PCR pre hepatitídu B

Share Tweet Pin it

Prítomnosť moderných liekov proti hepatitíde B (HBV) s jasnými indikáciami pre ich vymenovanie si vyžaduje presné a rýchle overenie diagnózy. Avšak kvôli skromným klinickým údajom v prvých týždňoch ochorenia a pri obmedzených imunologických metódach analýzy je rýchlosť diagnostiky znížená.

Prítomnosť anti-HBc IgM markery, HBsAg, anti-HBc, HBeAg, anti-HBe HBV umožňujú potvrdiť alebo zistiť skutočnosť, že nedávne infekcie. Ale stanovenie prítomnosti aktívnych vírusových častíc v krvi a číslo počítanie v čase prieskumu môže byť pomocou PCR - kvantitatívne real-time testu k detekcii hepatitídy B. spôsobu v porovnaní s imunoenzymatické diagnostické metódy, diagnostické rieši problémy a umožňuje predikovať priebeh ochorenia u pacientov užívajúcich antivírusové lieky.

Základy diagnostiky ochorenia

Diagnóza hepatitídy B je založená na hodnotení klinických prejavov, imunoanalýzy a inštrumentálnych metód výskumu. Ochorenie sa vyskytuje v akútnej fáze po inkubačnej dobe a v závislosti od dávky infekcie a účinnosti liečby prechádza do chronickej fázy. Hlavným cieľom liečby zostáva prevencia chronických ochorení, to znamená odstránenie všetkých vírusových častíc z krvi. Klinickou normou priebehu ochorenia je liečba bez následnej virémie.

Skutočnosť eliminácie infekcie musí byť preukázaná kvantitatívnou metódou vyšetrovania.

Vzhľadom k tomu, všetky kvalitatívne enzymoimuno pre diagnostiku HBV nepriamo, to znamená, že nevykazujú prítomnosť patogénu na vnútornom prostredí organizmu, ale predstavuje imunitnú odpoveď na infekciu, monitorovanie účinnosti liečby a hojenie skutočnosť stáva trudnodokazuemymi. Preto by pacient s hepatitídou B alebo s prítomnosťou diagnostických kritérií v jeho prospech mal vykonať polymerázovú reťazovú reakciu, aby sa kvantifikoval počet vírusových častíc v krvi. Diagnostickou normou je absencia kópií DNA infekcie.

Opis diagnostických metód

Veľmi citlivá metóda PCR diagnostiky hepatitídy B patrí do kategórie molekulárnych biologických štúdií genetického inžinierstva. Prostredníctvom neho sa určí množstvo vírusovej DNA v biologickom materiáli pacienta a prípustná norma. Na základe získaných výsledkov sa stanoví počet vírusových častíc na jednotku objemu. Materiálom pre diagnostický test je venózna krv pacienta. Plot je žiaduci na prázdny žalúdok z dôvodu možného vplyvu zabaleného séra na výsledok štúdie.

Získané výsledky by sa mali poskytnúť lekárovi na interpretáciu a určenie ďalšej taktiky. Samočinná interpretácia nepredstavuje diagnostickú hodnotu.

Význam výsledku počtu vírusových častíc získaných metódou PCR presahuje hodnotu enzýmovej imunoanalýzy. Keďže analýza v reálnom čase ukazuje prítomnosť patogénu v krvi, informatívna hodnota je vyššia ako zvyšok. Ak IFA len ukazuje na prítomnosť protilátok, ktoré pozorovaných s 4-týždenné obdobie inkubácie a uložených na viac ako 8 týždňov po odstránení vírusu z krvi, polymerázová reťazová reakcia jednoznačne potvrdzuje aktívny priebeh choroby alebo vyliečenie charakterizuje dynamiku predpísanej liečby.

Polymerázová reťazová reakcia s kvantitatívnym stanovením častíc patogénu rieši diagnostické problémy v prospech prerušenia liečby v dôsledku obnovy alebo pokračovania liečby kvôli jej nedostatočnej účinnosti. Metóda je maximálne špecifická pre vírus HBV a má prijateľnú chybu.

Indikácie a ciele implementácie

Kvantitatívna analýza hepatitídy B je najspoľahlivejšia a umožňuje vám potvrdiť údaje získané metódami imunoanalýzy. Priraďuje sa, keď:

  1. získanie pozitívneho diagnostického výsledku testu ELISA;
  2. liečba pacienta so stanovenou diagnózou poškodenia vírusovej pečene;
  3. v diagnostike zmiešanej etiológie hepatitídy;
  4. ak je potrebné určiť vírusovú záťaž u pacienta.

Vzhľadom k tomu, široko použiteľné v spôsobe praxi infektsionista imunoanalýzy, podiel pacientov s miernym ochorením môže byť liečený, a aby bolo nutné počítať vírusovej záťaže. Ale PCR je všeobecne považovaný za "zlatý štandard" diagnostiky v hepatológii, pretože kvôli jedinečnosti jej výsledku odstraňuje množstvo organizačných problémov. Preto smer pacienta pre kvantitatívnu analýzu má tieto ciele:

  • získanie údajov o počte vírusových častíc v krvi pacienta;
  • potvrdenie akútneho priebehu hepatitídy a včasné overenie chronických ochorení;
  • konštantná detekcia latentných vírusových nosičov s pozitívnymi testami ELISA, sledovanie ich virémie;
  • rozhodovanie o určení antivírusovej liečby, jej kombinácii a ukončení.

Najvýznamnejším cieľom kvantitatívneho PCR testu na detekciu HBV je identifikovať možné kombinácie liečby. V prípadoch vysokého vírusového zaťaženia výsledok analýzy umožňuje špecialistovi pokračovať v kombinácii liekov. Počas liečby na základe výsledku PCR sa dá ľahko určiť účinnosť predpísanej farmakologickej liečby. Vedené iba údajmi o imunoenzymatických metódach, nie je možné včas určiť skutočnosť, či sa liečba a jej súčasná účinnosť. Preto je kvantitatívny test v reálnom čase nevyhnutnou analýzou pred liečbou akútnej hepatitídy, latentného vírusu s vysokou viremiou a chronického HBV.

Interpretácia kvantitatívnych výsledkov testov PCR

Interpretácia výsledkov kvantitatívneho PCR testu by mala vykonávať ošetrujúci lekár. Je potrebné vyhodnotiť diagnostický index a určiť terapeutickú taktiku.

Štandardný analyzátor je schopný produkovať kvantitatívny index, ktorý odráža počet kópií vírusovej DNA prítomnej v študovanej venóznej krvi. Jednotky miery sú kópie / ml, IU / ml (kópie na mililiter, medzinárodné jednotky na mililiter). Dekódovanie výsledkov je uvedené v tabuľke s označením rôznych meracích jednotiek.

DNA vírusu hepatitídy B, kvalitatívna definícia

Abecedné vyhľadávanie

Čo je DNA vírusu hepatitídy B, kvalitatívna definícia?

HBV je komplexný vírus obsahujúci DNA a patrí do čeľade Hepadnaviridae rodu Orthohepadnavirus.

Hepatitída B - anthroponotic infekcie, výhodne parenterálnej infekcie mechanizmus, ktorý môže mať formu vírusového nosiča, akútne a chronické ochorenie pečene, a je charakterizovaná možného vzniku akútne zlyhanie pečene, chronická hepatitída, cirhóza a rakovina primárne pečene (hepatocelulárne karcinóm).

Infekcia s ľudským telom dôjde priamym prenikaniu HBV v krvi (s akoukoľvek invazívne zásah a transfúzie krvi a jej produktov), ​​alebo cez sliznice a kože pri pôrode, pri sexuálnych a blízke domácnosti kontaktov. Potom, čo v pečeni, HBV vstupuje do hepatocytov, ktoré sa začína rýchlo množiť.

Vývoj infekčného procesu sa môže vyskytnúť dvomi spôsobmi: replikačným a integračným. Replikačné infekcie forma vedie k akútnej alebo chronickej hepatitídy a cirhóza pečene, pričom integračné - vyvinúť "zdravé" vírusové infekcie, chronické neaktívne hepatitída, cirhózu pečene a primárne hepatocelulárne karcinóm.

Sérologická diagnóza a prognóza infekcie HBV je založená na detekcii antigénov vírusu a protilátok proti nemu. Ale ako sa ukázalo, v populácii vírusu hepatitídy B sa nachádzajú dostatočné mutantné kmene (HBeAg-negatívne), ktoré nie sú zachytené konvenčnými sérologickými testami. Preto je veľmi dôležitá metóda PCR na diagnostiku infekcie HBV.

Prečo je dôležité urobiť DNA vírusu hepatitídy B kvalitatívnou definíciou?

PCR umožňuje určiť DNA vírusu hepatitídy B v testovacom materiáli ako kvalitatívne, tak aj kvantitatívne. Kvalitatívne stanovenie vírusu hepatitídy B v materiáli (krvi, séra, plazmy, pečeňovej biopsie) potvrdí prítomnosť vírusu u pacienta, a tým stanoviť patogenézy ochorenia. Kvantitatívne metóda pre stanovenie vírusovej DNA v plazme poskytuje dôležité informácie o intenzite ochorení na účinnosť liečby a vytvorenie rezistencie na antivirotík. PCR pri HBV je absolútne nevyhnutná na posúdenie vírusovej replikácie. Vírusová DNA v sére je detekovaná u 50% pacientov v neprítomnosti HBeAg. Detekcia HBV DNA v krvi je veľmi dôležitá pre predikciu akútneho HBV. Bolo zistené, že HBV DNA pretrvávanie po dobu viac ako 8 týždňov po začiatku ochorenia označuje chronization procesu, zatiaľ čo eliminácia vírusovej DNA v priebehu prvých 2 týždňov ochorenia koreluje so úplné uzdravenie.

Kvalitatívna definícia DNA vírusu hepatitídy B metódou PCR.

Analytické ukazovatele: detekcia DNA vírusu hepatitídy B (vírus hepatitídy B) pomocou polymerázovej reťazovej reakcie (PCR) v krvnej plazme.

Zistiteľný fragment je jedinečná DNA sekvencia génu štrukturálneho proteínu vírusu hepatitídy B. Špecifickosť je 98%. Citlivosť stanovenia nie je menšia ako 80 vírusových častíc v 5 μl spracovanej (extrakcie DNA) vzorky.

Preto stanovenie HBV DNA v materiáli je dôležitým analýza, ktorá v kombinácii s inými laboratórnych testov pre diagnostiku infekcie, určiť povahu infekčného procesu, ktorý by slúžil ako kritérium pre terapiu a vyhodnotenie jeho účinnosť.

Na aké choroby je DNA vírusu hepatitídy B vytvorená, kvalitatívna definícia?

Indikácie na účely analýzy:

Profylaktické skríningové štúdie (DNA vírusu hepatitídy B je najskorším markerom akútnej infekcie).

Štúdie s HBsAg-negatívnou infekciou.

Prieskumy kontaktných osôb.

Diagnóza hepatitídy zmiešanej etiológie - identifikácia vedúceho vírusu.

Identifikácia štádia aktívnej replikácie vírusu v chronickom stave.

Kontrola prebiehajúcej liečby.

Slabosť, nevoľnosť, únava, znížená chuť do jedla, nevoľnosť, ťažkosť v správnom hypochondriu, zväčšenie pečene, ako aj bolesť svalov, kĺbov.

Žltačka, svrbivá koža, zväčšená slezina, cievnaté pavúky, v niektorých prípadoch sčervenanie dlane a nohy.

№ 320 СВ, vírus hepatitídy B, definícia DNA (HBV-DNA) kol. v krvnom sére

Určenie DNA vírusu hepatitídy B (vírus hepatitídy B, HBV) v sére polymerázovou reťazovou reakciou (PCR) s detekciou v reálnom čase.

Zistiteľný fragment je špecifickou oblasťou DNA vírusu hepatitídy B. Špecifickosť stanovenia je 100%. Citlivosť stanovenia je 20 IU / ml. Lineárny rozsah je 10 ^ 2 - 1 x 10 ^ 8 IU / ml.

  • Pozitívny kvalitatívny test na prítomnosť DNA vírusu hepatitídy B v krvnom sére.
  • Určenie vírusovej záťaže.
  • Určovanie taktiky liečby pacientov.
  • Presné hodnotenie účinnosti liečby.

Interpretácia výsledkov výskumu obsahuje informácie pre ošetrujúceho lekára a nie diagnóza. Informácie z tejto časti nemožno použiť na vlastnú diagnostiku a samoliečbu. Správna diagnóza sa vykoná lekárom s použitím výsledkov tohto prieskumu a potrebných informácií z iných zdrojov: anamnéza, výsledky iných prieskumov atď.

Merné jednotky: množstvo DNA vírusu hepatitídy B vyjadrené v IU / ml. Na prepočítanie v kópiách / ml sa má použiť pomer 1 IU = 4,5 kópií DNA vírusu hepatitídy B.

  • "Nenájdený": DNA vírusu hepatitídy B nie je detegovaná alebo hodnota je pod hranicou citlivosti metódy (20 IU / ml). Výsledok sa interpretuje ako "nedošlo k detekcii DNA vírusu hepatitídy B";
  • 10 ^ 8 IU / ml: výsledok je pozitívny s koncentráciou DNA vírusu hepatitídy B vyššou ako 10 ^ 8 IU / ml.
Venujeme pozornosť, že časový priebeh štúdií PCR sa môže zvýšiť počas potvrdzovacích testov.

HBV, DNA kvantitatívne [PCR v reálnom čase]

Štúdia na identifikáciu pôvodcu hepatitídy B (HBV), v ktorom metódou real-time PCR (RT-PCR) je určená prítomnosťou genetického materiálu (DNA) vírusu a jeho objemu (vírusová záťaž) vo vzorke krvi.

HBV DNA sa môže detegovať v koncentrácii pod dolnou hranicou lineárneho rozsahu koncentrácií. Rozsah lineárnej koncentrácie je rozsah, v ktorom možno presne vypočítať počet kópií patogénu. Na túto analýzu je lineárny rozsah koncentrácií HBV DNA stanovený detekčným zosilňovačom 7,5 x 10 2 - 1,0 × 10 8 kópií / ml vzorky.

Ruské synonymá

Vírus hepatitídy B (HBV), kvantitatívne stanovenie DNA.

Anglické synonymá

DNA vírusu hepatitídy B, kvantitatívna PCR v reálnom čase, krv; HBV vírusová záťaž; DNA vírusu hepatitídy B Quant.

Metóda výskumu

Polymerázová reťazová reakcia v reálnom čase.

Jednotky merania

Kopírovať / ml (kópia na mililiter).

Aký biomateriál možno použiť na výskum?

Ako sa správne pripraviť na štúdium?

Nefajčte 30 minút pred darovaním krvi.

Všeobecné informácie o štúdii

Vírusová hepatitída B (HBV) je infekčné ochorenie pečene spôsobené vírusom hepatitídy B (HBV) obsahujúcim DNA. Spomedzi všetkých príčin vzniku akútnej hepatitídy a chronickej vírusovej infekcie sa vírus hepatitídy B považuje za jeden z najbežnejších na svete. Skutočný počet infikovaných pacientov nie je známy, pretože mnohí ľudia majú infekciu bez špecifických príznakov a nepožadujú lekársku starostlivosť. Vírus je často detegovaný počas preventívnych laboratórnych testov. Odhaduje sa, že približne 350 miliónov ľudí je ovplyvnených vírusom hepatitídy B a z jeho účinkov každý rok zomrie 620 000 ľudí. Počet prepravcov HBV v Rusku presahuje 5 miliónov ľudí.

Zdrojom infekcie je pacient s HBV alebo asymptomatickým vírusom. HBV sa prenáša krvou a inými telesnými tekutinami. Môžete nakaziť cez nechránenom pohlavnom styku, používanie kontaminovaných ihiel, krvné transfúzie a transplantácie orgánov od darcov, dieťa môže nakaziť matku počas alebo po pôrode (cez trhliny v bradaviek). Osoby ohrozené patrí: lekári, ktorí môžu prísť do styku s krvou pacienta, pacienti na hemodialýze, injekčné užívatelia drog, ľudí, ktorí sú promiskuitný deti narodené matkám s HBV.

Inkubačná doba ochorenia je od 4 týždňov do 6 mesiacov. Vírusová hepatitída B sa môže objaviť ako mierne, ktorá trvá niekoľko týždňov, a vo forme dlhodobej chronickej infekcie. Hlavnými symptómami hepatitídy: žltnutie pokožky, horúčka, nevoľnosť, únava, v laboratórnych testoch - pečeňové dysfunkcie a špecifické antigény sú HBV Akútne ochorenia môže rýchlo viesť k smrti, prejsť do chronickej infekcie alebo zakončené úplné uzdravenie. Predpokladá sa, že po prenesenom HBV sa vytvorí odolná imunita. Chronická vírusová hepatitída B súvisí s vývojom cirhózy a rakoviny pečene.

Existuje niekoľko špecifických testov na detekciu existujúcej alebo prenášanej vírusovej hepatitídy B. Na určenie prítomnosti infekcie a na objasnenie obdobia ochorenia použite definíciu antigénov vírusu, protilátok proti nim a DNA vírusu.

Polymerázová reťazová reakcia je charakterizovaná vysokou citlivosťou a špecificitou. Pomocou PCR môže byť vírusová DNA stanovená kvalitatívne alebo kvantitatívne. Vďaka kvalitatívnej metóde sa potvrdzuje prítomnosť vírusu hepatitídy B v tele a jej aktívna reprodukcia. Kvantitatívne stanovenie vírusovej záťaže umožňuje odhadnúť intenzitu vývoja ochorenia, účinnosť terapie alebo vývoj rezistencie na antivirotiká.

Existuje vzťah medzi koncentráciou vírusu v krvi a výsledku akútnej vírusovej hepatitídy B. Nízka úroveň virémie prechodové pravdepodobnosti infekcie u chronickej formy sa blíži k nule, a infikovanej osoby nie je nebezpečné pre ostatných. Pri vysokej vírusovej záťaži (5 kópií / ml) dochádza často k chronizácii a pacient je potenciálnym zdrojom infekcie. Zistil sa vzťah medzi množstvom DNA vírusu v krvnom sére, prítomnosťou HBeAg, zvýšeným ALT a rozvojom cirhózy pečene a hepatocelulárneho karcinómu (rakovina pečene).

Účinnosť antivírusovej liečby sa odhaduje znížením množstva DNA vírusu v krvi. Po 3 až 6 mesiacoch od začiatku liečby by sa vírusová záťaž s primeranou terapeutickou odpoveďou mala znížiť o 1-2 rády. Absencia zníženia množstva vírusu alebo jeho nárastu na pozadí pretrvávajúcej liečby si vyžaduje revíziu a úpravu terapie.

Kvantitatívne stanovenie HBV DNA v spojení s klinickým obrazom choroby a biochemické ukazovatele, ukazovatele infekcie, rovnako ako v dôsledku pečeňovej biopsie umožňuje prognózu ochorenia a pre vyhodnotenie nutnosti antivírusové terapiu.

Na čo sa výskum používa?

  • Predpovedať priebeh vírusovej hepatitídy B.
  • Potvrdenie chronickej formy vírusovej hepatitídy B.
  • Identifikovať nosiče vírusovej hepatitídy B a monitorovať aktivitu vírusového násobenia.
  • Identifikovať skryté a mutantné kmene vírusu hepatitídy B.
  • Posúdiť účinnosť antivírusovej liečby hepatitídy B a rozhodnúť o ďalšej taktickej liečbe.

Kedy je pridelená štúdia?

  • S kvalitatívnou detekciou DNA vírusu hepatitídy B.
  • Pri akútnej a chronickej vírusovej hepatitíde B.
  • So zmiešanou hepatitídou.
  • Pred a počas antivírusovej liečby.

Čo znamená výsledok?

  • "Nezistená" - žiadna DNA s vírusom hepatitídy B alebo hodnotou pod hranicou citlivosti metódy (200 kópií / ml = 120 IU / ml).
  • 10 - 5 kópií / ml (6 x 10-4 IU / ml) - vysoká vírusová záťaž, aktívny infekčný proces (je potrebná protivírusová terapia).
  • > 1,0 * 10 ^ 8 kópií / ml (> 6 x 10 ^ 7 IU / ml) - DNA vírusu hepatitídy B je detegovaná v koncentráciách nad lineárnym koncentračným rozsahom.

Lineárne rozsah koncentrácií HBV DNA v určenej detekčnej termocykléra, 7,5 x 10 2 - 1,0 x 10 8 kópií / ml (4,5 x 10 ^ 2-6 x 10 7 IU / ml).

Čo môže ovplyvniť výsledok?

Dôležité poznámky

  • Kvantifikácia DNA vírusu hepatitídy B je povinná pred podaním antivírusovej liečby. V priebehu liečby by sa analýza mala zopakovať po 3 až 6 mesiacoch.
  • Vírusová hepatitída B sa často kombinuje s vírusovou hepatitídou D.

Odporúča sa tiež

Kto určil štúdiu?

literatúra

  1. Vozianova Zh.I. Infekčné a parazitické ochorenia: V 3 t. - K.: Zdravie, 2000 - T.1.: 601-654.
  2. Chan Henry Lik-Yuen, Wong May Ling a ďalší. Použitie DNA vírusu hepatitídy B Kvantifikácia protilátok proti hepatitíde B Hepatitída B protilátka proti hepatitíde B Hepatitída B. J Clin Microbiol. 2003 október; 41 (10): 4793-4795. PMCID: PMC294957
  3. Harrisonove princípy vnútorného lekárstva. 16. vyd. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  4. Riadenie hepatitídy B. Konferencia o rozvoji konsenzu NIH. Program a abstrakty. 20. - 22. október 2008.

PCR pre hepatitídu B

PCR diagnóza umožňuje nielen určiť prítomnosť vírusu hepatitídy B v krvi a jeho etiológiu, ale aj vyhodnotiť jej aktivitu. Detekcia vírusovej záťaže je obzvlášť dôležitá pre výber účinnej liečby, ak je príliš vysoká, pravdepodobnosť zotavenia sa zníži. Aká je podstata polymerázovej reťazovej reakcie?

Podstata diagnostiky PCR

DNA vírus v krvi pomocou PCR v hepatitídy môžu byť identifikované na konci inkubačnej doby, tentoraz na pozadí zvýšenej hladiny transamináz HBsAg môžu byť definované, potom je HBeAg.

  • S kvalitatívnou definíciou môžete presne stanoviť diagnózu, či nie je hepatitída. Zvyčajne by DNA vírusu nemala byť prítomná v krvi.
  • Kvantitatívna metóda umožňuje určiť intenzitu ochorenia a reprodukciu vírusu.

Analýza má veľmi vysokú citlivosť a spoľahlivosť. Ako biologický materiál sa odoberá venózna krv. Vďaka moderným technológiám dokáže PCR detekovať vírus v koncentrácii 5 × 10 3 - 104 kópií / ml v krvi. Na základe výsledkov analýzy, vedomosti o norme, môžete posúdiť vírusovú záťaž a stanoviť prognózu na liečbu.

Dôležité! Je to DNA vírusu, ktorý podporuje rozvoj cirhózy a iných chronických ochorení pečene.

Detekcia DNA pomocou PCR je potrebná v nasledujúcich prípadoch:

  1. Pochybuje pri uvádzaní konečnej analýzy po vykonaní testov.
  2. Definícia akútneho štádia ochorenia.
  3. Detekcia latentných foriem hepatitídy.
  4. Hodnotenie účinnosti po antivírusovej liečbe.

Ako dešifrovat výsledky získané po diagnostike PCR?

PCR kvantitatívne

Pomocou kvantitatívneho hodnotenia môžete nielen zistiť prítomnosť vírusu, ale aj zistiť vírusovú záťaž v prípade, že PCR prináša pozitívny výsledok.

Na zistenie takýchto informácií je potrebná kvantitatívna metóda:

  1. Intenzita choroby.
  2. Účinnosť liečby.
  3. Vývoj rezistencie na antivírusové lieky.

Kvantifikácia je veľmi dôležitá pri diagnostikovaní chronickej hepatitídy. V tomto prípade nebudú všetky ukazovatele v medziach normy. Zvýši sa hladina transaminázy, index vírusovej aktivity je viac ako 4 a koncentrácia DNA vírusu je viac ako 105 kópií DNA / ml. Ak je koncentrácia vírusu nižšia a hladina transaminázy je normálna, potom môžeme hovoriť o pasívnom vozidle.

Pred určením antivírusovej liečby je predpokladom určenia vírusovej záťaže prechod diagnostiky PCR, a to kvantitatívne vyšetrenie.

Robia analýzu každé tri mesiace a ak sa vírusová záťaž zvýšila 10 krát, môžeme hovoriť o rezistencii vírusu na liečbu.

  • Kvantitatívna analýza poskytuje veľmi dôležité informácie, pretože môžete určiť, koľko DNA obsahuje patogén. Čím väčšie je číslo, tým väčšie je vírusové zaťaženie a ťažší stav pacienta.
  • S poklesom vírusovej záťaže po liečbe možno hodnotiť jej účinnosť.
  • V niektorých prípadoch je PCR pre hepatitídu indikáciou pre ďalšie vyšetrenie, ako je biopsia pečene. Pri zvýšených úrovniach ALT sa uskutočňuje PCR. analýza transkripcie je nasledovné: v prípade, že vírusová záťaž väčšia ako 10 5 kópií DNA / ml a hladín ALT nad normálne, ale nie viac ako 2 krát viac ako šiestich mesiacov, pacient potrebuje biopsiu. Pri závažnom zápale alebo fibróze je indikovaná antivírusová liečba. Ak hladina ALT prekračuje normu viac ako 2-krát s vysokým vírusovým zaťažením, okamžite predpísať liečbu bez ďalšej diagnózy.

Iba správni odborníci môžu správne dešifrovať výsledky kvantitatívnej PCR.

PCR kvalitatívne

Kvalitatívna analýza umožňuje určiť prítomnosť vírusu hepatitídy v krvi. Za normálnych okolností by mal byť neprítomný. Vďaka tejto metóde môžete presne stanoviť diagnózu.

Kvalitatívna analýza PCR poskytuje 100% presný výsledok.

Žiadna iná metóda neposkytuje také spoľahlivé údaje. Vo viac ako polovici prípadov po prechode diagnózy sa deteguje DNA vírusu v neprítomnosti antigénu. Je veľmi dôležité stanoviť diagnózu v počiatočnom štádiu ochorenia.

Dokázalo sa, že ak sa vírus hepatitídy B aktívne množí v ľudskom tele počas dvoch mesiacov, ochorenie sa stáva chronickým. Ak začneme bojovať proti vírusu v prvých týždňoch po infekcii, šance na úplné zotavenie sú veľmi vysoké.

Ako sa interpretácia výsledkov prieskumu uskutočňuje pomocou kvalitatívnej metódy?

Analýza analýzy je veľmi jednoduchá:

  • Zvyčajne by výsledok mal byť negatívny, to znamená, že DNA vírusu nie je zistená.
  • Pozitívny výsledok naznačuje prítomnosť hepatitídy.

Analýza pomáha identifikovať vírus, určiť jeho genotyp a začať včasnú liečbu. Veľmi často sa v prítomnosti DNA spolu s kvalitatívnym hodnotením vykonáva aj kvantitatívna analýza.

Ako sa pripraviť na prieskum?

Pri analýze hepatitídy pomocou diagnostiky PCR sa od žily odoberá krv. Prechádzať alebo prebiehať inšpekcia je lepšia od rána, pretože krv musí byť vždy odovzdaná na prázdny žalúdok (po poslednom príjme potravy by mala prejsť menej ako 8 hodín).

Aby bola analýza čo najspoľahlivejšia, mal by byť pacient vedomý niektorých faktorov, ktoré môžu mať vplyv na konečný výsledok:

  • Pred darovaním krvi z žily potrebujete odpočinúť 20 minút.
  • Okrem toho, že analýza je uvedená na prázdny žalúdok, takže po dobu 12 hodín nemôžete piť, fajčiť, športovať a jesť tučné jedlá.
  • Niektoré lieky, ktoré musí pacient užívať, môžu mať vplyv na konečný výsledok. Laboratórny asistent by mal vedieť o prípade liečby drogami.
  • Ak má byť krv podávaná dieťaťu vo veku menej ako 5 rokov, potom musí byť v priebehu pol hodiny pred diagnózou podávaná každých 10 minút. cez pohár vriacej vody.

Je veľmi dôležité podstúpiť PCR na klinike, ktorá sa osvedčila. Napriek skutočnosti, že PCR určuje prítomnosť vírusu s presnosťou 100%, tento údaj sa môže znížiť na 95%, ak vezmeme do úvahy ľudský faktor.

Nekvalifikovaní laboratórni technici alebo nesprávna povesť kliniky môžu spôsobiť falošné výsledky.

Štúdie na vírus hepatitídy B (ELISA a PCR)

Antigén "s" vírusu hepatitídy B (HBsAg)

Povrchový antigén hepatitídy B v sére normálne chýba.
Detekcia povrchového antigénu (HBsAg) hepatitídy B v sére potvrdzuje akútnu alebo chronickú infekciu vírusom hepatitídy B.

V prípade akútneho ochorenia detekované HBsAg v sére v poslednom 1-2 týždňov inkubačnej dobe, a prvých 2-3 týždňov klinickej obdobie. Obeh krvi HBsAg môže byť obmedzená na niekoľko dní, takže by ste sa mali snažiť, aby začiatkom primárnym vyšetrenia pacientov. Metóda ELISA umožňuje detegovať HBsAg u viac ako 90% pacientov. Takmer 5% pacientov s najcitlivejších metód výskumu nezistí HBsAg, v takýchto prípadoch, etiológie vírusovej hepatitídy B potvrdená prítomnosťou anti-HBsAg JGM alebo PCR.

Sérová koncentrácia HBsAg vo všetkých formách hepatitídy B výška ťažiska ochorenie má značný rozsah variácií, má však určité pravidelnosti v akútnej fáze existuje inverzný vzťah medzi koncentráciou HBsAg v sére a na závažnosti ochorenia.

Vysoká koncentrácia HBsAg je bežnejšia v ľahkých a stredných formách ochorenia. V závažných a malígnych formách je koncentrácia HBsAg v krvi často nízka a u 20% pacientov s ťažkou formou av 30% malígneho antigénu v krvi sa nedá vôbec zistiť. Vzhľad na tomto pozadí u pacientov s protilátkami proti HBsAg sa považuje za nepriaznivý diagnostický znak; určuje sa v malígnych formách hepatitídy B.

Pri akútnej hepatitíde B sa koncentrácia HBsAg v krvi postupne znižuje, kým antigén úplne nezmizne. HBsAg zmizne u väčšiny pacientov v priebehu 3 mesiacov od nástupu akútnej infekcie.

Zníženie koncentrácie HBsAg o viac ako 50% do konca tretieho týždňa akútneho obdobia spravidla naznačuje blízky koniec infekčného procesu. Zvyčajne sa u pacientov s vysokou koncentráciou HBsAg v čase výskytu tejto choroby nachádza v krvi niekoľko mesiacov.
U pacientov s nízkou koncentráciou HBsAg zmizne oveľa skôr (niekedy niekoľko dní po nástupe choroby). Vo všeobecnosti sa detekcia HBsAg pohybuje v rozmedzí niekoľkých dní až 4 až 5 mesiacov. Maximálna doba detekcie HBsAg v hladkom priebehu akútnej hepatitídy B nepresiahne 6 mesiacov od nástupu ochorenia.

HBsAg môže byť detekovaná u zdanlivo zdravých ľudí, väčšinou v priebehu cvičenia alebo náhodných vyšetrovania. V takých prípadoch, skúmať ďalšie markery vírusu hepatitídy B - proti HBsAg JGM, anti-HBsAg JGG, proti HBeAg a študovať funkciu pečene.

Ak sú výsledky negatívne, sú potrebné opakované štúdie na HBsAg.
Ak opakované krvné testy dlhšie ako 3 mesiace odhalili HBsAg, tento pacient sa označuje ako chronický pacient s vírusovou hepatitídou B.
Prítomnosť HBsAg je celkom bežná. Vo svete je viac ako 300 miliónov dopravcov, a v našej krajine - asi 10 miliónov dopravcov.
Ukončenie cirkulácie HBsAg, po ktorom nasleduje sérokonverzia (tvorba anti-HBs), vždy indikuje regeneráciu - sanáciu tela.

Krvný test na prítomnosť HBsAg sa používa na nasledujúce účely:

  • na diagnostiku akútnej hepatitídy B:
    • inkubačná doba;
    • akútne obdobie ochorenia;
    • počiatočná fáza rekonvalescencie;
  • na diagnostikovanie chronickej vírusovej hepatitídy B;
  • s chorobami:
    • pretrvávajúca chronická hepatitída;
    • cirhóza pečene;
  • na skríning a identifikáciu rizikových pacientov:

  • pacienti s častými krvnými transfúziami;
  • pacienti s chronickou renálnou insuficienciou;
  • pacienti s viacnásobnou hemodialýzou;
  • pacientov s stavmi imunodeficiencie, vrátane AIDS.
  • Hodnotenie výsledkov výskumu

    Výsledky výskumu sú vyjadrené kvalitatívne - pozitívne alebo negatívne. Negatívny výsledok štúdie naznačuje nedostatok HBsAg v sére. Pozitívny výsledok - detekcia HBsAg naznačuje inkubáciu alebo akútne obdobie akútnej vírusovej hepatitídy B, ako aj chronickej vírusovej hepatitídy B.

    Protilátky proti jadrovému antigénu vírusu hepatitídy B JgG (anti-HBcAg JgG)

    V norme anti-HBcAg JgG chýba v sére.
    U pacientov s anti-HBcAg sa JgG vyskytuje v akútnom období vírusovej hepatitídy B a pretrváva počas celého života. Anti-HBcAg JgG je vedúcim markerom preneseného HBV.

    Na diagnostiku sa používa krvný test na prítomnosť anti-HBcAg JgG:

  • chronická vírusová hepatitída B v prítomnosti antigénu HBs v krvnom sére;
  • prenesený vírus hepatitídy B.
  • Hodnotenie výsledkov výskumu

    Výsledok výskumu je vyjadrený kvalitatívne - pozitívny alebo negatívny. Negatívny výsledok štúdie naznačuje neprítomnosť anti-HBcAg JgG v sére. Pozitívny výsledok - detekcia anti-HBcAg JgG naznačuje akútnu infekciu, rekonvalescenciu alebo predtým prenesenú vírusovú hepatitídu B.

    Antigén "e" vírusu hepatitídy B (HBeAg)

    Norma HBeAg v sére chýba.
    HBeAg môže byť detegovaný v sére väčšiny pacientov s akútnou vírusovou hepatitídou B. Zvyčajne zmizne v krvi pred HBs-antigénom. Vysoká hladina HBeAg v prvých týždňoch ochorenia alebo jeho zistenie po dobu dlhšiu ako 8 týždňov vedie k podozreniu na chronickú infekciu.

    Tento antigén sa často vyskytuje v chronickej aktívnej hepatitíde vírusovej etiológie. Zvláštny záujem o definíciu HBeAg je spôsobený tým, že jeho detekcia charakterizuje aktívnu replikačnú fázu infekčného procesu. Zistilo sa, že vysoké koncentrácie HBeAg zodpovedajú vysokej aktivite DNA polymerázy a charakterizujú aktívnu replikáciu vírusu.

    Prítomnosť HBeAg v krvi dokazuje vysokú infekčnosť, t.j. prítomnosť testovanej aktívnej infekcie hepatitídy B v tele a je detekovaná iba v prítomnosti antigénu HBs v krvi. U pacientov s chronickou aktívnou hepatitídou sa antivírusové lieky používajú len vtedy, keď je HBeAg detegovaný v krvi. HBeAg - antigén je markerom akútnej fázy a replikácie vírusu hepatitídy B.

    Krvný test na prítomnosť antigénu HBe sa používa na diagnostiku:

  • inkubačná doba vírusovej hepatitídy B;
  • prodromálne obdobie vírusovej hepatitídy B;
  • akútne obdobie vírusovej hepatitídy B;
  • chronická perzistentná vírusová hepatitída B.
  • Hodnotenie výsledkov výskumu

    Výsledok výskumu je vyjadrený kvalitatívne - pozitívny alebo negatívny. Negatívny výsledok štúdie naznačuje nedostatok HBeAg v sére. Pozitívny výsledok - detekcia HBeAg indikuje inkubáciu alebo akútne obdobie akútnej vírusovej hepatitídy B alebo pokračujúcu replikáciu vírusu a infekčnosť pacienta.

    Protilátky proti antigénu "e" vírusu hepatitídy B (anti-HBeAg)

    Anti-HBeAg v sére normálne chýba. Vzhľad anti-HBeAg protilátok zvyčajne indikuje intenzívne vylučovanie vírusu hepatitídy B z tela a menšiu infekciu pacienta.

    Tieto protilátky sa objavujú v akútnom období a pretrvávajú až do 5 rokov po infekcii. Pri chronickej pretrvávajúcej hepatitídy, anti-NVeAg v krvi pacienta s HBsAg. Sérokonverzia, t.j. Prechod na anti-HBeAg NVeAg, chronickej aktívnej hepatitídy, viac prognosticky priaznivé, ale rovnaký sérokonverzia vážne cirhózou transformáciu pečene nie je zlepšiť prognózu.

    Štúdium krvi na prítomnosť anti-HBeAg sa používa v nasledujúcich prípadoch pri diagnostike vírusovej hepatitídy B:

  • zriadenie počiatočného štádia choroby;
  • akútne obdobie infekcie;
  • počiatočná fáza rekonvalescencie;
  • rekonvalescencia;
  • neskorá fáza rekonvalescencie.
  • diagnostika nedávno prenášaného vírusu hepatitídy B;
  • diagnostikovanie chronickej pretrvávajúcej vírusovej hepatitídy B.
  • Hodnotenie výsledkov výskumu

    Výsledok výskumu je vyjadrený kvalitatívne - pozitívny alebo negatívny. Negatívny výsledok štúdie naznačuje neprítomnosť protilátok proti HBeAg v sére. Pozitívne výsledky - detekcia protilátok proti HBeAg, čo môže znamenať, skorú fázu akútnej vírusovej hepatitídy B, akútna infekcia obdobie počiatočných fázach obnovy, využitia, v poslednej dobe prenesené vírusovej hepatitídy B alebo pretrvávajúce vírusovej hepatitídy B.

    Kritériá pre prítomnosť chronickej hepatitídy B sú:

  • detekciu alebo pravidelnú detekciu HBV DNA v krvi;
  • konštantné alebo pravidelné zvýšenie aktivity ALT / AST v krvi;
  • morfologické známky chronickej hepatitídy v histologickej štúdii biopsie pečene.
  • Detekcia vírusu hepatitídy B pomocou PCR (kvalitatívne)

    Vírus hepatitídy B v krvi obyčajne chýba.
    Kvalitatívna definícia vírusu hepatitídy B pomocou PCR v krvi umožňuje potvrdiť prítomnosť vírusu v tele pacienta a tým stanoviť etiológiu ochorenia.

    Táto štúdia poskytuje užitočné informácie pre diagnostiku akútnej vírusovej hepatitídy B pri inkubácii a včasnom vývoji ochorenia, keď môžu chýbať hlavné sérologické markery v krvi pacienta. Vírusová DNA v sére je detekovaná u 50% pacientov v neprítomnosti HBeAg. Analytická senzitivita metódy PCR nie je menšia ako 80 vírusových častíc v 5 μl, v ktorej bola detegovaná vzorka DNA, špecificita bola 98%.

    Táto metóda je dôležitá pre diagnostiku a monitorovanie chronického HBV. Približne 5 až 10% cirhóza pečene a ďalších ochorení chronickej pečeňovej kvôli chronickej prepravu vírusom hepatitídy B markery aktivity takých ochorení, je prítomnosť HBeAg a HBV DNA v krvi.

    Metóda PCR umožňuje určiť DNA vírusu hepatitídy B v krvi kvalitatívne a kvantitatívne. Zistiteľný fragment v obidvoch prípadoch je jedinečná DNA sekvencia génu štrukturálneho proteínu vírusu hepatitídy B.

    Detekcia DNA vírusu hepatitídy B v biomateriáli pomocou PCR je potrebná pre:

  • riešenie sporných výsledkov sérologických štúdií;
  • detekcia akútneho štádia ochorenia v porovnaní s prenosnou infekciou alebo kontaktom;
  • monitorovanie účinnosti antivírusovej liečby.
  • Zmiznutie DNA vírusu hepatitídy B z krvi - znamenie účinnosti liečby

    Detekcia vírusu hepatitídy B pomocou PCR (kvantitatívne)

    Táto metóda poskytuje dôležité informácie o intenzite ochorenia, účinnosti liečby a vývoji rezistencie na liečivá.
    Pre diagnostiku vírusových hepatitíd pomocou PCR v sére použitého testovacieho systému, citlivosť, ktorá je 50-100 kópií na vzorke, čo umožňuje detekciu vírusu v koncentrácii 5 x 10 ^ 3 ^ 4 -10 kópií / ml. PCR s vírusovou hepatitídou B, je absolútne nevyhnutné pre úsudku vírusovej replikácie.

    Vírusová DNA v sére je detekovaná u 50% pacientov v neprítomnosti HBeAg. Materiál na detekciu DNA vírusu hepatitídy B môže byť sérum, lymfocyty, hepatobiob.

    • Vyhodnotenie úrovne virémie sa uskutočňuje nasledovne:
    • menej ako 2,10-5 kópií / ml (menej ako 2,10-5 IU / ml) - nízka virémia;
    • z 2,10 - 5 kópií / ml (2,10 - 5 IU / ml) na 2,10 - 6 kópií / ml (8,10-5 IU / ml) - priemernej virémie;
    • viac ako 2,10 ^ 6 kópií / ml - vysoká viremia.

    Existuje vzťah medzi výsledkom akútnej vírusovej hepatitídy B a koncentráciou HBV DNA v krvi pacienta. Pri nízkych úrovniach virémie procesu chronickej infekcie sa blíži nule, s priemerom - chronization proces je pozorovaná u 25-30% pacientov, ale s vysokou úrovňou virémie v akútnej vírusovej hepatitídy často stáva chronickou.

    Indikácie na liečbu chronickej HBV s interferónom alfa považovaná za prítomnosť aktívnych vírusových markerov replikácie (detekcia HBsAg, HBeAg a DNA v sére HBV v predchádzajúcich 6 mesiacov.).

    Výsledky merania slúži vymiznutia HBeAg a HBV DNA v krvi, ktorá je zvyčajne sprevádzaná normalizácii hladiny transamináz a dlhodobé remisii ochorenia, HBV DNA miznú z krvi do 5. mesiaca liečby u 60%, do 9. mesiaca - 80% pacientov. Znižovanie hladiny virémie o 85% alebo viac tretím dňom od začiatku liečby v porovnaní s východiskovým stavom, je rýchly a presný dosť kritériom pre predikciu účinnosti liečby.

    Hepatitída v PCR

    PCR diagnóza umožňuje nielen určiť prítomnosť vírusu hepatitídy B v krvi a jeho etiológiu, ale aj vyhodnotiť jej aktivitu. Detekcia vírusovej záťaže je obzvlášť dôležitá pre výber účinnej liečby, ak je príliš vysoká, pravdepodobnosť zotavenia sa zníži. Aká je podstata polymerázovej reťazovej reakcie?

    Podstata diagnostiky PCR

    Keď je hepatitída vykonaná PCR, aby sa zaistila diagnóza. Pomocou tejto metódy je možné detegovať DNA vírusu a určiť jeho množstvo v krvi.

    DNA vírus v krvi pomocou PCR v hepatitídy môžu byť identifikované na konci inkubačnej doby, tentoraz na pozadí zvýšenej hladiny transamináz HBsAg môžu byť definované, potom je HBeAg.

    S kvalitatívnou definíciou môžete presne stanoviť diagnózu, či nie je hepatitída. Zvyčajne by DNA vírusu nemala byť prítomná v krvi. Kvantitatívna metóda umožňuje určiť intenzitu ochorenia a reprodukciu vírusu.

    Analýza má veľmi vysokú citlivosť a spoľahlivosť. Ako biologický materiál sa odoberá venózna krv. Vďaka moderným technológiám PCR dokáže detekovať vírus v koncentrácii 5 × 103-104 kópií / ml v krvi. Na základe výsledkov analýzy, vedomosti o norme, môžete posúdiť vírusovú záťaž a stanoviť prognózu na liečbu.

    Dôležité! Je to DNA vírusu, ktorý podporuje rozvoj cirhózy a iných chronických ochorení pečene.

    Detekcia DNA pomocou PCR je potrebná v nasledujúcich prípadoch:

    Pochybuje pri uvádzaní konečnej analýzy po vykonaní testov. Definícia akútneho štádia ochorenia. Detekcia latentných foriem hepatitídy. Hodnotenie účinnosti po antivírusovej liečbe.

    Ako dešifrovat výsledky získané po diagnostike PCR?

    PCR kvantitatívne

    Pomocou kvantitatívneho hodnotenia môžete nielen zistiť prítomnosť vírusu, ale aj zistiť vírusovú záťaž v prípade, že PCR prináša pozitívny výsledok.

    Na zistenie takýchto informácií je potrebná kvantitatívna metóda:

    Intenzita choroby. Účinnosť liečby. Vývoj rezistencie na antivírusové lieky.

    Kvantifikácia je veľmi dôležitá pri diagnostikovaní chronickej hepatitídy. V tomto prípade nebudú všetky ukazovatele v medziach normy. Zvýši sa hladina transaminázy, index vírusovej aktivity je viac ako 4 a koncentrácia DNA vírusu je viac ako 105 kópií DNA / ml. Ak je koncentrácia vírusu nižšia a hladina transaminázy je normálna, potom môžeme hovoriť o pasívnom vozidle.

    Pred určením antivírusovej liečby je predpokladom určenia vírusovej záťaže prechod diagnostiky PCR, a to kvantitatívne vyšetrenie.

    Robia analýzu každé tri mesiace a ak sa vírusová záťaž zvýšila 10 krát, môžeme hovoriť o rezistencii vírusu na liečbu.

    Kvantitatívna analýza poskytuje veľmi dôležité informácie, pretože môžete určiť, koľko DNA obsahuje patogén. Čím väčšie je číslo, tým väčšie je vírusové zaťaženie a ťažší stav pacienta. S poklesom vírusovej záťaže po liečbe možno hodnotiť jej účinnosť. V niektorých prípadoch je PCR pre hepatitídu indikáciou pre ďalšie vyšetrenie, ako je biopsia pečene. Pri zvýšených úrovniach ALT sa uskutočňuje PCR. Interpretácia testov je nasledovná: ak vírusová záťaž presiahne 105 kópií DNA / ml a hladina ALT prekročí normu, ale nie viac ako 2-krát za pol roka, takýto pacient potrebuje biopsiu. Pri závažnom zápale alebo fibróze je indikovaná antivírusová liečba. Ak hladina ALT prekračuje normu viac ako 2-krát s vysokým vírusovým zaťažením, okamžite predpísať liečbu bez ďalšej diagnózy.

    Iba správni odborníci môžu správne dešifrovať výsledky kvantitatívnej PCR.

    PCR kvalitatívne

    Kvalitatívna analýza umožňuje určiť prítomnosť vírusu hepatitídy v krvi. Za normálnych okolností by mal byť neprítomný. Vďaka tejto metóde môžete presne stanoviť diagnózu.

    Kvalitatívna analýza PCR poskytuje 100% presný výsledok.

    Žiadna iná metóda neposkytuje také spoľahlivé údaje. Vo viac ako polovici prípadov po prechode diagnózy sa deteguje DNA vírusu v neprítomnosti antigénu. Je veľmi dôležité stanoviť diagnózu v počiatočnom štádiu ochorenia.

    Dokázalo sa, že ak sa vírus hepatitídy B aktívne množí v ľudskom tele počas dvoch mesiacov, ochorenie sa stáva chronickým. Ak začneme bojovať proti vírusu v prvých týždňoch po infekcii, šance na úplné zotavenie sú veľmi vysoké.

    Ako sa interpretácia výsledkov prieskumu uskutočňuje pomocou kvalitatívnej metódy?

    Analýza analýzy je veľmi jednoduchá:

    Zvyčajne by výsledok mal byť negatívny, to znamená, že DNA vírusu nie je zistená. Pozitívny výsledok naznačuje prítomnosť hepatitídy.

    Analýza pomáha identifikovať vírus, určiť jeho genotyp a začať včasnú liečbu. Veľmi často sa v prítomnosti DNA spolu s kvalitatívnym hodnotením vykonáva aj kvantitatívna analýza.

    Ako sa pripraviť na prieskum?

    Pri analýze hepatitídy pomocou diagnostiky PCR sa od žily odoberá krv. Prechádzať alebo prebiehať inšpekcia je lepšia od rána, pretože krv musí byť vždy odovzdaná na prázdny žalúdok (po poslednom príjme potravy by mala prejsť menej ako 8 hodín).

    Aby bola analýza čo najspoľahlivejšia, mal by byť pacient vedomý niektorých faktorov, ktoré môžu mať vplyv na konečný výsledok:

    Pred darovaním krvi z žily potrebujete odpočinúť 20 minút. Okrem toho, že analýza je uvedená na prázdny žalúdok, takže po dobu 12 hodín nemôžete piť, fajčiť, športovať a jesť tučné jedlá. Niektoré lieky, ktoré musí pacient užívať, môžu mať vplyv na konečný výsledok. Laboratórny asistent by mal vedieť o prípade liečby drogami. Ak má byť krv podávaná dieťaťu vo veku menej ako 5 rokov, potom musí byť v priebehu pol hodiny pred diagnózou podávaná každých 10 minút. cez pohár vriacej vody.

    Je veľmi dôležité podstúpiť PCR na klinike, ktorá sa osvedčila. Napriek skutočnosti, že PCR určuje prítomnosť vírusu s presnosťou 100%, tento údaj sa môže znížiť na 95%, ak vezmeme do úvahy ľudský faktor.

    Nekvalifikovaní laboratórni technici alebo nesprávna povesť kliniky môžu spôsobiť falošné výsledky.

    Hepatitída B je vírusová infekcia, ktorá postihuje pečeň. Dnes je okolo 300 miliónov ľudí na celom svete nosičmi hepatitídy B.

    V niektorých prípadoch vírus prechádza do cirhózy pečene alebo hepatocelulárneho karcinómu (prvý stupeň rakoviny). Nové antivírusové stratégie na štúdium ochorenia majú dva ciele:

    Na liečbu a čistenie pečene naši čitatelia úspešne použili

    metóda Eleny Malysheva

    . Po dôkladnom preskúmaní tejto metódy sme sa rozhodli ponúknuť to vašu pozornosť.

    určiť, koľko je telo citlivé na vírusovú záťaž; či je vírus rezistentný na lieky a iné lekárske zákroky.

    Vlastnosti výskumu hepatitídy

    Sérologické štúdie sú zamerané na detekciu antigénov a protilátok v sére, ale táto metóda je nespoľahlivá. Vedci preto vyvinuli metódu polymerázovej reťazovej reakcie (PCR). Umožňuje nielen kvalitatívne stanoviť prítomnosť vírusu (jesť alebo nie), ale aj kvantitatívne (v akom množstve sú protilátky v krvnom sére).

    Pred zberom krvi by mal lekár zistiť:

    či pacient užíval omamné látky intravenózne; či osoba bola darcom alebo príjemcom (ktorému bola naliata krv); či bol pacient podrobený operácii; či bola poškodená koža pacienta; či je osoba istá zdravím svojho sexuálneho partnera; či existovali kontakty s infikovaným vírusom hepatitídy B.

    Pri akútnej hepatitíde môže byť pozitívny výsledok detegovaný 1-2 týždne po inkubácii pomocou PCR.

    Krvné testy na detekciu vírusovej hepatitídy B (HBV) sa vykonávajú:

    Diagnóza akútnej hepatitídy v: inkubačnej dobe (1-2 týždne); intenzívne obdobie ochorenia (3-4 týždne); obdobie skorého štádia obnovy. Diagnóza chronickej hepatitídy (chronická vírusová hepatitída). S kombináciou hepatitídy.

    Taktiež sa pravidelne analyzujú rizikové osoby, ktoré zahŕňajú:

    ľudia, ktorí potrebujú časté transfúzie krvi; pacienti podstupujúci kontinuálne postupy čistenia krvi na zlyhanie obličiek; ľudí s AIDS alebo infekciou HIV; tehotné ženy; zdravotníckych pracovníkov v kontakte s krvou; pacientov s príznakmi ochorenia pečene. Liečba cirhózy, rakoviny a iných ochorení pečene.

    Príprava na kvantitatívnu analýzu si vyžaduje súlad s týmito pravidlami:

    fajčiť 1 hodinu pred testom; Nejedzte 4 hodiny pred procedúrou; je najlepšie odovzdať kvantitatívnu analýzu po absolvovaní kvalitatívnej analýzy; Nepíšte alkohol denne pred štúdiom.

    Efektívna liečba ochorenia ovplyvňuje pokles množstva DNA vírusu v sére. Šesť mesiacov po začiatku liečby by sa množstvo vírusu malo znížiť o 2-3 poriadky. Ak sa výsledky testov nezmenili v čase alebo sa naopak zhoršili, celá liečba sa bez problémov zmení a akútna akútna hepatitída sa premenuje na chronickú.

    Keď DNA vírusu hepatitídy vstúpi do tela, infekcia môže ísť dvoma spôsobmi:

    replikátor (dochádza k rozvoju akútnej alebo chronickej hepatitídy, ktorá v budúcnosti vedie bez lekárskej intervencie k cirhóze pečene); integračný (vývoj asymptomatického, neaktívneho prenosu vírusu, ktorý stále vedie k cirhóze alebo hepatocelulárnemu karcinómu).

    Ako funguje postup odberu krvi? Lekár ťahá pacienta predlaktia turniket a vloží ihlu do žily v lakti, potom sa krv do injekčnej striekačky a naleje do špeciálnej skúmavky. Výsledky budú pripravené za niekoľko dní, čas závisí od miesta, kde pacient dáva analýzu.

    Materiálom je krvné sérum, lymfocyty, hepatobiobs, ktoré sa umiestnia do skúmavky s dobre zašroubovaným uzáverom. Výsledok však môže byť ovplyvnený kontaminovaným materiálom pre analýzu vzoriek, nadmerné vystavenie materiálu (je skladované až 24 hodín pri teplote nepresahujúcej +4 ° C).

    Metódy kvantitatívnej analýzy

    Existuje niekoľko spôsobov kvantitatívnej analýzy, vrátane PCR, ELISA, biochémie.

    PCR (polymerázová reťazová reakcia).

    Ide o analýzu povrchového antigénu-proteínu, ktorý tvorí súčasť vonkajšieho obalu vírusu. Po vstupe vírusových častíc do tela začne intenzívna reprodukcia na povrchu pečene a ničí zdravé bunky orgánu. Nové molekuly sa uvoľňujú do krvi.

    Na základe toho sa skúma hladina sérovej koncentrácie protilátok a určuje sa, či existuje alebo nie je infekcia hepatitídou B.

    Materiál na štúdiu sa užíva na prázdny žalúdok. PCR sa uskutočňuje v zariadení nazývanom zosilňovač.

    Algoritmus pre analýzu PCR:

    Najskôr sa DNA rozdelí na 2 oddelené reťazce zvýšením teploty materiálu na štúdium v ​​termocykleri. Materiál je mierne ochladený dusíkom. Priméry nájdu potrebné molekuly DNA a pripojia sa k nim. Predĺženie je tretí krok, keď dva priméry spájajú dve vlákna DNA. Prostredníctvom DNA polymerázového enzýmu sa DNA časť dokončí z priméru, ktorý sa k nemu pripojil. V oblasti v primérovej oblasti sa teda v každom vlákne DNA vytvorí druhý komplementárny reťazec DNA.

    V budúcnosti sa tieto kroky opakujú mnohokrát a 35 až 45 cyklov sa vykoná v priebehu niekoľkých hodín, vytvoria sa miliardy kópií požadovanej vzorky. Ak existujú takéto kópie, vypočítajte ich množstvo na 1 ml materiálu na analýzu.

    Mnohí z našich čitateľov na liečbu a čistenie pečene aktívne využívajú široko známu metódu založenú na prírodných zložkách, ktorú objavila Elena Malysheva. Odporúčame vám, aby ste si ju prečítali.

    Okrem PCR sa uskutočňuje test ELISA (enzymatický imunotest). Určuje nielen povrchové protilátky, ale tiež lokalizované vo vnútri a prepojené s predchádzajúcimi antigénmi, ako aj ich počet.

    biochémie

    Iná metóda kvantitatívnej analýzy. Potom, čo sa uvoľní kontakt s vírusom z poškodených pečeňových buniek v tele enzýmy, ak je ich počet je vyšší ako normou, potom môžeme hovoriť o infekciu. Okrem toho, že je potrebné určiť, vírusovej záťaže (DNA-HBV), prejsť pečeňové testy (bilirubín so zlomkami, ALT, AST, alkalickej fosfatázy, gama-GT). A musia je návšteva infekčné ochorenie špecialista, ktorý smeruje pacienta fibroelastometriyu ak je to nutné, vyberie priebeh liečby.

    Biochémia - kvantitatívna analýza

    PCR v reálnom čase

    Pri tejto metóde sa vyhľadávanie kópií vyskytuje po každom cykle a nie po 35-45. Metóda funguje rovnako ako PCR, umožňuje určiť počet kópií vo vzorke pre výskum. Tak je čas analýzy výrazne znížený, zatiaľ čo 100% výsledok je zaručený.

    Detekcia DNA hepatitídy B

    Stanovenie množstva DNA hepatitídy B je veľmi dôležité, pretože s malým indikátorom je prognóza ochorenia výhodnejšia ako u väčšej. Koncentrácia HBV DNA sa meria v kópiách / ml alebo me / ml

    1 me / ml = 2,83 x 10 kópií / ml

    Výsledky tejto analýzy môžu byť nasledovné:

    DNA vírusu nie je detegovaná, ak nie je prítomná v tele alebo je koncentrácia veľmi nízka, 90 me / ml = 200 kópií / ml; DNA vírusu bola detegovaná v množstve pod normou koncentrácie, 2 x 106 kópií / ml; DNA vírusu je v priemernom množstve pri 2 × 106 - 2 × 109 kópií / ml; DNA vírusu je viac ako 2 × 109 kópií / ml, koncentrácia protilátok je vysoká, čo naznačuje vývoj ochorenia.

    Ak je výsledok analýzy pozitívny, diagnostikuje sa:

    nosič vírusu hepatitídy B; chronická hepatitída; akútna hepatitída B.

    Ak je výsledok negatívny, potom:

    v tele nie je žiadny vírus; prítomnosť hepatitídy B počas obdobia regenerácie (ak boli predchádzajúce testy pozitívne).

    V zriedkavých prípadoch negatívny výsledok testu pre DNA vírusu hepatitídy B naznačuje rýchly a malígny priebeh ochorenia.

    Rozhodnutie o vykonaní testu na vírus trvá:

    Odpoveď našej čitateμky Svetlany Litvinovej

    Nedávno som čítal článok, ktorý popisuje "Leviron Duo" na liečbu ochorení pečene. S týmto sirupom môžete FOREVER vyliečiť pečeň doma.

    Nebola som zvyknutá na dôveru k žiadnym informáciám, ale rozhodla som sa skontrolovať a objednať obal. Zmeny som si všimol o týždeň neskôr: neustále bolesť, ťažkosť a brnenie v pečeni, ktoré ma predtým trápilo - ustúpili a po 2 týždňoch úplne zmizli. Nálada sa zlepšila, znova sa objavila túžba žiť a užívať si život! Skúste a vy, a ak máte záujem, potom nasledujúci odkaz je článok.

    Prečítajte si článok -> Terapeut; virologist; hematológ; infekčné ochorenia.

    Kvantitatívna analýza je povinná v diagnostike ochorenia a mala by sa uskutočniť pred začiatkom liečby. Treba však mať na pamäti, že hepatitída B sa niekedy intenzívne prelína s hepatitídou D, čo môže spôsobiť dodatočné ťažkosti pri vykonávaní takejto analýzy. Preto by ste mali zvážiť takéto varianty komplikácií:

    v tele nie je žiadny vírus; prítomnosť hepatitídy B počas obdobia regenerácie (ak boli predchádzajúce testy pozitívne).

    V zriedkavých prípadoch negatívny výsledok testu pre DNA vírusu hepatitídy B naznačuje rýchly a malígny priebeh ochorenia.

    Rozhodnutie o vykonaní testu na vírus trvá:

    Odpoveď našej čitateμky Svetlany Litvinovej

    Nedávno som čítal článok, ktorý popisuje "Leviron Duo" na liečbu ochorení pečene. S týmto sirupom môžete FOREVER vyliečiť pečeň doma.

    Nebola som zvyknutá na dôveru k žiadnym informáciám, ale rozhodla som sa skontrolovať a objednať obal. Zmeny som si všimol o týždeň neskôr: neustále bolesť, ťažkosť a brnenie v pečeni, ktoré ma predtým trápilo - ustúpili a po 2 týždňoch úplne zmizli. Nálada sa zlepšila, znova sa objavila túžba žiť a užívať si život! Skúste a vy, a ak máte záujem, potom nasledujúci odkaz je článok.

    Prečítajte si článok -> Terapeut; virologist; hematológ; infekčné ochorenia.

    Kvantitatívna analýza je povinná v diagnostike ochorenia a mala by sa uskutočniť pred začiatkom liečby. Treba však mať na pamäti, že hepatitída B sa niekedy intenzívne prelína s hepatitídou D, čo môže spôsobiť dodatočné ťažkosti pri vykonávaní takejto analýzy. Preto by ste mali zvážiť takéto varianty komplikácií:

    koinfekcia - naraz existuje infekcia dvomi typmi hepatitídy B a D. Takéto ochorenie je oveľa komplikovanejšie a bolestivé. Chronická forma tejto choroby nie je, pretože vo väčšine prípadov choroba končí smrteľným výsledkom; superinfekcia - včasná akútna hepatitída D je spojená s akútnym HBV, v takom prípade choroba prúdi do chronickej s nepriaznivou prognózou.

    Stále si myslíte, že je nemožné obnoviť PEČIVO?

    Súdiac podľa skutočnosti, že teraz čítate tieto riadky - víťazstvo v boji proti ochoreniam pečene nie je na vašej strane...

    A už ste už premýšľali o chirurgickom zásahu a používaní toxických liekov, ktoré sú inzerované? Je to pochopiteľné, pretože ignorovanie bolesti a ťažkosti v pečeni môže viesť k vážnym následkom. Nauzea a vracanie, nažltlý alebo šedivý odtieň kože, horkosť v ústach, stmavnutie farby moču a hnačka... Všetky tieto príznaky nie sú známe z úst.

    Ale možno je pravdepodobnejšie, že zaobchádzať nie s dôsledkom, ale s dôvodom? Prečítajte si príbeh Alevtiny Tretyakovej, o tom, ako sa jej nielen vyrovnala s ochorením pečene, ale tiež ju obnovila.... Prečítajte článok >>


    Súvisiace Články Hepatitída