ml, pretože rôzne testovacie systémy majú pre takéto jednotky rôzne konverzné faktory.

Nízke vírusové zaťaženie sa pre tento test považuje za menej ako 400 000 IU / ml a vysoké je 8000000 IU / ml.

Toto kvantitatívne hodnotenie umožňuje určiť úroveň infekčnosti choroby ("infekčnosť") pacienta. Čím viac tento ukazovateľ analýzy, tým vyššie je riziko prenosu patogénu na iné osoby (s pohlavným stykom alebo vertikálnou cestou).

Tento verdikt znamená, že kvantitatívna metóda nedokázala zistiť hepatitídu RNA, ale samotný vírus je prítomný v tele len vo veľmi nízkej koncentrácii. Toto potvrdilo vykonanie dodatočnej kvalitatívnej analýzy PCR a jeho pozitívny výsledok naznačuje prítomnosť hepatitídy.

Kvantitatívna analýza PCR vykonávaná v rôznych fázach antivírusovej terapii (1., 4., 12. a 24. týždňov) poskytuje údaje o účinnosti liečby a vykonať potrebné opravy.

Špecifickosť analýzy

Tento test musí byť predložený na určenie rôznych genotypov hepatitídy C. V súčasnosti je známym 11 genotypov tohto patogénu a mnoho subtypov. Genotypy hepatitídy typu C 1., 2. a 3. druhu sú bežné v našej krajine. V laboratóriách môže detekovať rôzne subtypov týchto druhov: 1a, 1b, 2a, 2b, alebo 3, 4, 5, 6 genotypov s rôznymi modifikáciami podtypy. Pri všetkých týchto hepatitídách je špecifickosť detekcie 100%.

Objasnenie modifikácie genotypu umožňuje zvoliť vhodnú liečbu. Prítomnosť určitého typu genotypu u pacienta neznamená, že choroba je jednoduchšia alebo zložitejšia, sú to len odrody vírusu hepatitídy a nie viac.

V tých prípadoch, keď laboratórium nedokáže izolovať genotyp vírusu, môže byť výsledok vydaný: "Nie je zadaný. Boli študované genotypy: také a také (napríklad la, 2b, 3av). Tento prepis naznačuje, že v tomto laboratóriu neboli žiadne zodpovedajúce činidlá, ktoré by mohli určiť genotyp vírusu hepatitídy. V štúdii bola vykonaná kontrola vírusov uvedených v zozname, ale ich korešpondencia s vzorkami RNA nebola zistená.

Na vykonanie konečnej diagnózy je len jeden druh analýzy nedostatočný. Každý z testov môže poskytnúť falošne pozitívny výsledok. Vykonáva sa zložitá štúdia na určenie presného typu hepatitídy a stupňa infekcie touto infekciou tela. Súčasne sa robia biopsia pečene a testovanie jeho enzýmov: ALAT, ASAT, ako aj alkalická fosfatáza a LDH. Môže sa tiež vykonať bilirubínový test a analýza protrombínového indexu.

Len komplex takýchto testov a laboratórnych testov s všeobecnou analýzou stavu pacienta pomôže určiť prítomnosť hepatitídy v tele, jej tvar a tiež stupeň závažnosti. Na ich základe lekár môže určiť ďalšiu liečbu a urobiť pre pacienta možnú prognózu.