Polymerázová reťazová reakcia (PCR) v molekulárnej biológii sa nazýva experimentálna metóda detekcie vírusov. Umožňuje významne zvýšiť koncentráciu určitých fragmentov nukleovej kyseliny (DNA) vo vzorkách biologického materiálu, čo umožňuje určiť (rozpoznať) a spočítať ich.

Analýza sa uskutočňuje nasledovne. Genetický materiál (vzorka krvi), ktorý potenciálne môže obsahovať požadovaný gén, sa zavedie do skúmavky. Aj tam sú umiestnené priméry - chemicky syntetizované malé dĺžky požadovaného génu.

Do nádoby sa tiež pridá DNA alebo RNA polymeráza, je schopná vytvoriť reťazec nukleovej kyseliny, ktorý je úplne identický s pôvodným reťazcom. Súbor štyroch voľných nukleotidov, špeciálny stavebný materiál pre RNA alebo DNA, z ktorých jedna obsahuje rádioaktívne častice fosforu, sa tiež zavádza do výslednej kompozície.

Výsledná zmes sa zahreje na 95 až 96 ° C, kvôli ktorému sa rozdelia obidve DNA helixy, ktoré sa previažu v bežnom stave. Potom sa prípravok ochladí, v tomto čase sa priméry pripojí k požadovanej oblasti vírusového genómu, bez toho, aby RNA (alebo DNA) opäť vytvorila dvojitú špirálu.

Počas chladenia polymeráza vyhľadáva voľný reťazec nukleotidov. Pre fungovanie tohto enzýmu je potrebný jeden reťazec nukleotidov. Pretože polymeráza klesá pozdĺž reťazca DNA (ako krúžok lano), nemôže fungovať na dvojitej špirále.

Potom sa uskutočňuje opakovaný cyklus zahrievania, kvôli ktorému sú nukleotidové reťazce oddelené. Pri každom z týchto cyklov PCR sa množstvo požadovaného génu pre hepatitídu vo vzorke zvyšuje v geometrickej progresii a zvyšok genetického materiálu sa produkuje lineárne.

Po purifikácii roztoku nukleotidových zvyškov a oddelení reťazcov DNA parametrom molekulovej hmotnosti od elektroforézy je ľahké určiť, či požadovaný gén existuje v testovanej vzorke alebo nie.

Výhody PCR

Laboratórna štúdia používajúca metódu PCR umožňuje získať ešte viac informácií ako len prítomnosť RNA vírusu. Pri určovaní parametra úrovne rádioaktívneho žiarenia je možné určiť, aké množstvo genetického materiálu bolo na začiatku obsiahnuté v skúmanej vzorke. V prípade hepatitídy určte úroveň vírusovej záťaže.

Ďalšou výhodou tejto metódy je veľmi vysoká citlivosť CR reakcie. Je oveľa vyššia ako klasické metódy na detekciu vírusov. V ideálnom prípade, aby sa identifikoval požadovaný gén, stačí iba jeden vírus vo vzorke na PCR.

Okrem toho je PCR úplne špecifická. Jeho priméry sú vytvorené tak, aby úplne zodpovedali jedinečným častiam požadovaných génov, ktoré žiadna iná sekvencia nemá. Oba odtlačky prstov sú jedinečné a v každom géne existujú jedinečné sekvencie nukleotidov.

Kvalitatívna analýza PCR

Kvalitatívna analýza odhaľuje iba prítomnosť vírusu v krvi. Tento test sa má vykonať u všetkých pacientov, u ktorých sa zistilo, že majú v krvi protilátky na hepatitídu C. Výsledok môže byť len jedna z dvoch hodnôt: "zistená" alebo "nezistená". U zdravého človeka by norma (referenčná hodnota) mala byť "nezistená".

Existuje aj špeciálna interpretácia takýchto výsledkov uskutočneného kvalitatívneho výskumu:

• Výsledok je "objavený". To znamená, že vo vzorke biologického materiálu, s ktorým bolo nájdené RNA fragmentu, ktorý je špecifický pre vírusu hepatitídy C V dôsledku toho je skutočnosť, že u pacienta s infekciu vírusom hepatitídy B s C-je výsledok kvalitatívnej PCR je "objavil", znamená to, že vírus opakovanie a v tomto čase infikuje nové pečeňové bunky v tele.
• Výsledok je "nezistil". Takéto rozhodnutie ukazuje, že vo vzorke biologického materiálu získaný fragment RNA nie je v laboratóriu, ktorá je špecifická pre HCV RNA buď rovnakej koncentrácii patogénu infekcie vo vzorke bola pod hranicou citlivosti testu detekovaný.

V akútnej fáze RNA vírusu hepatitídy C sa môžu kvalitatívne štúdie s použitím PCR techniky odhaliť po 1-2 týždňoch bezprostredne po infekcii tela, tj dlho pred vznikom protilátok proti samotnej hepatitíde.

Nespoľahlivé výsledky analýz takéhoto vyšetrovania je možné získať s:

• kontaminovaný biomateriál;
• prítomnosť heparínu v krvi pacienta;
• prítomnosť vo vzorke chemických alebo bielkovinových látok (inhibítorov), ktoré ovplyvňujú rôzne zložky PCR.

Pre kvalitatívnu analýzu PCR nie je potrebná špeciálna príprava pacienta na štúdium. Venózna krv sa používa ako materiál.

Hodnotenie výsledkov

Kvalitatívne PCR testy majú určitý stupeň citlivosti a v závislosti od presnosti výskumu a úroveň vybavenia v laboratóriu môže kolísať medzi 10 a 500 IU / ml.

To znamená, že ak je vírus vo vzorke krvi prítomný vo veľmi nízkej koncentrácii (menej ako prahová citlivosť daného laboratória), pacienta pacienta sa môže zistiť ako "nezistené". Z tohto dôvodu, pri vykonávaní kvalitatívnu analýzu PCR s nízkou úrovňou virémie (vírus nízka koncentrácia), napríklad u pacientov, ktorí podstúpili liečbu antivírusovej terapie, je dôležité poznať, a prah citlivosti diagnostického systému.

Varianty diagnostických systémov

Na kontrolu virologickej odpovede sa odporúča používať antivírusovú liečbu na použitie diagnostických systémov s prahom citlivosti najmenej 50 IU / ml. Tieto kritériá sú splnené, napríklad: analyzátory COBAS Ampicolor HCV test (c presnosť 50 IU / ml) a RealBest HCV RNA (s citlivosťou 15 IU / ml).

Podľa odporúčaní WHO pre vytvorenie konečnej diagnóze hepatitídy C, musí byť založené iba na základe trojitého detekcie RNA vírusu vo vzorkách séra od pacienta so žiadnymi inými druhmi hepatitídy markeru.

Okrem metód PCR sa na odhaľovanie HCV RNA u pacientov používa štúdia TMA (metóda transkripčnej amplifikácie). Má najvyššiu hranicu citlivosti (5-10 IU / ml), ale v našej krajine táto metóda testovania ešte nie je veľmi obvyklá.

Rozsah zistených zmien vírusov

Toto kvalitatívne stanovenie prítomnosti RNA vírusu hepatitídy C v sére umožňuje určiť niekoľko genotypov tohto vírusu. V súčasnej dobe veda vie viac ako šesť genotypov tohto vírusu, rovnako ako asi 10 subtypov choroby.

Vírusy s 1, 2, 3 genotypmi sú v našej krajine bežné. Laboratóriá môžu identifikovať nasledujúce genotypy: 1a a 1b, 2a, 2b a 2c, a 3, 4, 5a a 6 bez ohľadu na podtypy. Pri všetkých vírusových modifikáciách je špecifickosť detekcie 100%.

Kvantitatívna analýza PCR

Pomocou kvantitatívneho PCR testu sa určí koncentrácia vírusu hepatitídy v krvných vzorkách (vírusová záťaž). Tento test virémie (koncentrácia vírusu) vám umožňuje určiť počet jednotiek špecifického genetického materiálu (najviac vírusovej RNA), ktorý sa deteguje v určitej miere. V tomto prípade určte jeho koncentráciu v 1 ml, čo zodpovedá 1 cu. cm.

Kvantitatívne parametre analýzy sú vyjadrené v číslach pre toto použitie ako jednotky merania medzinárodných jednotiek (IU) na mililiter (ml), označené ako ME / ml. Teraz v niektorých laboratóriách možno množstvo vírusu stanoviť v iných jednotkách: počet kópií na ml je označený ako kópie / ml.

• Načasovanie: pre hepatitídu C sa takáto kvantitatívna analýza PCR vykonáva tesne pred začiatkom liečby. Potom na 1., 4., 12. a 24. týždni. Hodnotenie v 12. týždni je orientačné, umožňuje určiť účinnosť terapie.
• Príprava na analýzu. Pri kvantitatívnej analýze PCR sa nevyžaduje špeciálna príprava pacienta na štúdium. Polhodinu pred odberom vzoriek by ste nemali fajčiť. Venózna krv sa používa ako laboratórny materiál.

Hodnotenie výsledkov

V prípade rôznych laboratórnych testovacích systémov existujú pre tento ukazovateľ rôzne konverzné faktory v IU / ml. V priemere sa používa konverzný parameter, v ktorom sú 4 kópie / ml = 1 IU / ml. To znamená, že ak laboratórium dáva výsledok PCR analýzy 2,4 * 10 6 kópií / ml, potom by tento parameter mal byť rozdelený na 4 a dostaneme 6 x 105 5 IU / ml.

Úroveň vysokého zaťaženia 800 000 IU / ml sa považuje za vysokú, čo je približne ekvivalentný indexu 3 000 000 kópií / ml. Nízka virémia podľa niektorých autorov zodpovedá parametrom kvantitatívnej PCR pod 400 000 IU / ml.

V dôsledku kvantitatívneho testu sa konečné výsledky dajú dodať nie vo forme digitálnej hodnoty, ale: "pod meracím rozsahom" alebo "nezistené".

• Vyhodnotenie: "pod meracím rozsahom". To naznačuje, že kvantitatívny test nezaznamenal vírusovú RNA vírusu hepatitídy C, ale samotný vírus je v tele prítomný vo veľmi malých koncentráciách. Toto je indikované dodatočným kvalitatívnym testom, ktorý potvrdzuje prítomnosť vírusu.
• Hodnotenie: "nezistené". Tento výsledok naznačuje, že kvantitatívny test nezistil vírus vo vzorke RNA.

Parameter vírusovej záťaže určuje najprv stupeň infekčnosti choroby, úroveň "infekčnosti" pacienta. Čím vyššia je koncentrácia vírusu pacienta, tým väčšia je pravdepodobnosť jeho prenosu na iné osoby. Napríklad, ak máte sex s chorým človekom, alebo vertikálna cesta. Takýto kvantitatívny indikátor tiež pomáha určiť účinnosť liečby pacienta.

Vykonávanie kvantitatívnej analýzy PCC je dôležité pre antivírusovú liečbu, hodnotenie jej úspechu a plánovanie trvania kurzu. Takže s rýchlou odpoveďou tela na liečbu a nízkym stupňom virémie sa dĺžka liečby môže znížiť.

Pri pomalom znižovaní kvantitatívneho parametra PCR by sa antivírusová liečba mala rozšíriť alebo upraviť. Ak je úroveň vírusovej záťaže nízka, potom je to priaznivý faktor liečby, ak je vysoká, potom je aplikovaná metóda liečby neúčinná a lieky alebo spôsoby ich použitia by sa mali zmeniť.

Analýza PCR pre hepatitídu C

Diagnóza hepatitídy zahŕňa celý komplex testov na určenie prítomnosti vírusu v krvi. Jedným zo spôsobov, ako zistiť ochorenie, je metóda PCR ako reakcia na hepatitídu C. Čo je to dôvod, prečo je PCR analýza hepatitídy taká dôležitá, ako sa vykonáva a dekóduje?

Čo je to?

Polymerázová reťazová reakcia alebo PCR sa používa na diagnostiku žalúdočných vredov, kolitídy, enteritidy. Jeho hlavnou výhodou je, že pomáha detegovať v tele samotný samotný vírus hepatitídy C a protilátky proti nemu, ktoré majú schopnosť spôsobiť, že imunitný systém nereaguje kvôli svojej schopnosti mutovať.

Štúdiou a jej podstatou je vytvoriť určité podmienky, v ktorých dochádza k reakcii reťazca hepatitídy RNA. Ak sa v porovnaní s nukleotidovou sekvenciou vírusu hepatitídy C zistí náhoda, znamená to, že v krvi sú vírusové častice a rozpad sa vyskytuje v pečeni. Ak je množstvo vírusu pod určitou úrovňou, urobí sa negatívna diagnóza, ak je vyššia - pozitívna.

Existujú dva typy krvných testov s použitím metódy PCR na hepatitídu: kvantitatívna analýza a kvalitatívna analýza.

Kvantitatívna PCR, ako je uvedené vyššie, určuje koncentráciu RNA vírusu hepatitídy. Okrem toho je schopný poskytnúť informácie o intenzite, s akou sa patológia vyvíja a o účinnosti predpísanej liečby. Kvantitatívna analýza hepatitídy C je mimoriadne dôležitá, pretože stanovuje odolnosť voči antivírusovým liekom a umožňuje upraviť liečbu.

Po ukončení liečby pacientom pomáha PCR pri určovaní ďalšieho poradia predpisov. V niektorých prípadoch sú potrebné ďalšie prieskumy. Napríklad, ak je hladina ALP zvýšená (ale nie viac ako 2 krát za pol roka) a analýza indikuje vírusové zaťaženie nad 105 IU / ml, pacientovi bola pridelená biopsia. Ak kvantitatívna analýza PCR zistí silný zápal a fibrózu, pacientovi sa predpíše liečebný postup s antivírusovými liekmi.

V situáciách, v ktorých je veľký počet vírusových častíc kombinovaných s vysokým ALT, musí byť pacient okamžite liečený bez ďalších diagnostických opatrení.

Vykonajte tento test a zistite, či máte problémy s pečeňou.

Kvalitatívnu interpretáciu ukazovateľov kvantitatívnej analýzy krvi na hepatitídu môžu kvalifikovaní a skúsení odborníci a moderná technológia to pomáha pri nízkych koncentráciách vírusu v krvi.

Kvalitatívna PCR analýza je zameraná na určenie a potvrdenie skutočnej prítomnosti vírusu v tele. Vykonáva sa s detekciou protilátok proti hepatitíde v krvi. Ide o kvalitatívne test na hepatitídu zaručiť presnosť výsledku o 100% a umožňuje diagnostikovať v skorých štádiách ochorenia, čo umožňuje bojovať proti hepatitíde B počas prvých týždňov po infekcii a zvyšuje šance na úplné vyliečenie (v prípade ochorenia typu B).

Výhody PCR

Pri skúmaní metódy PCR a dešifrovaní krvného testu na hepatitídu je tiež možné určiť genotyp pôvodcu ochorenia. Existuje 6 genotypov vírusu a veľké množstvo podtypov, ale v našom regióne je distribúcia 1, 2 a 3 genotypov.

Ďalšie výhody tohto typu diagnostiky sú:

• Vysoká presnosť prijatých indikátorov a nízka pravdepodobnosť chýb v nich;
• vysoká citlivosť na vírusové častice v krvi;
• možnosť detekcie viacerých patogénov;
• diagnostika patogénnych intracelulárnych mikroorganizmov, ktoré majú vysokú antigénnu variabilitu;
• práca s dekódovaním analýzy hepatitídy umožňuje zistiť latentné prúdové infekcie.

Komu vymenúva

Analýza PCR pre hepatitídu nutne zahŕňa nasledujúce kategórie ľudí:

• tehotné ženy;
• zamestnanci zdravotníckych zariadení;
• potenciálnych darcov krvi a orgánov;
• tých, ktorí majú charakteristické príznaky choroby;
• HIV-infikované osoby;
• drogovo závislých;
• osoby vedúce promiskuitný sexuálny život.

Ako sa vykonáva analýza a vyžaduje sa odborná príprava?

Vzorky krvi na PCR sa vykonávajú z žily. Zvyčajne to nastane ráno, kým osoba jedla, pretože po jedení musí prejsť minimálne 8 hodín. V extrémnych prípadoch môže byť krv odobratá na vyšetrenie denne alebo večer, ale časová medzera medzi analýzou a príjmom potravy by mala byť aspoň 5 hodín.

Ľudský faktor sa môže vo výsledkoch kvantitatívne odzrkadliť: ich presnosť sa v niektorých prípadoch znižuje zo 100% na 95%, preto je nevyhnutné pripraviť na dodávku krvi vopred. Kvalita biomateriálu na analýzu bude vhodná, ak pacient dodržia tieto pravidlá:

• Pred dávaním krvi môžete piť len čistú vodu;
• počas dvoch dní predtým, ako by sa štúdie odmietla prijímať vyprážané a mastné potraviny, ako aj alkoholické nápoje;
• deň pred návštevou laboratória prestať užívať lieky. V prípade, že to nie je možné, je absolútne nevyhnutné upozorniť ošetrujúceho lekára a ošetrujúceho lekára;
• v predvečer stresových situácií a fyzickej námahy;
• Neprechádzajte pomocou ultrazvukových, rádiologických a inštrumentálnych štúdií krátko pred odberom krvi;
• hodina pred analýzou by sa mala zdržať fajčenia;
• 20 minút pred dodaním krvi treba rozptýliť, uvoľniť a dokonca dýchať.

Ak test vykoná dieťa mladšie ako 5 rokov, rodičia by mali zabezpečiť, aby pili varenú vodu každých 10 minút počas pol hodiny pred odberom vzoriek biomateriálu.

Vysvetlenie prijatých údajov

Analýzu možno prezentovať slovom (v prípade kvalitatívneho výskumu), napríklad "nenájdený" alebo "pod rozsahom zmien". V prvom prípade to znamená, že infekcia nebola zistená. V druhej - že je prítomný vírus, ale v malom množstve. Táto situácia si vyžaduje opätovné preskúmanie.

Vírusová záťaž je určená množstvom infekčnej RNA a je označená ako ME / ml alebo kópie / ml.

Normálny ukazovateľ (norma) kvantitatívnej analýzy hepatitídy C je rozsah od 1,8 x 102 do 2,4 x 107 IU / ml.

Koncentrácia vírusu v krvi môže byť:

• nízka: od 600 IU / ml do 3x104 / ml;
• priemer: od 3x10 4 IU / ml do 8x10 5 IU / ml;
• vysoká: viac ako 8x10 5 IU / ml.

Kvantitatívna a kvalitatívna analýza PCR pre hepatitídu umožňuje určiť prítomnosť vírusu v tele a úroveň jej koncentrácie. Polydizovaná reťazová reakcia je schopná diagnostikovať ochorenie už v počiatočnom štádiu, ale na to je potrebné, aby pacienti čo najskôr kontaktovali lekárske inštitúcie o pomoc a prísne dodržiavali odporúčania lekára.

Náklady na krvný test a PCR na hepatitídu C

Hepatitída C je zápalová patológia, pri ktorej sú postihnuté pečeňové bunky. Choroba sa vyvíja v dôsledku penetrácie vírusu hepatitídy C (HVC) do ľudského tela.

Forma ochorenia môže byť akútna alebo chronická.

Najčastejšie sa príznaky akútnej formy choroby, väčšina pacientov nie sú k dispozícii, niekedy choroba je sprevádzaná bolesťou v bruchu, znížená výkonnosť, zvýšená únava, nechutenstvo porucha, tmavý odtieň moču, zafarbenie stolice, žltnutie kože a slizníc, bolesti kĺbov. Takéto príznaky sú spravidla 6-8 týždňov po infekcii, ale môžu sa prejaviť po šiestich mesiacoch.

S rozvojom takýchto javov je potrebné aplikovať na lekársku inštitúciu a podrobiť sa komplexnému vyšetreniu celého organizmu. V rámci lekárskej prehliadky sa vykoná krvný test na hepatitídu C.

Dnes s pomocou moderných diagnostických techník je možné túto patológiu identifikovať v počiatočnom štádiu vývoja, čo výrazne zvyšuje šance na úplné vyliečenie choroby.

Analýza hepatitídy C je povinná pre nasledujúce skupiny ľudí:

• ženy v období nosenia dieťaťa;
• osoby s príznakmi hepatitídy;
• zamestnanci zdravotníckych zariadení;
• potenciálnych darcov orgánov a krvi;
• drogovo závislých osôb, osôb infikovaných vírusom HIV, osôb, ktoré vedú neporušený intímny život.

Zoznam potrebných štúdií

Aké testy by som mal urobiť pri hepatitíde C? Ak chcete presne diagnostikovať ochorenie, identifikovať jej príčiny a určiť stav parenchýmu pečene, je potrebné vykonať nasledujúce štúdie:

• všeobecná analýza moču a krvi;
• biochemická analýza krvi;
• PCR analýza;
• krvný test na detekciu protilátok proti HVC;
• krvný test dostupných protilátok na vlastné pečeňové bunky;
• biopsia pečene.

Výklad krvného testu na hepatitídu C vykonáva špecialista. Pozrime sa na každú metódu výskumu podrobnejšie a tiež pochopíme, aký druh analýzy hepatitídy C je najpresnejší.

Všeobecná analýza

Pri vykonávaní všeobecného krvného testu na hepatitídu C môžete posúdiť stav pacienta. Zmeny krvného obrazu nie sú vnímané ako špecifické príznaky hepatitídy, ale s touto chorobou existujú porušenia, ako napríklad:

• koncentrácia hemoglobínu, krvných doštičiek a leukocytov klesá;
• zvyšuje sa obsah lymfocytov;
• zrážanlivosť krvi je narušená;
• rýchlosť sedimentácie erytrocytov (ESR) sa zvyšuje.

Všeobecná analýza moču umožňuje zistiť vo svojom zložení urobelín - pigment žlče, ktorý sa objavuje v moči v dôsledku poruchy pečene.

Biochemická analýza

Biochemická analýza krvi pri hepatitíde C nám umožňuje identifikovať takéto porušenia ako:

• zvýšené hladiny pečeňových enzýmov (alanínaminotransferázy - ALT a AST - AST), ktoré vstupujú do krvi pri poškodení hepatocytov. Za normálnych podmienok sú tieto ukazovatele u mužov by nemala byť väčšia ako 37 IU / l pre ženy - nie viac ako 31 IU // l. Zvýšená koncentrácia ALT a AST v hepatitídy C, asymptomatický, často jediný symptóm ochorenia. Naviac sa zvyšuje v krvných glutamyl alkalickej fosfatázy (zvyčajne nie viac ako 150 IU / l).
• je prekročený obsah bilirubínu (celkový aj priamy) v krvi. Ak je hladina žltého pigmentu v sére vyššia ako 27-34 umol / l, dochádza žltačka (až do 80 mol / l v jednoduchým spôsobom, 86-169 pmol / l - mierne, nad 170 mmol / l - závažná forma).
• Znížila úroveň albumínov, koncentrácia gama globulínov sa naopak zvýšila. Gama globulíny pozostávajú z imunoglobulínov - protilátok, ktoré chránia telo pred patogénmi.
• zvýšená koncentrácia triglyceridov v krvi.

PCR štúdia

Pomocou PCR techniky je možné diagnostikovať patogén. Vykonanie tejto analýzy umožňuje detegovať vírus v krvi, aj keď jeho množstvo je minimálne. PCR analýza na hepatitídu C, umožňuje určiť krvný existujúcej infekcie už po 5 dňoch infekcie, tj., Dlho predtým, než sa objavia protilátky.

Ak je výsledok testu krvi hepatitídy C PCR pozitívne, znamená to, že prítomnosť aktívnej infekcie v tele. Pomocou tejto metódy môžete vykonať kvalitatívne a kvantitatívne štúdie RNA HVC.

V priebehu kvalitatívnej analýzy PCR pre hepatitídu C je možné detegovať existujúci vírus v ľudskom tele.

Takýto diagnostický postup sa vykonáva, ak sa v krvi deteguje anti-HVC.

Transkripcia analýzy hepatitídy C obsahuje informáciu, že infekcia v tele je buď detekovaná, alebo nie je detegovaná. V normálnom stave sa nepozorujú patologické látky v krvi.

Ak analýza hepatitídy C prináša pozitívny výsledok, znamená to, že patogénny mikroorganizmus je kontinuálne rozdelený a ovplyvňuje pečeňové bunky.

Výsledky takejto analýzy môžu byť nespoľahlivé, je možné v nasledujúcich prípadoch:

• kontaminácie použitého biomateriálu;
• ak je v krvi heparín;
• v prítomnosti chemických alebo proteínových látok (inhibítorov) v skúmanom biomateriáli, ktoré ovplyvňujú prvky PCR.

Kvantitatívna analýza pre hepatitídu C poskytuje informácie o množstve vírusu obsiahnutého v krvi, to znamená, že určuje vírusovú záťaž. Tento termín znamená množstvo HVC RNA prítomné v krvi (napr. 1 ml). Pri interpretácii kvantitatívnej analýzy hepatitídy C je táto hodnota vyjadrená v digitálnom ekvivalente meranom v IU / ml.

Krv na PCR pri hepatitíde C sa užíva pred terapeutickými opatreniami. Po analýze sa uskutoční 1, 4, 12 a 24 týždňov. Štúdia v 12. týždni je indikatívna a vykonáva sa na posúdenie účinnosti prebiehajúcich liečebných postupov.

Ak je analýza hepatitídy C v tehotenstve pozitívna a vírusová záťaž je prekročená, riziko prenosu patogénov z chorého matky na dieťa sa niekoľkokrát zvýši. Aj pri zvýšených hodnotách vírusového zaťaženia je vykonávanie terapeutických opatrení ťažké.

Podľa analýzy hepatitídy C, ak vírusová záťaž presiahne 800 000 IU / ml, potom je vysoká. Ak sú hodnoty nižšie ako 400 000 IU / ml, úroveň vírusovej záťaže sa považuje za nízku.

Analýza hepatitídy C pomocou metódy PCR sa považuje za najpresnejšiu a má niekoľko výhod oproti iným možnostiam výskumu, a to:

• priamu diagnózu patogénu. Pri vykonávaní tradičných štúdií sa určuje prítomnosť proteínových markerov, ktoré sú produktmi životne dôležitých aktivít patogénnych látok. Len to hovorí, že infekcia je prítomná v krvi. Keď sa analýza hepatitídy C uskutočňuje metódou PCR, je možné určiť typ príčinného činidla nebezpečnej patológie.
• špecifickosť metodiky. Počas tohto postupu sa v biomateriáli identifikuje jedinečná oblasť DNA, ktorá zodpovedá iba jedinému typu patogénu. To umožňuje minimalizovať pravdepodobnosť získania nespoľahlivých výsledkov.
• vysoká citlivosť. Pri analýze PCR je možné detegovať minimálne množstvo vírusu. Je to dôležité, ak sú identifikované podmienečne patogénne látky, ktoré sú hrozbou len vtedy, ak je ich úroveň zvýšená.
• pri použití tejto techniky možno v jednej biologickej vzorke detegovať niekoľko patogénov.
• je možné odhaliť skryté infekcie. Okrem toho analýza umožňuje diagnostikovať patogény, ktoré žijú vo vnútri buniek a majú vysokú antigénnu variabilitu.

Ak sú výsledky štúdie pozitívne, potom sa stopy vírusu nachádzajú v biomateriáli, potom má sieť v tele infekciu.

Negatívna analýza PCR pre hepatitídu C znamená, že v biomateriáli nie sú stopy infekcie.

Imunologické vyšetrenie

Táto metóda umožňuje identifikovať protilátky proti všetkým typom vírusu hepatitídy, ako aj protilátky proti pečeňovým bunkám vášho tela, ktoré sú podporované rozvojom autoimunitnej hepatitídy.

Výsledky získané počas štúdie sú relevantné počas 3 mesiacov, potom by ste mali znova darovať krv na hepatitídu C.

Je tiež možné vykonať expresný výskum pomocou špeciálnych testovacích prúžkov. Táto analýza umožňuje určiť protilátky proti vírusu v krvi a slinách. Takýto postup sa môže uskutočniť nezávisle, doma.

Biopsia pečene

Na vykonanie takejto analýzy sa odoberie prvok pečeňového parenchýmu a uskutoční sa histologická štúdia výsledného biomateriálu. To nám umožňuje posúdiť stav orgánu: identifikovať zápalové, nekrotické ložiská, stupeň fibrózy a podobne.

Dnes sa používajú testy, ktoré nahrádzajú histologickú analýzu pečeňového parenchýmu.

Na posúdenie štádia poškodenia pečene a intenzity zápalového procesu použite špecifické biomarkery žilovej krvi. S pomocou Fibrotestu je možné posúdiť rozsah šírenia fibrózneho tkaniva.

Pri vykonávaní testu Actitest je možné získať informácie o intenzite patologických procesov v pečeňovom parenchýme. Pomocou Steatotestu môžete diagnostikovať tukovú degeneráciu pečeňového tkaniva a posúdiť stupeň tohto procesu. Fibromax pozostáva zo všetkých vyššie uvedených testov a môže zahŕňať aj ďalšie štúdie.

Príprava na štúdiu

Aké testy sme vykonali pre hepatitídu C a ako sa vykonáva tento alebo ten typ výskumu, zistili sme. Rovnako dôležité je vedieť, ako sa pripraviť na analýzu.

Na získanie spoľahlivých výsledkov sa odporúča dodržiavať nasledujúce požiadavky:

• Analýzy hepatitídy C by sa mali užívať ráno, na prázdny žalúdok. V poslednej dobe by ste mali jesť potravu aspoň 8 hodín pred testom.
• Odber vzoriek z biomateriálu sa môže vykonávať v deň alebo večer. V takom prípade je dôležité, aby medzi posledným jedlom a analýzou prešlo najmenej 5-6 hodín.
• Pred darovaním krvi na hepatitídu C, čaj, káva, džús alebo iné nápoje by mali byť zlikvidované, iba voda je povolená.
• 48 hodín pred štúdiom je potrebné vylúčiť konzumáciu tučných, vyprážaných potravín a nápojov obsahujúcich alkohol.
• Najmenej hodinu pred vykonaním testu sa musíte zdržať fajčenia.
• Nevykonávajte analýzu ihneď po ultrazvuku, inštrumentálnom, rádiologickom vyšetrení, masáži alebo fyzioterapii.
• deň pred začatím štúdie, aby sa vylúčilo použitie liekov a intenzívna fyzická aktivita. Emocionálne stresy sú tiež kontraindikované.
• 15 minút pred testom sa odporúča držať v tichom stave.

Postup odberu vzoriek z krvi

Kde prejsť test na hepatitídu C? Zbierka biomateriálov pre ďalší výskum sa vykonáva v laboratóriu lekárskej inštitúcie alebo v domácnosti pacienta.

Krv z žily sa užíva nasledovne:

• Pomocou špeciálneho zväzku zabaleného okolo predlaktia pacienta je venózny krvný tok pozastavený. Vďaka takýmto manipuláciam sa žily naplnia krvou a budú viditeľné, čo výrazne uľahčuje proces vkladania ihly.
• Oblasť kože, kde sa ihla zavedie, sa starostlivo ošetrí alkoholom alebo kvapalinou obsahujúcou alkohol.
• Ihla sa starostlivo vloží do žily a potom sa k nej pripojí skúmavka špeciálne navrhnutá na zber krvi.
• ihneď po vpichnutí ihly do žily, sa z pacientovej ruky vytiahne stláčací krúžok.
• po zhromaždení potrebného objemu krvi na analýzu sa ihla postupne odstráni z žily.
• musí byť sterilná vaty alebo gázový tampón namočený v alkohole aplikovaný na miesto injekcie.
• aby sa zabránilo nástupu hematómu, tampón by mal byť stlačený s určitou námahou na oblasť vloženia ihly, ohýbať rameno na lakte a držať ho niekoľko minút. Takéto opatrenia tiež pomáhajú rýchlo zastaviť krv.

Vzhľadom na dobrú techniku ​​vnútornej správy je tento postup absolútne bezpečný a čitateľný nespôsobuje bolestivé pocity.

V zriedkavých prípadoch je po odobratí krvi možný opuch žíl. Tento jav sa nazýva "flebitída". Problém bude zmiernený kompresiou (nie horúcou), mala by sa aplikovať na opuchnuté oblasti pokožky niekoľkokrát denne.

Pri poruchách krvácania môžu existovať isté problémy. Užívanie aspirínu, warfarínu a iných liekov na zriedenie krvi môže vyvolať krvácanie. Preto pred vykonaním analýzy musíte odmietnuť užívanie akýchkoľvek liekov. Ak liečbu nemožno zrušiť, mali by ste o tom informovať špecialistu.

Podmienky a ceny

Koľko analýz sa robí pre hepatitídu C? Výsledky krvného testu na hepatitídu môžu byť pripravené za niekoľko hodín a za niekoľko dní (zvyčajne nie viac ako 8 dní). Trvanie prípravy výsledkov závisí od typu vírusu a zvolenej metódy analýzy. Výskum uskutočnený metódou PCR je rýchlejší. Výsledky v tomto prípade budú pripravené za pár hodín.

Koľko je analýza pre hepatitídu C? V závislosti na klinike a zložitosti štúdie sa cena procedúry môže pohybovať od 400 do 11 000 rubľov.

Treba poznamenať, že môže trvať niekoľko týždňov, kým sa vytvorí dostatočný objem protilátok proti HVC. Preto v počiatočnom štádiu vývoja patológie môže byť výsledok štúdie falošne negatívny.

Okrem toho je možné získať nepresné údaje, ak je analýza zle vykonaná a podmienky dopravy pre prijatý biomateriál sú porušené (vzorky by mali byť doručené do laboratória maximálne 2 hodiny po odbere krvi).

Ak je výsledok štúdie pozitívny, musíte okamžite konzultovať lekára o infekčnej chorobe. Špecialista vykoná ďalšie vyšetrenie a predpíše príslušnú liečbu.

Môže byť vyliečený z hepatitídy C bez vedľajších účinkov?

Dnes, moderné lieky a nové generácie sofosbuvir Daklatasvir s 97-100% pravdepodobnosťou navždy ťa uzdraví z hepatitídy C. Najnovším liek je k dispozícii v ruštine na oficiálnej predstaviteľ indického farmgiganta ZYDUS Heptiza. Objednaný tovar dodá kuriér do 4 dní, platba po prevzatí. Získajte bezplatnú konzultáciu o používaní moderných liekov, ako aj informácie o spôsoboch nákupu, ktoré môžete získať na oficiálnej webovej stránke dodávateľa Zydus v Rusku.

Kvalitatívna analýza hepatitídy C

Nechajte odpoveď

Kvalitatívna analýza polymerázovej reťazovej reakcie - PCR pre hepatitídu C určuje prítomnosť alebo neprítomnosť HCV v tele. V laboratóriu sa študuje štruktúra RNA, v ktorej sa nachádza vírus. Ak je detegovaný vírus C, je potrebné podstúpiť liečbu, pretože zanedbané pečeňové ochorenie má vážne dôsledky. Kvalitačná PCR sa vykoná po zotavení na potvrdenie neprítomnosti protilátok. Určené a pre preventívne vyšetrenie. Pri nízkej koncentrácii patogénu v krvi nedokáže PCR (kvalitatívna) nič zistiť, pretože diagnostický systém má svoje prahové hodnoty citlivosti. V prípade počiatočného štádia ochorenia alebo miernej formy je PCR nakoniec diagnostikovaná s ultrasenzitívnym zariadením.

Čo je RNA vírus?

Termín RNA vírusu hepatitídy C (alebo RNA vírusu hepatitídy C) sa nazýva samotné ochorenie pečene. Vírus C sa viaže na zdravú bunku tela, ktorá preniká do vnútra. V priebehu času sa šíri po celom tele, je to len dostať do krvi. Výsledkom je, že patogén preniká do pečene, spojí sa s bunkami a pracuje tvrdo. Hepatálne bunky (hepatocyty) pracujú pod vplyvom, podstupujú zmeny a z tohto zahynú. Čím dlhší je vírus C v pečeni, tým viac buniek zomrie. Postupom času sa rozvíjajú nebezpečné choroby vedúce k zhubnej degenerácii a smrti.

Infekcia pečene týmto typom vírusu sa nemôže v žiadnom prípade prejavovať zvonka. Po mnoho rokov alebo desiatky rokov sa infikovaná osoba cíti úplne zdravá a iba náhodná vyšetrenie najčastejšie odhaľuje patológiu. Pri darovaní krvi na hepatitídu sa skúma časť reťazca RNA (ribonukleovej kyseliny), ktorá je súčasťou ľudského génu (DNA). Výsledky laboratórneho výskumu by sa nemali používať na samošetrenie, pretože to je iba indikátor. Lekár určí presný obraz a ďalšiu diagnózu.

Po vykonaní: svedectvo o štúdii

Na potvrdenie HCV je priradená analýza PCR (polymerázová reťazová reakcia). PCR štúdie pomáhajú nájsť patogénny materiál v štruktúre RNA a predpísať účinnú liečbu. Určené v nasledujúcich prípadoch:

• identifikácia príznakov zápalu pečene;
• skríningové štúdie na prevenciu;
• vyšetrovanie osôb v kontakte;
• diagnostika hepatitídy zmiešaného pôvodu (definícia hlavného patogénu);
• Určenie úrovne aktivity reprodukcie vírusu v chronickej forme;
• cirhóza pečene;
• na určenie účinnosti predpísanej liečby.

PCR štúdie sú pridelené lekárom na stanovenie účinnosti priebehu liečby hepatitídy.

Existuje kvalitatívna aj kvantitatívna analýza PCR. Kvantitatívna PCR ukazuje percento RNA s nosičmi vírusu v krvi a kvalitatívna PCR indikuje prítomnosť alebo absenciu vírusu. Pozitívny ukazovateľ kvality (prítomnosť RNA hepatitídy C) tiež vyžaduje kvantitatívnu štúdiu. Vysoká koncentrácia patogénu hepatitídy C súvisí s rizikom prenosu, to znamená s kontamináciou ostatných. Nízke množstvá sú lepšie spracované. Množstvo RNA vírusov v krvi sa netýka intenzity ochorenia. Analýza PCR sa tiež robí v prípade terapie interferónom, aby sa predpísalo trvanie a zložitosť liečby.

Vlastnosti kvalitatívnej analýzy PCR pre hepatitídu C

Menovaný kvalitatívnej analýze s indexom polymerázovej reťazovej reakcie, všetci pacienti, ktorí mali protilátky v krvi, pre hepatitídu C, ktorý bol chorý a výške, by mali znovu sa test. Odporúča sa, aby sa testuje na hepatitídu B a potom, v prípade, že pozitívny záver, a hepatitídy D. tiež kvalitatívne analyzovaný reakatsiya by sa malo uskutočniť v spojení s inými krvných testov. Analýzy ukážu kompletný obraz šírenia vírusu.

Z výsledkov testov bude vidieť len pozitívny test na hepatitídu C alebo negatívnu, čiže prítomnosť alebo neprítomnosť vírusu. Ak je záver "zistený", potom je vírus aktívne a naďalej aktívne. Označenie "nenájdené" označuje neprítomnosť vírusu alebo jeho malé množstvo. S týmto indikátorom by sa malo brať do úvahy skutočnosť, že analytická citlivosť diagnostických systémov je iná a RNA hepatitída C môže byť stále v krvi, ale v analýze sa nezobrazuje.

Obzvlášť citlivá metóda PCR ultra-hepatitídy C sa odhaľuje dokonca aj v nepatrných množstvách. Používa sa hybridizačná fluorescenčná štúdia, ktorá je mnohonásobne vyššia ako štandardné systémy PCR. Metóda sa používa v niekoľkých prípadoch:

• podozrivé skryté formy hepatitídy C;
• Diagnóza PCR nebola potvrdená patogénom, ale existujú protilátky;
• v prípade obnovy;
• identifikovať skorý štádiu infekcie.

Späť na obsah

Vysvetlenie analýzy

Konečné rozhodnutie v diagnostike je ovplyvnené PCR dekódovaním HCV, najmä ultrametódou. Hlavnou nevýhodou tohto výskumu je prísne dodržiavanie sterilných podmienok pre vzorku a materiály. Malá odchýlka niekedy preukazuje nepresné závery analytika, komplikuje diagnostiku a následnú liečbu. Analýza PCR na stanovenie RNA vírusu hepatitídy nie vždy ukazuje obraz choroby s dôverou, niekedy aj neprijateľné sú nepresnosti.

Pri diagnostike vírusu hepatitídy sa odporúča vykonať komplexné vyšetrenie.

Norma ukazovateľov

Neprítomnosť protilátok JgM voči RNA vo vírusovej hepatitíde C sa považuje za normu pri analýze polymerázovej reťazovej reakcie. Súčasne zistenia sérologickej analýzy naznačujú prítomnosť protilátok proti vírusu C a to je tiež v medziach normy. Kvalitatívna definícia neukazuje intenzitu ochorenia, odhaľuje len pôvodcu hepatitídy C v RNA. Takáto analýza sa po liečbe opakuje, aby sa potvrdila skutočná regenerácia.

odchýlky

Ak sú prítomné protilátky JgM proti HCV RNA, znamená to, že došlo k vzniku infekcie. Choroba je akútna alebo chronická, prejavuje sa v rôznych štádiách. Ak dôjde k poklesu počtu protilátok, analýza ukáže dosiahnutie výsledkov liečby počas regenerácie. V diagnostike sú veľmi zriedkavé prípady falošne pozitívnych zistení. Nachádzajú sa u žien počas tehotenstva a u ľudí s inými infekčnými chorobami.

Čo je PCR analýza a vírusová záťaž?

Polymerázová reťazová reakcia (PCR) je laboratórna metóda na stanovenie DNA a RNA. Po prvýkrát to bolo testované takmer pred pol storočím americkou Cary Mullisovou. Tento hypersenzitívny test je schopný určiť nosič genómu z jednej zdrojovej molekuly obsiahnutej v krvi, slinách alebo pokožke.

Metóda PCR má veľké vyhliadky, nachádza sa nielen v medicíne, ale aj v genetickom inžinierstve av kriminalistike. Pomocou klonov a vytvorením nových typov DNA určite stupeň príbuzenstva. Na kus epitelu nájdený na mieste činu, zriadiť zločinu.

Analýza PCR pre hepatitídu - čo to je a prečo to robí?

Prečo je potrebná PCR analýza pre podozrenie na hepatitídu C, čo to je?

Vírus hepatitídy C - RNA obsahujúci vírus, má 6 genotypov a až 500 subtypov. Zo všetkých hepatitídy má tento vírus najvyššiu schopnosť mutácie a prekonáva ochrannú bariéru imunitného systému. Z celkového počtu prípadov hepatitídy spôsobil vírus C 70% chronických prípadov a 30% cirhózy a rakoviny pečene.

Podstata metódy: časť vyšetrovaného génu pomocou špeciálnych enzýmov a podmienok je nútená reprodukovať v skúmavke. PCR analýza umožňuje určiť kmeň vírusu, bez ktorého nie je možné vykonať účinnú liečbu: každý genotyp je inak citlivý na antivírusové lieky. Existujú dva typy PCR:

Antivírusová terapia potrebuje konštantné monitorovanie, aby sa liečba napravila včas, pre tieto účely sa tiež používa polymerázová reťazová reakcia.

Kvalitatívna a kvantitatívna PCR

PCR kvalitatívne na hepatitíde C dáva odpoveď: existuje kmeň vírusu C v pacientovej krvi a ktorý z nich. Genotypizácia je nevyhnutná na objasnenie diagnózy, prognózy ochorenia a určenie načasovania liečby.

Podľa prijatej klasifikácie je gén označený číslom a podtyp je označený malým latinským písmom.

Špeciálna droga založená na prírodných látkach

Cena drogy

Spätná väzba na liečbu

Prvé výsledky sa prejavujú po týždni užívania

Viac o príprave

Len jedenkrát denne, 3 kvapky každý

Návod na použitie

Dekódovanie tabuľky genotypov vírusu C:

• Genotyp la, lb, lc
• Genotyp 2a, 2b, 2c, 2d
• Genotyp 3a, 3b, 3c, 3d, 3e, 3f
• Genotyp 4a, 4b, 4c, 4d, 4e, 4f, 4g, 4h, 4i, 4j
• Genotyp 5 a
• Genotyp 6 a

Najbežnejšie genotypy sú 1,2,3. V Rusku sa kmeňov 1a, 1b, 2 a 3 vírusu C.

Genotyp 1b ťažšie iné liečiteľné vo výške 90% sa stáva chronickou, z ktorých 30% je premenený rakovinou alebo cirhózou.

Genotypy 2a a 3a majú stupeň chronizácie 33-50%, sú citlivejšie na antivírusovú liečbu.

Pri potvrdení prítomnosti vírusu sa kvantifikuje PCR pre hepatitídu C, ktorá vypočítava počet molekúl RNA v laboratórnej vzorke pacienta.

Vysvetlenie analýzy

Kvalitatívna PCR analýza má dve odpovede:

PCR negatívne znamená, že patogén v krvných vzorkách nie je detegovaný.
pozitívne odpoveď naznačuje opak: RNA jedného alebo iného genotypu vírusu S.

Pravdepodobnosť spoľahlivosti výsledku je 95%. Zvyšných 5% je chybou v dôsledku chyby osoby. Táto možnosť je povolená kvôli vysokým požiadavkám na realizáciu výskumu:

• pravidlá skladovania činidiel;
• príslušná kvalifikácia zdravotníckeho personálu;
• čistota biomateriálu.

Súprava PCR samotná má 100% diagnostickú presnosť.

Kvantitatívna PCR RNA hepatitídy C vám umožňuje určiť vírusovú záťaž v tele pacienta. Používanie:

• určuje sa štádium choroby (akútna, chronická);
• je stanovená účinnosť antivírusovej liečby;
• potreba biopsie pečene je objasnená.

V niektorých prípadoch pacient necíti žiadne známky ochorenia, zatiaľ čo metóda PCR ukazuje infekciu HCV. To znamená, že ochorenie je v počiatočnom štádiu vývoja alebo v chronickej forme. Na objasnenie diagnózy je potrebný ďalší výskum, aby sa antivírusová liečba začala čo najskôr.

Vírusová záťaž pri hepatitíde C

Vírusové zaťaženie ukazuje aktivitu vírusu pečene, ako aktívne dochádza k jeho reprodukcii.

Čo to je?

Kvantitatívne PCR hepatitídy C je meraná v medzinárodných jednotkách na 1 ml alebo IU / ml, čo ukazuje, koľko študoval v 1 ml krvi detekovaná RNA kópií určitého vírusu kmeňa S.

Čo sa považuje za vysoké, čo nízke?

Analýza vírusovej záťaže umožňuje určiť prítomnosť vírusovej RNA v koncentrácii 50 IU / ml. Vírusová záťaž je normálna - to je prípad, keď pomocou PCR nie je detegovaná žiadna molekula HCV RNA.

Vírusová záťažová tabuľka:

• nízka koncentrácia od 600 IU / ml 3 x 104 IU / ml;
• priemerná koncentrácia od 3 * 104 IU / ml do 8 * 105Mm;
• Vysoká - hladina vyššia ako 8 * 105 IU / ml.

Nízka vírusová záťaž - to je signál, že terapeutická liečba je správne zvolená a prognóza na liečbu hepatitídy C je priaznivá.

Vysoká koncentrácia vírusových buniek že ochorenie je v akútnej fáze. Krv pacienta je nebezpečným zdrojom infekcie.

Vírusové ukazovatele zaťaženia, ktoré sú na priemernej úrovni, vyznačujúci sa chronickom štádiu pitnej vody, alebo môžu byť dve trendy vývoja: jeho zvýšenie, alebo zníženie.

Na konci sa uskutoční kontrolná PCR v 6 mesiacoch.

Náklady na diagnostiku PCR

Nasledujúce príznaky by mali byť dôvodom na obavy:

• všeobecná slabosť;
• zmena farby kože, očná skleróza, výtok;
• nevoľnosť;
• znížená chuť do jedla;
• bolesť svalov a kĺbov;
• ťažkosť v správnom hypochondriu;
• zvýšené hladiny AST a ALT v krvi.

Pri kontakte s infikovanými pacientmi sa počas predoperačného obdobia odporúča aj hemodialýza na vyšetrenie.

Verejné klinické pracoviská vykonávajú krvný test na PCR bez poplatku, ak sa k nemu hlási odborník na infekčnú chorobu alebo hepatológ.

Platené služby pre diagnostiku PCR sa poskytujú vo všetkých hlavných ruských mestách. Náklady závisia od typu testu, dostupného vybavenia, načasovania a ďalších faktorov.

Kvalitatívne analýzy PCR v Moskve a Petrohrade budú stáť od 600 do 900 rubľov. V regiónoch - od 300 do 800 rubľov.

Definícia vírusovej záťaže hepatitídy C bude stáť 17 000 až 22 000 rubľov. Pri iných typoch infekcií je cena kvantitatívnej štúdie 1200 až 100 000 rubov.

Výhody a nevýhody metódy PCR

Aké sú výhody metódy polymerázovej reťazovej reakcie v porovnaní s inými diagnostickými metódami?

1. Široká škála aplikácií. Pomocou PCR pomocou štandardného zariadenia môžete identifikovať akýkoľvek vírus.
2. Presnosť detekcie patogénov. Použitím rôznych kombinácií enzýmov a analytických techník sa dosiahne 100% špecifikácia štúdie pre indikovanú infekciu.
3. Vysoká citlivosť. Táto technika umožňuje detegovať prítomnosť jednej molekuly vírusu v krvi.
4. efektívnosť. Kvalitatívna analýza je pripravená za niekoľko hodín, kvantitatívne - po dvoch dňoch.
5. Diagnóza vírusu v inkubačnej dobe. Pri PCR nie je patogén určený prítomnosťou protilátok, keď už existuje imunitná odpoveď tela, ale pred začiatkom patologického procesu, čo uľahčuje liečbu.

Nevýhody PCR sú dôsledkom jej výhod:

• Čistota testu vyžaduje najvyšší stupeň čistoty, vrátane vzduchu v laboratóriu, aby sa do vzorky nedostala "cudzia" DNA;
• vysokými požiadavkami na zamestnancov, uskutočňovanie odberu vzoriek a analýzu biomateriálu.

Analýza PCR pre hepatitídu

PCR na hepatitídu C

1. RNA hepatitídy C ( "PCR-kvalita") - detekcia v analýze krvi je dôkazom akútnej alebo chronickej hepatitídy C sa určí z v 2. týždni infekcie, sa pred anti-HCV, čo umožňuje diagnostikovať ochorenie v skorých štádiách. Stanovenie RNA sa vykonáva u pacientov s klinickou akútnou hepatitídou B a u pacientov s pozitívnym testom na hepatitídu.
2. RNA hepatitídy C ("Kvantitatívny PCR") - vírusová záťaž - jeden z ukazovateľov účinnosti antivírusovej liečby a jej vyhodnocovania (zmenou úrovne z počiatočnej hodnoty). Kvantitatívna charakterizácia obsahu RNA hepatitídy C je dôležitá pre hodnotenie účinnosti antivírusovej liečby a má prognostický význam pre stanovenie chronickej chronickej choroby. Pacienti s vysokým vírusovým zaťažením (vysoké množstvo RNA) pred liečbou reagujú na liečbu horšie.
3. RNA hepatitídy C (genotypy 1, 2, 3) - Druh liečby závisí od typu a jeho účinnosti. Ochorenie spôsobené vírusom genotypu 1 je najnepriaznivejšie z hľadiska prognózy účinnosti liečby. Podľa súčasných odporúčaní by sa krvný test pre genotypizáciu hepatitídy C mal vykonať pred začiatkom antivírusovej liečby.
4. RNA hepatitídy C (rozšírené genotypizácia la, 1b, 2, 3a, 4, 5, 6) - na území Ruska cirkulujú podtypy 1a, 1b, 2a, 2c, 2k, 3a. Hepatitída C, spôsobená vírusom genotypov 1 a 4, je z hľadiska prognózy najnepriaznivejšia.
5. Ultrasenzitívna PCR pre hepatitídu C (kvalitatívna metóda) - Analýza sa používa k diagnostike ochorení v skorých štádiách infekcie, je optimálny pre testovanie krvi a vyhodnotenie reakcie na antivírusovej liečby. Táto štúdia aj v prípade, nezistených protilátky proti hepatitíde typu C, sa odporúča vykonávať pacientov s ochorením pečene nešpecifikovaných dôvodov, c získanej imunitnej nedostatočnosti, alebo prijímanie imunosupresívnej liečbe.
6. Ultrasenzitívna PCR pre hepatitídu C (kvantitatívna metóda) - jedinečná analýza s vysokou citlivosťou (10 IU / ml) na stanovenie RNA vírusu hepatitídy C v kvantitatívnom vyjadrení. Štúdia sa používa na monitorovanie účinnosti liečby.

PCR O HEPATITIE B

1. DNA hepatitídy B (kvalitatívna analýza) - index reprodukcie vírusu hepatitídy B. Najskôr sa objaví v krvi, v priemere 1 mesiac po infekcii. V niektorých prípadoch je to jediný marker latentnej infekcie HBV. Určenie DNA vírusu umožňuje diagnostikovať hepatitídu B spôsobenú mutantnými kmeňmi, v ktorých nie sú detegované iné markery infekcie.
2. DNA hepatitídy B (kvantitatívna analýza) - Koncentrácia DNA (vírusová záťaž) je jedným z testov používaných na určenie štádia chronickej hepatitídy B a účinnosti antivírusovej liečby. Analýza sa uskutočňuje pred a počas liečby.
3. Genotypizácia hepatitídy B - choroby spôsobené rôznymi genotypmi vírusu sa môžu líšiť v klinickom priebehu a výsledku. Hepatitída B, spôsobená vírusom genotypu C, často trpí chronickým priebehom a má vysoké riziko transformácie na cirhózu pečene alebo hepatocelulárny karcinóm. Pacienti infikovaní vírusom genotypu A lepšie reagujú na liečbu.
4. Ultrasenzitívna DNA-PCR pre hepatitídu B (kvalitatívna metóda) - odovzdá ich za skoré zistenie choroby. Veľmi informatívny pri štúdiu darcovskej krvi. Môže sa použiť na potvrdenie spontánneho alebo liečenia vyvolaného odstránenia vírusu z ľudského tela.
5. Ultrasenzitívna PCR pre hepatitídu C (kvantitatívna metóda) - diagnostiku DNA vírusu hepatitídy B v kvantitatívnych termínoch. Analýza sa uskutočňuje s cieľom vyhodnotiť účinnosť liečby.
6. Stanovenie mutácií rezistencie na antivírusové lieky lamivudín, telbivudín, entekavir, adefovir, tenofovir (spolu s analýzou "kvantitatívnej DNA hepatitídy B"). Aby bolo možné vykonať analýzu, je potrebné pre pacientov s chronickou hepatitídou B pred začiatkom antivírusovej liečby a počas podávania liekov. Výsledok obsahuje informácie o dostupnosti rezistencie vírusu hepatitídy B na antivirotiká:
   • R - vírus je rezistentný na antivírusovú liečbu (boli zistené mutácie rezistencie voči tomuto lieku);
   • S - vírus hepatitídy B je citlivý na liek (norálna hodnota, nenachádzajú sa mutácie rezistencie);
   • I - pôvodca infekcie môže spôsobiť rezistenciu voči tomuto lieku.