PCR s hepatitídou C

Share Tweet Pin it

Zanechajte komentár 15.344

Hepatitída C je jednou z najnebezpečnejších a ťažko diagnostikovaných vírusových ochorení. Na určenie ochorenia sa používa metóda PCR na hepatitíde C. Ide o novú techniku ​​high-tech, ktorá umožňuje preskúmať genetický materiál pre existenciu života v najmenších časticiach (molekulách) a v najmenších množstvách. Vírus hepatitídy je veľmi rezistentný, je schopný dlhodobo žiť v prostredí a perfektne vyhovuje ľudskému telu.

Čo je PCR?

Dnes je veľa rôznych chorôb. A nie menej metód na ich určenie. Keďže agenti infekcie sa naučili ľahko zvyknúť na životné prostredie a vyvíjať sa, najnovšie technológie sa používajú na diagnostiku. Polymerázová reťazová reakcia (PCR) je rýchlejšia a presnejšia metóda, ktorá je zameraná na nájdenie pôvodcu ochorenia, a to podstatným zvýšením podielu DNA vírusu hepatitídy vo vzorke. Často sa píše o: hľadaní ihly v seno a potom stavaním stohu ihiel.

Typy metódy PCR

Zvýraznite kvalitatívnu a kvantitatívnu analýzu hepatitídy. Ak chcete zistiť, či je vírus v tele, a tí, ktorí našli protilátky proti hepatitíde C, vykonajte kvalitatívne testovanie. Analýza analýzy prináša výsledok: "pozitívne"; "Negatívne". Negatívny význam znamená: buď osoba je zdravá, alebo agenti v krvi nestačia a nemôžu byť nájdení. Preto stojí za to vykonať druhú štúdiu po chvíli.

Pozitívny výsledok naznačuje existenciu infekcie. Je to takmer vždy presná hodnota. Chybné výsledky zvyčajne závisia od ľudského faktora (nesprávne uloženie alebo nedodržanie pravidiel postupu). Pri norme je výsledok negatívny. Pred testom neexistujú žiadne špeciálne pravidlá, stačí krv z žily.

Ak sa zistí, vykonajte kvantitatívnu analýzu (vírusové zaťaženie) - poskytuje číselné hodnoty: koľko RNA vírusu hepatitídy je v súčasnosti v predpísanom objeme testovaného materiálu. Pri aktívnom vývoji infekcie sa môže na infikovanej osobe nájsť 1-2 týždne. Krv sa tiež zvyčajne vyšetruje, pretože látky v nej cirkulujú voľne.

Vlastnosti kvantitatívnej analýzy PCR

Rozdiel v kvantitatívnej analýze je, že nie všetci prejdú. Kvalitatívne - určuje prítomnosť a kvantitatívne - pomáha pri potvrdení záveru "vírus hepatitídy", prognózy priebehu ochorenia a stanovenie priebehu liečby. Ako účinná je terapia, pozrite sa na počet RNA pred a počas liečby. Tiež sa používa na stanovenie dávky liekov.

svedectvo

Spravidla sa vyrába pred začiatkom oživenia. Hlavné indikácie môžu byť:

  • definícia vírusovej záťaže a kontrola antivírusovej liečby;
  • kvalitatívna PCR našla protilátky proti hepatitíde C;
  • zistenie akútnej a chronickej hepatitídy C;
  • existencia zmiešanej hepatitídy;
  • pri plánovaní liečby;
  • ak kvalitatívna štúdia stále zistí prítomnosť ochorenia po dvanástom týždni liečby.

Pozrite tiež, aký druh vírusovej záťaže pre hepatitídu: nízka terapia je úspešná; zvýšené - liečba nie je efektívna a je potrebné ju zmeniť.

Čo sa deje v rôznych štádiách ochorenia?

V rôznych fázach ochorenia sa štúdia uskutočňuje s cieľom preskúmať prínosy liečby a plánovať trvanie jej ďalšej implementácie. S dobrou odpoveďou na terapiu sa skracuje. V opačnom prípade, s pomalým vysadením vírusu, sa priebeh liečby predlžuje. PCR na hepatitídu sa uskutočňuje v čase 1,4, 12, 24 týždňov liečby. Keď ukazovatele neklesnú po 12 týždňoch, dospeli k záveru, že terapia nie je vhodná pre tento organizmus. Táto analýza sa používa na stanovenie toho, ako je infekcia aktívna a ako je pravdepodobné jej prenos. Napríklad v tehotenstve existuje riziko infikovania dieťaťa. Po liečbe sa zistí riziko recidívy.

odpis

Po skončení štúdie sa analýza môže dešifrovať nie v počtoch, ale slovami: "pod meracím rozsahom" a "nezisteným". Kvantitatívna PCR je citlivejšia na kvalitu. Záver "nenájdený" môže povedať, že infekcia sa nenašla. "Pod meracím rozsahom" - test nebol detegovaný vírusom, ale je to v malom množstve. V tejto situácii vykonajte druhú štúdiu.

Vírusová záťaž - stanovenie počtu infekčných RNA v stanovenom objeme krvi (kvantitatívne 1 ml = 1 kubický centimeter). Je formulovaná v medzinárodných meraniach ME / ml. Jednotlivé laboratóriá označujú kópie / ml. Dešifrovať preklad komponentov do medzinárodných hodnôt, rôzne testovacie systémy môžu vlastným spôsobom. Tabuľka 1. Dekódovanie kvantitatívnej analýzy vírusu RNA

Norma kvantitatívnej analýzy hepatitídy C

Keď je človek zdravý, norma je - "nenájdená". Postihnutá ľudia norma zníži dávkovanie výsledkov vírusu v logaritmickej jednotky, čo sa prejavuje zníženie počtu núl v analýze podľa jednej (napr, 1 * 106 IU / ml až 1 x 105 IU / ml). Rámec koncentračného rozsahu vírusu, ktorý určuje termocyklus, je v rozmedzí 1,8 x 102 - 2,4 x 107 IU / ml. Výklad výsledku:

  • nízka koncentrácia - od 600 IU / ml do 3 x 104 IU / ml;
  • priemer - od 3 x 104 IU / ml do 8 x 105 IU / ml;
  • Vysoko nad 8 x 105 IU / ml.
Späť na obsah

odchýlky

Ak sa výsledky analýz zmenia mimo normu, môže to znamenať návrat choroby a reprodukciu vírusu. Niektoré faktory môžu mať vplyv na získanie nespoľahlivého výsledku, napríklad kontaminácie vzoriek; prítomnosť heparínu v krvi a látky, ktoré spomaľujú pôsobenie zložiek PCR; laboratórne chyby; nesúlad s testom.

Aj výsledok v niekoľkých laboratóriách sa môže líšiť, možno tam bola iná metodológia výskumu. Ak chcete vedieť, do akej miery je pečeň ovplyvnená a nebezpečenstvo ochorenia, nestačí kvantifikovať hepatitídu PCR. Okrem toho sa vykonávajú biochemické postupy a biopsia.

Pri plánovaní liečby je vírus genotypizovaný. Vzhľadom na to, že hepatitída C je schopná zmeniť, existuje niekoľko skupín. Pre rôzne typy liečby sa môžu líšiť. Existujú situácie, keď existuje niekoľko druhov, ale analýza zistí, že jedna prevláda. Potom sa test opäť skončí.

Výhody metódy

Technika PCR umožňuje vyjadriť názor a predpísať správnu liečbu. Výhody metodológie:

  • Rýchlosť výsledkov nevyžaduje rozlíšenie a kultiváciu druhov patogénu. Automatizácia procesu vám umožňuje spracovať a študovať materiál s výsledkom za 4-5 hodín.
  • Priama súvislosť s určením patogénu - nájdenie špeciálnej časti DNA priamo naznačuje prítomnosť tejto choroby. Napríklad ELISA - nájde proteínové markery (produkty života baktérií), ktoré neposkytujú presné potvrdenie prítomnosti ochorenia.
  • Špecifickosť - skúma sa látka, ktorá je špecifická pre konkrétny patogén, čo vylučuje reakciu na falošné kopreaktívne látky.
  • Citlivosť - môže detekovať najmenší počet vírusov.
  • Univerzálnosť - je založená na nájdení fragmentov DNA alebo RNA špecifických organizmov. To umožňuje vykonať diagnostiku pre všetky látky z jedného biomateriálu, ak iné metódy sú bezmocné.
  • Odhaľuje nielen zjavné, ale aj skryté infekcie - je účinná pri štúdiu činiteľov ťažko kultivovaných, nie kultivovaných, pretrvávajúcich.
  • https://www.youtube.com/watch?v=lBi-d6jAKxQ

Prostredníctvom tohto výskumu môže byť každej osobe diagnostikovaná diagnóza absencie ochorenia. Ale kvôli spoľahlivým skutočnostiam musíte postupovať podľa pokynov. PCR sa používa v rôznych oblastiach: forenznú, otcovstva, pre diagnostiku rôznych vírusov, detekcia alergie na lieky, klonovanie génu, mutagenéza, sekvenovania DNA.

Markery hepatitídy C a interpretácia výsledkov kvantitatívnej analýzy HCV RNA

Nedávno sa vo vyhľadávačoch internetových zdrojov objavuje otázka "kvantitatívna analýza hepatitídy s dekódovaním".

V skutočnosti je vírus hepatitídy bežný a nebezpečný, choroba postihuje pečeň. Jeho meno pochádza z lat. hepatitída - zápal pečene. Infekcia sa prejavuje krvou alebo sexuálnym kontaktom, u dospelých je pravdepodobnejšie, že sa zhoršia vo veku od 25 do 50 rokov.

Existuje niekoľko typov tejto choroby. Hepatitída C nemá výrazný výraz, ale v 40-70% prípadov prechádza do chronickej formy, môže spôsobiť cirhózu pečene a rakovinu. Táto choroba si vyžaduje presnú diagnózu a interpretáciu získaných údajov, pre ktoré sú metódy vyvinuté. Jednou je RNA analýza HCV RNA pomocou PCR.

RNA analýza HCV RNA pomocou PCR

RNA (ribonukleová kyselina) je druh makromolekuly, ktorá je jednou zo zložiek živých buniek. RNA je zodpovedná za kódovanie genetických informácií. Vírus hepatitídy C obsahuje molekulu RNA a je vo zvyku mutovať. Existuje šesť jeho podtypov, rovnako ako mnoho podtypov.

Choroba v chronickom štádiu vedie k fibróze pečene - rastú sa pojivové tkanivá, štruktúra orgánu sa postupne rozpadá. Fibróza je vhodná na včasnú liečbu, pretože pečeň ešte nepodrobila ničivým procesom. Na rozdiel od cirhózy, závažné ireverzibilné ochorenie pečene, pri ktorom sa fibróza môže vyvinúť bez toho, aby sa včas prijali potrebné opatrenia.

Osoba s podozrením na vírus hepatitídy určuje protilátky proti nemu. Ak nie sú prítomné - choroba je vylúčená, v ich prítomnosti sa uchýli k metóde PTSR (reťazová reakcia polimeraznoj). V molekulárnej biológii je experimentálna, ale zaujíma popredné miesto medzi metódami diagnostiky infekčných chorôb. Pomocou toho môže významne zvýšiť koncentráciu fragmentov molekúl vo vzorke. 10 dní po infekcii je už v krvi možné detegovať RNA.

Táto metóda je jediná, ktorá umožňuje identifikáciu ochorenia v počiatočných štádiách. Inými spôsobmi (napr. Biochemickým krvným testom) to nemožno urobiť, pretože pečeň ešte nie je ovplyvnená.

Metóda bola objavená v roku 1993 biochemikou Carrie Mullisovou, za ktorú získal Nobelovu cenu. PCR bol prelom v medicíne a vede, pretože umožnil rýchlu a presnú identifikáciu infekcií v krvi a iných biologických materiáloch človeka. Inými slovami, metóda urýchlila vývoj diagnózy infekčných ochorení.

RNA analýza HCV RNA pomocou PCR je účinná z nasledujúcich dôvodov:

  • Má dobrú citlivosť - je zistené aj malé množstvo vírusu v krvi;
  • určuje samotný vírus a nie jeho vedľajšie produkty;
  • určuje sa typ patogénu.

Rozdiely v kvantitatívnej analýze HCV RNA z kvalitatívneho

Metóda PCR zahŕňa dve základné metódy štúdia biologického materiálu na vyhľadávanie vírusu hepatitídy C:

Tieto štúdie majú rôzne úlohy.

Kvalitatívna analýza hepatitídy s dekódovaním potvrdzuje prítomnosť vírusu po tom, ako boli protilátky proti tejto chorobe už zistené v krvi. Ak štúdia priniesla pozitívny výsledok, choroba sa našla. Inými slovami, osoba je infikovaná. Ak sa získa negatívny výsledok, znamená to, že osoba nie je infikovaná alebo je vírus príliš malý. Táto koncentrácia nie je týmto spôsobom detegovaná.

Okrem toho je klinický obraz choroby založený na značkách hepatitídy C a interpretácii analýzy. Hlavnými markermi sú imunoglobulíny (protilátky) M a G. Ich prítomnosť v krvi pacienta naznačuje nezvyčajný proces zdravého organizmu. Na základe prítomnosti týchto protilátok je pacient diagnostikovaný zvyčajne s primárnou diagnózou.

Kvantitatívna analýza je predpísaná pre počiatočnú detekciu protilátok a v prípade potreby pre liečbu.

Tiež je kvantitatívna analýza hepatitídy C predpísaná na detekciu zmiešanej hepatitídy (infekcia niekoľkými vírusmi).

Kvantitatívna analýza s dekódovaním sa vykonáva s účelom:

  • objasnenie konečnej diagnózy;
  • zladenie prognóz týkajúcich sa priebehu ochorenia a jeho liečby - predĺženie, zníženie liečby alebo zmena taktiky;
  • sledovanie liečby.

Aby ste zaistili, že výsledky sú správne, musíte dodržiavať predpísanú dávku predtým, ako darujete krv:

  • prišiel do laboratória na prázdny žalúdok, poslednýkrát si môžete vziať jedlo 8 hodín pred procedúrou;
  • dva dni pred štúdiom je zakázané používať alkohol, mastné a vyprážané potraviny;
  • ultrazvuk, masáž, fyzioterapia predtým, ako sa štúdia nemôže uskutočniť;
  • za deň je príjem liekov zakázaný, ak nie je možné zrušiť príjem jednotlivých liekov, je to hlásené pred odberom krvi;
  • pred postupom sa odporúča čo najviac znížiť fyzické a nervové zaťaženie.

Splnenie týchto požiadaviek bude kľúčom k získaniu správnych výsledkov kvantitatívnej analýzy hepatitídy C.

Dekódovanie kvantitatívnej analýzy

Po obdržaní indikátorov kvantitatívnej analýzy je potrebné dešifrovať výsledky testov na hepatitídu C. Výsledky sa vypočítajú v jednotkách ME / ml a v kópiách na ml. Na získanie výsledkov opísaných v kópii sa používa niekoľko metód.

  • Monitor HCV (konverzný faktor na ME - 2,7);
  • LCX HCV RNA (konverzný faktor pre ME je 3,8).

Tabuľka. Dekódovanie kvantitatívnej analýzy HCV RNA pomocou PCR.

Medinfo.club

Portál o pečeni

Kvantitatívna analýza HCV a jeho interpretácia

Hepatitída C je choroba, ktorá sa môže reprodukovať v zdravých pečeňových bunkách a vyvolávať proliferatívne ochorenia. V dnešnom svete, kedy vírus hepatitídy B bola špecifická mutácia, ľudský imunitný systém stojí v ohrození, pretože v porovnaní s infekciou, to je zanedbateľné. Je tiež potrebné poznamenať, že nie všetci pacienti budú mať prvé príznaky ochorenia, najmä v počiatočných štádiách.

RNA analýza vírusu hepatitídy C - kvantitatívne štúdie, je rýchlosť, ktorá je prítomnosť mierneho množstvo vírusu v krvných buniek pacienta. Podľa štatistík je približne 31% pacientov úplne vyliečených z tohto ochorenia, ak je v počiatočnom štádiu.

V lekárskej praxi, lekári hovoria, že 4 milióny infikovaných symptómy a prvé príznaky neobjavujú, hoci vyspelé formy hepatitídy môže viesť k cirhóze alebo rakovine.

V súčasnej dobe sa v priebehu konania "transfúzia krvi", táto krv je testovaná na prítomnosť vírusu hepatitídy C, ako je choroba prenáša krvný transfúziou.

K dnešnému dňu svet už vyvinul drogy z hepatitídy C s účinnosťou približne 100%. Moderný farmaceutický priemysel vytvoril lieky, ktoré prakticky nemajú žiadne vedľajšie účinky. Mnohí pacienti dostanú prvé výsledky vo forme zmiernenia symptómov a zníženia vírusovej záťaže po týždni užívania. Prečítajte si viac o prípravkoch z hepatitídy z indickej výroby v našom samostatnom článku.

Na trhu spoločností na prepravu indickej medicíny na hepatitídu C "Sofosbuvir Express" sa osvedčila. Táto spoločnosť úspešne pomáha ľuďom zotaviť sa z ochorenia viac ako 2 roky. Komentáre a videá spokojných pacientov tu nájdete. Patria k viac ako 4 000 ľuďom, ktorí sa zotavili kvôli kúpeným drogám. Nezdržujte svoje zdravie v dlhom okne, prejdite na www.sofosbuvir-express.com alebo zavolajte na číslo 8-800-200-59-21

Typy štúdií PCR

PCR (polymerázová reťazová reakcia) je najmodernejšou a najužitočnejšou metódou na štúdium génu vírusu a jeho schopností. Takáto diagnostika môže vyvolať rôzne choroby a určiť ich ďalšiu mutáciu v tele pacienta.

Analýza sa uskutočňuje odobratím krvi, ktorá sa potom umiestni do špeciálnych činidiel, v ktorých dochádza k klonovaniu buniek.

Dve bunky sa vyrábajú z jednej bunky a tak ďalej. V dôsledku toho sa objavujú stovky DNA, vďaka čomu je možné diagnostikovať patogén a identifikovať vírus v počiatočnom štádiu.

Preto je PCR rozdelená do niekoľkých typov:

  • kvalitatívna analýza - rozpoznáva gény infekcie v krvi. Ak je pacient potvrdený pre kvalitatívnu analýzu, mala by sa urobiť kvantitatívna analýza na stanovenie stupňa infekcie. V dôsledku tejto diagnostiky odborníci píšu "zistené / nezistené". "Zistené" - naznačuje, že ochorenie je prítomné v tele a jeho RNA je už zistená. "Nezistené" naznačuje, že vo vzorke nie je žiadny vírusový gén, to znamená, že neexistuje hepatitída RNA. Lekári však odporúčajú vykonať druhú štúdiu po 10 dňoch.
  • kvantitatívna analýza - určuje množstvo genetického materiálu infekcie v krvi. Takáto diagnostika pomáha určiť závažnosť ochorenia a celú klinickú históriu. V dôsledku takejto analýzy je možné napísať len "Pozitívny / Negatívny / Neplatný". "Pozitívny" - zobrazuje infekčnú záťaž. Lekár spôsob diagnózy, určuje ochorenia na stanovenie účinnosti liečby na 4, 12, 16 a 24 týždňov bolezni.Esli vírusové zložky sa pohybuje v rozmedzí 8h10t IU / ml, je liečba účinná, ak vyššie uvedených parametrov - nie. "Negatívny" - gén infekcie sa nenašiel. "Neplatný" - to sa stane, keď je gén nájdený vírus v kvalitatívne, ale ktoré nie sú uvedené v kvantitatívnej analýze. Podobné je, ak je infekcia pod úrovňou.

Rozdiely v kvalitatívnych a kvantitatívnych analýzach

Vírus hepatitídy C - je diagnostikovaná predovšetkým kvantitatívne analýzou, dekódovanie je nevyhnutné pre správnu interpretáciu ochorenia. Ale cez to, že kvalitatívne a kvantitatívne metóda diagnostiky majú svoje odlišnosti, ako je úloha a úloh k výskumu - kvalitatívne - potvrdí prítomnosť infekcie po objavení vírusu protilátok a kvantitatívne - sekundárne spôsob vyvrátiť alebo potvrdenie ochorenia, aby správne a iba diagnózu,

Vysvetlenie kvantitatívneho výskumu

Po diagnostikovaní môžu výsledky interpretovať len lekári, pretože by to malo byť nie v číslach, ale v slovách. Podľa štatistiky je kvantitatívna PCR najcitlivejšou analýzou. Za účelom zistenia, či je prítomná v tele vírus, je nutné pochopiť a vedieť, že kvantitatívna analýza pre hepatitídu C, je dešifrovanie pomocou digitálneho značenia (štandard) infekcie:

Analýza anti-HCV, PCR kvantitatívnej, PCR kvalitatívnej

Interpretácia výsledkov testov je len pre lekára. Informácie v tomto článku sú uvedené na účely zoznámenia a nemôžu byť použité na sebapošetrenie a samodiagnostiku. Presnú diagnózu by mal urobiť váš lekár (hepatológ, infekčné choroby atď.).

Analýza anti-HCV (protilátky proti vírusom hepatitídy C).

Ukazuje prítomnosť protilátok (trieda M alebo G) na vírus hepatitídy C. Protilátky triedy M sú produkované v tele štyri týždne po infekcii vírusom hepatitídy C.

Protilátky Anti-HCV nie je samotný vírus. Protilátky sú súčasťou imunitného systému, ktorý začne produkovať na boj proti vírusu, akonáhle detekuje vírus v tele. Protilátky vo väčšine zostávajú na celý život bez ohľadu na to, či osoba užívala antivírusovú terapiu alebo nie, a budú VŽDY pozitívne! Takže systém imunitnej ochrany u ľudí je usporiadaný.

Aby sa zistila prítomnosť / neprítomnosť samotného vírusu hepatitídy C (HCV), je potrebné vziať do úvahy:
Analýza hepatitídy C (RNA hepatitídy C, HCV RNA) je kvalitatívna štúdia.

Analýza HCV RNA (stanovenie HCV RNA v krvi), často označované jednoducho ako PCR analýzy hepatitídy C je štúdium krvi, ktorý umožňuje identifikáciu genetického materiálu priamo na vírus hepatitídy B (každý vírus - RNA je jedna častica). Tento test sa najčastejšie uskutočňuje metódou PCR, a preto sa uvádza názov PCR hepatitídy C.

Kvalitatívne stanovenie RNA vírusu hepatitídy C pomocou PCR, HCV, RNA (PCR v reálnom čase).

Určenie RNA vírusu hepatitídy C v sére polymerázovou reťazovou reakciou (PCR) s detekciou v reálnom čase. Ukazuje, či je alebo nie je v krvi vírus hepatitídy C.

Príklad interpretácie výsledku: "Nezistené / Negatívne".

Kvantitatívne stanovenie RNA vírusu hepatitídy C pomocou PCR (kvantitatívna PCR, vírusová záťaž).

Určenie RNA vírusu hepatitídy C v sére polymerázovou reťazovou reakciou (PCR) s detekciou v reálnom čase. Určenie vírusovej záťaže (množstvo vírusu v krvi) v IU / Ml a kópiách / Ml. Ukáže, či je alebo nie je v krvi vírus hepatitídy C, a ak existuje, jeho množstvo.

Príklad interpretácie výsledku:

  • "Nezistené / negatívne": nezistil sa žiadna RNA vírusu hepatitídy C. Výsledok sa interpretuje ako "neidentifikovaná RNA vírusu hepatitídy C", "hepatitída C v krvi NO";
  • 10 ^ 8 IU / ml: výsledok je pozitívny s koncentráciou RNA vírusu hepatitídy C vyššou ako 10 ^ 8 IU / ml.

Výsledkom priechodu antivírusovej terapie sofosbuvir + daklatasvirom (ledipasvirom, velpatasvirom) PCR by mal byť nastavený na "nie je detekovaná alebo negatívne."

Dodávanie liekov na liečbu hepatitídy C z Indie a Egypta:

Kvantitatívna analýza PCR pre hepatitídu C

Existuje mnoho subtypov HCV, preto nie je vždy možné vybrať účinné antivírusové lieky a dosiahnuť požadované výsledky liečby. Rozmanitosť patogénov je spôsobená ich schopnosťou meniť ich štruktúru, to znamená mutovať. Výsledkom je, že imunita nemá čas na vytvorenie silnej reakcie proti patogénnemu činidlu a lieky sú neúčinné.

Často sa diagnostikuje hepatitída v štádiu cirhózy, ktorá predisponuje neskoršiu detekciu ochorenia v dôsledku nedostatku klinických príznakov. Iba laboratórne testovanie dokáže detekovať HCV v inkubačnej dobe.

Kvantitatívna analýza hepatitídy C umožňuje nielen stanovenie prítomnosti patogénu v krvi, ale aj výpočet jeho koncentrácie.

Odporúčania na prípravu analýzy

Nevyžaduje sa špecifická príprava na laboratórnu diagnostiku. Stačí stačiť nasledovné odporúčania:

  1. kvantitatívna analýza sa vykonáva prázdnym žalúdkom s posledným jedlom 8 hodín pred krvou;
  2. na dva dni by mal byť opustený alkohol a "ťažké" jedlá;
  3. Lieky, ktoré pacient užíva, majú mimoriadny význam. Môžu ovplyvniť výsledok štúdie, takže o nich by mal lekár vedieť.

Aj ťažké fyzické námahy a fyzioterapeutické postupy v predvečer odberu krvi nie sú žiaduce. Kvôli dešifrovaniu kvantitatívnej analýzy hepatitídy C sa ukázalo ako spoľahlivé, nezanedbajte vyššie uvedené odporúčania.

Často pacient dostane výsledok analýzy za deň. Cena testu na určenie koncentrácie patogénu v krvi závisí od laboratória a kvality činidiel a môže dosiahnuť 4 000 rubľov.

Laboratórna diagnostika hepatitídy C

Medzi primárne diagnostické metódy patrí test ELISA alebo inak imunosorbentný test enzýmov. Je určená na detekciu špecifických protilátok proti HCV. Jeho účinnosť dosahuje 95%. Ak prepis štúdie prináša pozitívny výsledok, stojí za to podozrenie na prítomnosť činidla v krvi.

Treba poznamenať, že polovica testovaných jedincov s "+" testom v priebehu ďalšej diagnostiky nezaznamenáva vírusovú látku v krvi. Test ELISA v tomto prípade indikuje predchádzajúci kontakt s HCV v minulosti, čo je potvrdené cirkulujúcimi protilátkami.

Presnejšou štúdiou je polymerázová reťazová reakcia alebo PCR. Umožňuje určiť koncentráciu RNA patogénu v krvi. Po objavení genetického súboru vírusu v biologickom materiáli doktor potvrdí hepatitídu C.

PCR je priradená pacientovi na overenie diagnózy. Umožňuje identifikovať RNA v štádiu, keď protilátky ešte nie sú k dispozícii. Existuje niekoľko typov genetických štúdií:

  1. kvantitatívna analýza PCR pre hepatitídu C, ktorá nielen stanovuje prítomnosť patogénu v krvi, ale poskytuje aj informácie o jeho koncentrácii;
  2. kvalita - potvrdzuje infekciu;
  3. genotypizácia - umožňuje určiť genotyp patogénneho agens a vybrať najúčinnejšie lieky proti nemu.

Polymerázová reťazová reakcia

Ako už bolo uvedené, existuje niekoľko typov laboratórneho výskumu:

  • kvalitatívna analýza - indikuje prítomnosť patogénneho činidla v krvi. Tento typ diagnózy má určitú "úroveň odpovede", takže nie je vždy spoľahlivý. Na správne dešifrovanie výsledkov a získanie skutočných indikátorov sa odporúča použiť testovací systém s citlivosťou najmenej 50 IU / ml pre štúdiu. Normou analýzy je "negatívna odpoveď" alebo "vírus nie je detegovaný." To naznačuje nedostatok genetického súboru patogénov v testovacom materiáli. Ak bol výsledok pozitívny, vyžaduje sa ďalšie vyšetrenie pacienta;
  • kvantitatívna analýza PCR pre hepatitídu C určuje vírusovú záťaž, teda koncentráciu patogénneho činidla v krvi. Výsledok štúdie ukazuje počet RNA jednotiek v pevnom objeme biologickej tekutiny;

Vírusová záťaž je počet infekčných RNA v jednom mililitroch krvi výskumníka. Jednotky merania sú ME / ml, ale niektoré laboratóriá určujú "kópie / ml", zatiaľ čo označujú vzorku analytického štandardu na porovnanie a vyhodnotenie výsledkov.

  • genotypu. Vzhľadom na schopnosť patogénu meniť výber účinných antivírusových liekov na terapiu by mal byť založený na jeho genotype. Závisí to nielen na výsledku, ale aj na trvaní liečby. Takže HCV 1 hepatitída vyžaduje lieky na jeden rok, ale iba 60% prípadov vykazuje pozitívnu dynamiku. Pokiaľ ide o druhý a tretí genotyp, sú menej rezistentné voči účinku antivírusových činidiel, a preto účinnosť liečby presahuje 85%. Pri získaní takéhoto výsledku výskumu - "vírus nie je napísaný", stojí za to pochybovať o prítomnosti činidla, ktoré nie je rozpoznané štandardnými testovacími systémami.

Indikácie pre analýzu

Výklad kvantitatívnej analýzy hepatitídy C je potrebný na:

  1. ďalšie vyšetrenie pacienta, keď boli pomocou ELISA detegované protilátky proti HCV;
  2. potvrdenie diagnózy;
  3. stanovenie vírusovej záťaže v prípade zmiešanej infekcie, keď je osoba nakazená niekoľkými druhmi patogénov;
  4. určenie taktiky liečby (výber antivírusových liekov, ich náhrada alebo ukončenie terapie);
  5. posúdiť dynamiku progresie ochorenia, ako aj účinnosť liekov;
  6. stanovenie štádia patológie (akútna, chronická).

PCR má nasledujúce výhody:

  1. dobrá citlivosť, vďaka čomu je možné počítať aj malé množstvo vírusu;
  2. stanovenie samotného patogénu (RNA), nie antigénov;
  3. špecifičnosť techniky - vytvorenie špecifického typu patogénneho činidla;
  4. rýchlosť získania výsledkov, pretože pre analýzu nevyžaduje kultiváciu plodín na živnom médiu. Odpoveď je pripravená za 5 hodín;
  5. univerzálnosť - umožňuje identifikovať genetickú sadu rôznych patogénov, a to ako RNA, tak DNA (hepatitída B);
  6. detekcia latentnej infekcie.

Laboratórny test pomáha potvrdiť diagnózu a je neoddeliteľnou súčasťou komplexného vyšetrenia (analýza klinických symptómov, výsledky ELISA a biochémie).

Okrem toho sa PCR bežne používa v oblasti alergológie, genetiky, ako aj na určenie skutočnosti otcovstva.

Dekódovanie kvantitatívnej analýzy vírusu hepatitídy C

Hodnotenie výsledkov laboratórnej diagnostiky vykonáva lekár porovnaním získaných údajov s normou.

Aké sú normy v kvantitatívnej analýze hepatitídy C?

Vírus hepatitídy C je schopný reprodukovať v krvných bunkách a spôsobiť lymfoproliferatívne ochorenia. Vďaka viacerým mutáciám dochádza k oslabeniu obranyschopnosti tela, objavujú sa genotypy a podtypy vírusu. Správna a včasná identifikácia konkrétneho typu závisí od účinnosti antivírusovej liečby. Nebezpečenstvo infekcie je, že choroba je asymptomatická. Celkovo 15 percent zo 100 môže mať nauzeu a vracanie, stratu hmotnosti a horúčku.

Definícia vírusu hepatitídy C

Štandardnou normou hepatitídy C sú veľkosti od 40 do 60 nm, s väčšinou lipidov, poškodenie pečene v dôsledku akútneho alebo chronického priebehu ochorenia. Hepatitída C, menovite vírus RNA z rodiny Togaviridae, je extrémne pretrvávajúca, prenášaná transfúziou krvi alebo použitím nesterilných látok, nesprávnou hygienou kúpeľňového príslušenstva, Kvantitatívna analýza umožňuje vyšetriť krv a identifikovať genetickú štruktúru infikovaného vírusu.

V prípade hepatitídy C a jej genotypov, ktoré sa majú určiť, sa vykoná kvantitatívna analýza. V závislosti od analyzátora možno určiť tri úrovne výskytu vírusu RNA.

Subtypy môžu produkovať rôzne modifikácie, takže špecifickosť a citlivosť analyzátora by mala byť stopercentná. Okrem odhalenia ochorenia u pacienta je potrebné určiť stupeň jeho závažnosti. Niektoré laboratóriá nemajú všetky údaje o definíciách vírusu RNA, existuje možnosť falošnej pozitívnej odpovede.

Štúdia hepatitídy C bude presnejšia pri štúdiu týchto ukazovateľov:

Pripomínajúc výsledky týchto indikátorov a celkový stav tela, je zobrazený výsledok ukazujúci stupeň infekcie, formu a počet buniek hepatitídy C v krvi. To prispieva k hojivému procesu a účinnosti antivírusovej liečby.

Druhy analýzy hepatitídy C

Polydizovaná reťazová reakcia (PCR) poskytuje myšlienku množstva častíc DNA v analýzach pacienta a správne identifikuje pôvodcu infekcie.

Infekčné látky sa môžu prejaviť. Takéto infekčné ochorenie pečene, ako je hepatitída C, je v súčasnosti liečiteľné, keď je zistené v čase. Ak existuje podozrenie na vírus, vykoná sa analýza PCR.

Zatiaľ čo príznaky vírusu môžu byť maskované dlhú dobu, človek nemusí cítiť nástup priebehu ochorenia. Ale s dôkladným vyšetrením v 60 až 70% prípadov sa zistí hepatitída C, primárna analýza, v ktorej je ELISA, potom nasleduje PCR diagnóza. Analýza sa vykonáva v určitých obdobiach na určenie štádia ochorenia a predpísanie príslušnej liečby. Robiť bez nej, bez použitia všetkých týchto postupov, môžete, štepenie z hepatitídy.

Kvalitatívna a kvantitatívna analýza

Existujú kvalitatívne a kvantitatívne analýzy. Podstata prvej je, že určuje prítomnosť infekcie v krvi. A to znamená, že vírus ovplyvňuje zdravé pečeňové bunky. Ak má pacient protilátky proti hepatitíde C, ihneď sa vykoná kvalitatívna skúška. Norma, ktorá by výsledok mala vyvolať, nie je "zistená v krvi". Pri určovaní koncentrácie vírusu je potrebná znalosť citlivosti diagnostického systému, pretože analýza môže vykonávať ľudia, ktorí podstupujú antivírusovú terapiu. Citlivosť analyzátora by nemala byť nižšia ako 50 IU / ml.

Keď sa zistí vírus, vykoná sa kvantitatívna analýza, inými slovami vírusové zaťaženie, ktoré určuje koncentráciu vírusu v krvi a závažnosť ochorenia.

Vírusová RNA, ktorá je v určitom množstve krvi, je definovaná ako norma v množstve 1 ml na 1 cm kryštál. Po kvantifikácii vírusovej záťaže je možné posúdiť stupeň infekcie neinfikovaného prostredia. Akonáhle sa koncentrácia hepatitídy C zvýši v krvi, životné prostredie musí byť izolované.

V prvých štádiách je dôležité zistiť stupeň koncentrácie hepatitídy, aby sa určilo tempo rehabilitácie. Ak je miera hepatitídy C prekročená o viac ako 800 tisíc IU / ml, považuje sa to za príliš vysokú a zvýšenie na jeden milión je kritické. Ak je kvantitatívny rozsah menší ako 400 tisíc IU / ml, predpokladá sa, že kontaminácia iných sa vyskytne s menšou pravdepodobnosťou. Tento údaj jasne uvádza, že hepatitída C v tele je prítomná vo veľmi malých dávkach. Analýza nebola schopná stanoviť kvantitatívnu hodnotu RNA vírusových častíc, takže je niekoľkokrát preradená na presnosť diagnostiky.

Výsledky kvantitatívnej analýzy

Úlohou určenia množstva vírusovej záťaže v krvi pacienta je určiť rozsah infekcie pre ostatných.

Výsledky analýzy PCR:

  1. Pozitívna odpoveď znamená, že v biologickom materiáli existuje infekcia. Analýza umožňuje určiť presný počet infikovaných buniek.
  2. Negatívna odpoveď poukazuje na neprítomnosť infekcie, ktorá bola v tele dôkladne vyhľadaná.

Kvantitatívna metóda hepatitídy C je presná a informatívna, vykonávaná na zariadeniach s vysokou citlivosťou. Dešifrovanie výsledkov analýzy umožňuje zistiť, či existuje infekcia a jej špecifickosť, aby ste videli najmenší počet infikovaných buniek na analyzátoroch s vysokou citlivosťou.

Falošne pozitívne alebo opačné výsledky analýzy zriedkavo dávajú, častejšie sa to deje v štúdiách imunoanalýzy.

HCV, RNA kvantitatívne [PCR v reálnom čase]

Štúdia na identifikáciu pôvodcu hepatitídy C (HCV), v ktorom metódou real-time PCR (RT-PCR) je určená prítomnosťou genetického materiálu (RNA) vírusu a jeho objemu (vírusová záťaž) vo vzorke krvi.

HCV RNA sa môže detegovať v koncentrácii pod dolnou hranicou lineárneho rozsahu koncentrácií. Rozsah lineárnej koncentrácie je rozsah, v ktorom možno presne vypočítať počet kópií patogénu. Pre túto analýzu je lineárny rozsah koncentrácií HCV DNA stanovený detekčným zosilňovačom 7,5 x 10 2 - 1,0 x 10 8 kópií / ml vzorky.

Ruské synonymá

Vírus hepatitídy C (HCV), kvantitatívne stanovenie RNA.

synonymá angličtina

Vírusová RNA vírusu hepatitídy C, kvantitatívna PCR v reálnom čase, krv, vírusová záťaž HCV, vírusová RNA vírusu hepatitídy C Quant.

Metóda výskumu

Polymerázová reťazová reakcia s reverznou transkripciou v reálnom čase.

Aký biomateriál možno použiť na výskum?

Ako sa správne pripraviť na štúdium?

Nefajčte 30 minút pred darovaním krvi.

Všeobecné informácie o štúdii

Vírus hepatitídy C (HCV) je vírus obsahujúci RNA z rodiny Flaviviridae, ktorý postihuje pečeň. Je schopný množiť sa v krvných bunkách (neutrofily, monocyty a makrofágy, lymfocyty B) a indukujú kryoglobulinemii, Sjögrenov choroba, a B buniek lymfoproliferatívne ochorenia. HCV spôsobené vysokou mutačnou aktivitou je schopný vyhnúť sa účinkov ochranných mechanizmov imunitného systému. Existuje 6 genotypov a mnoho podtypov vírusu, ktoré majú odlišné hodnoty pre prognózu vývoja ochorenia a účinnosť antivírusovej liečby.

Hlavným spôsobom prenosu infekcie je krv (prípravky na transfúziu krvných a plazmových prvkov, darcovské orgány, nesterilné striekačky, ihly, nástroje na tetovanie, piercing). Pravdepodobne infekcia počas pohlavného styku a dieťa od matky počas pôrodu, ale to sa zriedka vyskytuje.

Akútna vírusová hepatitída sa zvyčajne vyznačuje asymptomatickým priebehom a vo väčšine prípadov zostáva nediagnostikovaná. Iba 15% infikovaných ľudí má akútne ochorenie - so nevoľnosťou, bolesťami tela, nedostatkom chuti do jedla a úbytkom hmotnosti (zriedkavo sprevádzané žltačkou). U 60-85% infikovaných sa vyvinie chronická infekcia, ktorá je 15 krát vyššia ako frekvencia chronickej hepatitídy B. Chronická vírusová hepatitída C sa vyskytuje so zvýšeným hepatálnym enzýmom a skromným prejavom príznakov. U 20-30% pacientov vedie ochorenie k cirhóze pečene, čo zvyšuje riziko hepatálnej insuficiencie a hepatocelulárneho karcinómu.

Detekcia HCV RNA indikuje proliferáciu vírusu v tele a je metódou diagnostiky ochorenia. Genetický materiál vírusu môžu byť detekované pomocou PCR v 10-12 dní po infekcii - v tomto období, špecifické protilátky, ktoré sú vyrábané v niekoľkých mesiacov po infekcii, a nie pečeňové funkcie sú v rámci referenčného rozsahu.

Pomocou PCR sa vírusová RNA deteguje kvalitatívne alebo kvantitatívne. Kvôli kvalitatívnej metóde sa potvrdzuje prítomnosť vírusu hepatitídy C a jeho aktívna reprodukcia. Kvantitatívne stanovenie vírusovej záťaže s prihliadnutím na genotyp HCV umožňuje kontrolovať aktuálnu terapiu a predpovedať priebeh ochorenia.

Účinnosť liečby sa odhaduje množstvom RNA pred a počas liečby. Zvyčajne vírusové zaťaženie krvi niekoľkokrát klesá v prvých troch mesiacoch úspešnej liečby. Pri účinnej liečbe sa vírusia znižuje o dva rády v prvých 4-12 týždňoch liečby a po ukončení liečby sa genetický materiál vírusu v krvi nezistí. Neprítomnosť zníženia virémie po 12 týždňoch od začiatku liečby poukazuje na jej neúčinnosť. Odporúča sa vykonať analýzu pred začiatkom liečby v 4., 12. a 24. týždni liečby a 24 týždňov po skončení kurzu. Trvanie liečby a frekvencia kvantitatívneho stanovenia RNA vírusu hepatitídy C závisí od genotypu vírusu a stupňa poškodenia pečene.

Na čo sa výskum používa?

  • Potvrdenie diagnózy "vírusovej hepatitídy C".
  • Predpovedať priebeh vírusovej hepatitídy C.
  • Sledovať antivírusovú terapiu a riešiť problém ďalších liečebných taktík.

Kedy je pridelená štúdia?

  • S kvalitatívnou detekciou RNA vírusu hepatitídy C.
  • Pri akútnej a chronickej vírusovej hepatitíde C.
  • So zmiešanou hepatitídou.
  • Pri plánovaní, počas a po ukončení antivírusovej liečby.

Čo znamená výsledok?

  • Nebolo nájdené - RNA vírusu hepatitídy C nebola detegovaná alebo hodnota je pod hranicou citlivosti metódy (200 kópií / ml = 400 IU / ml).
  • kópií / ml (IU / ml) - bola detegovaná RNA vírusu hepatitídy C. Nízka virémia (najpriaznivejšia prognóza priebehu ochorenia a účinnosť terapie).
  • > 2 x 106 kópií / ml (> 4 x 10 6 IU / ml) - detegovala sa RNA vírusu hepatitídy C. Vysoká viremia.
  • > 1,0 * 10 ^ 8 kópií / ml (> 2 x 10 ^ 8 IU / ml) - RNA vírusu hepatitídy C bola detegovaná v koncentráciách nad lineárnym koncentračným rozsahom.

Lineárne rozsah koncentrácie HCV RNA C určené detekciu termocykléra, 7,5 x 10 2 - 1,0 x 10 8 kópií / ml (1,5 x 3-2 10. x 10 8 IU / ml).

Čo môže ovplyvniť výsledok?

Nespoľahlivý výsledok možno získať s:

  • kontaminácia biomateriálu;
  • prítomnosť vo vzorke inhibítorov - chemických a proteínových látok ovplyvňujúcich rôzne zložky PCR;
  • prítomnosť heparínu v krvi.

Dôležité poznámky

  • Úroveň vírusovej záťaže krvi neuvádza stupeň poškodenia pečene a závažnosť ochorenia. Na ich vyhodnotenie je potrebné vyšetriť biochemické indikátory a biopsie.
  • Pri plánovaní liečby je veľmi dôležité určiť genotyp vírusu hepatitídy C.

Odporúča sa tiež

Kto určil štúdiu?

literatúra

  • Vozianova Zh.I. Infekčné a parazitické ochorenia: V 3 t - K.: Zdravie, 2000. - T.1.: 600-690.
  • Kishkun AA Imunologické a sérologické štúdie v klinickej praxi. - M.: MIA LLC, 2006. - 471 - 476 s.
  • Harrisonove princípy vnútorného lekárstva. 16. vyd. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  • Lerat H, Rumin S, Habersetzer F a ďalšie. In vivo tropizmus genómových sekvencií vírusu hepatitídy C v hematopoetických bunkách: vplyv vírusovej záťaže, vírusového genotypu a bunkového fenotypu. Krvi. 1998 15. mája 91 (10): 3841-9.PMID: 9573022.
  • Revie D, Salahuddin SZ. Typy ľudských buniek dôležité pre replikáciu vírusu hepatitídy C in vivo a in vitro: staré tvrdenia a súčasné dôkazy. Virol J., 11 júl 11, 8: 346. dva: 10.1186 / 1743-422X-8-346. PMID: 21745397.

Tabuľka dekódovania kvantitatívnej analýzy hepatitídy C

Choroba nazývaná hepatitída môže vážne poškodiť pečeň a spôsobiť závažný zápal. Existuje niekoľko druhov hepatitídy a vírusy, ktoré vyvolávajú vývoj choroby možno rozdeliť podľa genotypu, v závislosti na mutácií a zemepisnej polohe. Jedným z bežných typov ochorení je typu C Kvantitatívna analýza pre hepatitídu C, čo je dešifrovanie vykonaného ošetrujúceho lekára, môže dôjsť v akútnej alebo stať chronickou.

Spôsoby kontrahovania hepatitídy

Na stanovenie diagnózy sa vykoná príslušná laboratórna skúška. Ako prvá povrchová skúška sa môže použiť kvalitatívna analýza, ktorá ukáže, či v tele existuje látka proti hepatitíde. Aby sa však stanovil presný stupeň choroby a určenie liečby, musí sa vykonať kvantitatívny test.

Vírus hepatitídy sa prenáša z človeka na človeka. Ochorenie má inkubačnú dobu, počas ktorej sa príznaky takmer neprejavujú. Čas latentného priebehu ochorenia závisí od ľudského imunitného systému a od množstva vírusu, ktorý sa dostal do tela. Lekári stanovili tieto hlavné spôsoby prenosu hepatitídy C:

  • 47% pravdepodobnosť krvácania vírusu krvou s použitím bežných nesterilných injekčných striekačiek počas zavádzania intravenóznych liekov. Organizmus oslabený vplyvom omamných látok nemôže odolávať vírusu a choroba sa šíri.
  • 22% pravdepodobnosť výskytu hepatitídy s transfúziou krvi. Vzhľadom na vysoké riziko infekcie hepatitídou, HIV a inými ochoreniami prostredníctvom krvi darcu, lekárske inštitúcie podrobia všetky biologické vzorky povinnému testovaniu pred použitím. Ak sa dodržia toto pravidlo, riziko infekcie je minimálne.
  • 16% riziko infekcie hepatitídou pri používaní nesterilných lekárskych prístrojov. Spravidla všetci lekári pozorne sledujú vybavenie a inventár. Ak sa však nedodržiavajú bezpečnostné opatrenia, je možná infekcia hepatitídou alebo inými ochoreniami.
  • 13% pravdepodobnosť prenosu vírusu z infikovanej matky na rastúci plod.
  • 12% pravdepodobnosť kontaktu vírusu prostredníctvom sexuálneho kontaktu bez použitia kondómu s neformálnym sexuálnym partnerom. Podľa štatistík pre homosexuálne páry je riziko vyššie.

Symptómy ochorenia

Normálne, to je zdravý stav sa považuje za absenciu akéhokoľvek závažného prejavu nevoľnosti. Nebezpečenstvo vírusu hepatitídy spočíva v tom, že ochorenie nemôže spôsobiť silné príznaky. Zjavné známky ochorenia (vracanie, náhla strata hmotnosti atď.) Sa objavujú iba v 15% prípadov. Zvyšných 85% symptómov pacientov je pomerne slabé. Je potrebné sledovať váš zdravotný stav a reagovať na zhoršenie stavu.

  • Najcharakteristickejším znakom problémov s pečeňou je ikterus kože a očné bielkoviny. Tieto znaky zodpovedajú nielen vírusu hepatitídy, ale aj iným ochoreniam pečene.
  • Vzhľad cievnych hviezdičiek na koži. Kapiláry pasteliek, ktoré sa nachádzajú v koži, sa rozširujú v dôsledku prítomnosti vírusu v krvi a objavujú sa "hviezdy".
  • "Pečeňové dlaň" je príznakom, ktorý je sprevádzaný sčervenaním dlane a niekedy nohami. Tento jav sa tiež nazýva palmárny erytém a objavuje sa zvyčajne spolu s vaskulárnymi hviezdičkami.
  • Dráždivé toxické účinky vírusu na telo môžu spôsobiť svrbenie kože.
  • Z dôvodu zmien v chemickom zložení krvi môže byť faktor zrážanlivosti ohrozený.
  • Dlhodobé vystavenie vírusu organizmu vedie k zhoršeniu funkcie mozgu (získaná encefalopatia).
  • Môže dôjsť k vnútornému krvácaniu.
  • Porušenie funkcií pečene môže viesť k akumulácii tekutiny v brušnej dutine (ascitu).
  • Na konci dňa na nohách pacienta dochádza k opuchu.

Zjavenie jedného alebo dvoch symptómov je charakteristické pre rôzne ochorenia. Najčastejšie je malátnosť vysvetlená fyzickou únavou alebo silným psychickým stresom a stresom. Ak je zo zoznamu nájdených niekoľko charakteristických príznakov, je vhodné urobiť kvantitatívnu analýzu hepatitídy C.

Typy analýz

Jednou z najspoľahlivejších a najspoľahlivejších metód diagnostiky hepatitídy je polymerázová reťazová reakcia alebo PCR. Na rozdiel od iných typov štúdií (ELISA alebo RIF), analýza PCR na hepatitídu umožňuje detegovať priamo genetický materiál vírusu, a nie protilátky na jeho kontrolu. To umožňuje presnú diagnózu. Protilátky proti vírusu zostávajú v ľudskom tele a po úplnom zotavení. V tomto prípade ELISA deteguje protilátky od zdravého človeka, to znamená, že výsledok bude pozitívny. Pri analýze PCR neexistuje takýto problém.

Normou pre indikátor je číslo blízke nuly. To znamená, že zdravý človek by nemal v zásade mať vírusové bunky v tele. Kvantitatívna PCR odráža počet vírusových buniek, ktorý sa nachádza v študovanej biologickej vzorke. Na základe zistení doktor dokáže vyvodiť záver o stupni infekcie tela ako celku. Koncentrácia vírusu indikuje stupeň ochorenia a umožňuje sledovať približný čas infekcie.

Kvantitatívny indikátor

Je dôležité nielen správne pripraviť na analýzu a predložiť biologickú vzorku do laboratória, ale aj rozlúštiť získané údaje. Toto by malo vykonávať iba kvalifikovaný lekár. Samozrejme, na formulári s výsledkom sú už informácie o prijatých normách a hodnoty pacienta sú uvedené. Čísla však nie sú všetko, skúsenosti a lekárske vedomosti vám umožňujú získať viac informácií. V tabuľke sa uvádza, aký výsledok môže byť pre analýzu PCR pre hepatitídu typu C kvantitatívny:

Štúdia PCR pre hepatitídu C: typy, indikácie, transkript

Vírusová hepatitída C je závažné ochorenie, ktoré sa vyskytuje pri poškodení pečene. V ôsmich percentách pacientov prechádza do chronickej formy. Vírus sa množí v pečeňových bunkách - hepatocytoch - a spôsobuje ich smrť. Mŕtve tkanivo sa nahradí ložiskami spojivového tkaniva, vyvíja sa fibróza.

S rozvojom fibrózy pečene, je schopný plniť svoju funkciu, začína cirhóza, čo je nebezpečné pre jeho komplikácií: zvyšujúci sa tlak v portálnej žile, gastrointestinálne krvácanie, poruchy zrážanlivosti krvi, mentálne zmeny kvôli poškodeniu mozgu jadra toxických produktov.

Príčinou tohto ochorenia je infekcia vírusom z rodiny Flaviviridae, čo je typ vírusu RNA. To znamená, že genetický materiál, pomocou ktorého sú syntetizované proteíny patogénu, je kódovaný molekulou kyseliny ribonukleovej. Infekcia sa prejavuje krvou, sexuálne a od tehotnej ženy až po plod. Bohužiaľ, medzi infekciou a začiatkom produkcie protilátok môže prejsť pomerne veľké množstvo času - od dvoch týždňov až po šesť mesiacov. To neumožňuje určiť infekciu metódou enzýmovej imunoanalýzy a začať liečbu v počiatočných štádiách.

Čo je analýza PCR?

PCR je metóda molekulárnej analýzy, ktorá umožňuje detekciu genetického materiálu patogénu už v prvom týždni po infekcii použitím polymerázovej reťazovej reakcie. Štúdia má vysokú špecifickosť, presnosť a umožňuje nielen určiť prítomnosť alebo neprítomnosť vírusu, ale aj jeho koncentráciu a genotyp.

Pre túto štúdiu vezmite pacientovu krv, v ktorej sa môže potenciálne nájsť RNA vírusu. V krvi sa pridajú priméry - umelo syntetizované časti požadovaného génu malej dĺžky a RNA polymeráza je špeciálnym enzýmom, ktorý znásobuje množstvo genetického materiálu patogénu. Pomocou špeciálneho zariadenia sa vykonáva niekoľko cyklov vykurovania a chladenia. Materiál sa potom analyzuje a porovná so známymi vírusovými génmi, na základe ktorých sa dospelo k záveru o prítomnosti alebo neprítomnosti infekcie.

Typy PCR analýzy pre hepatitídu C

Existujú tri typy analýzy PCR:

  1. Kvalitatívna analýza PCR. Prvá fáza štúdie. Umožňuje vám identifikovať genetický materiál vírusu v krvi.

  • Kvantitatívna analýza PCR. Umožňuje určiť vírusovú záťaž - koncentráciu genetického materiálu patogénu v jednom mililitroch krvi. Táto štúdia sa uskutočňuje pred začiatkom liečby a potom v prvom, štvrtom, dvanástom a (ak je kurz dlhý) v dvadsiatom štvrtom týždni liečby, aby sa vyhodnotila jeho účinnosť.

  • genotypu. Príčinná látka hepatitídy C často a rýchlo mutuje. Na planéte bolo nájdených sedem variant genotypu tohto vírusu. V Rusku sú spoločné prvé, druhé a tretie typy. Každý z genotypov má rôznu rezistenciu voči terapii, napríklad účinnosť liečby prvého typu je šesťdesiat percent a pre druhý a tretí dosiahne osemdesiatpäť. Preto, aby sa vybrali vhodné lieky a aby sa predpísal postup liečby s dostatočným trvaním, je potrebné presne určiť, ktorý typ vírusu je pacient infikovaný.
  • Indikácie pre analýzu PCR pre hepatitídu C

    Štúdia PCR je predpísaná v nasledujúcich prípadoch:

    • kontakt s chorým, čo by mohlo viesť k infekcii;
    • pozitívna enzýmová imunoanalýza;
    • príznaky cirhózy pečene: zmeny veľkosti pečene, zväčšená slezina, výskyt podkožného venózneho plexu na bruchu;
    • výskyt príznakov poškodenia pečene: bolesť na pravej strane brucha, žltnutie kože;
    • zvýšená aktivita ALT a AST v biochemickej analýze krvi;
    • pred začiatkom liečby na určenie vírusovej záťaže;
    • sledovať účinnosť antivírusovej liečby;
    • po dokončení liečby na monitorovanie relapsu;
    • v prítomnosti diagnostikovanej hepatitídy B, aby sa vylúčilo zmiešané poškodenie pečene.

    Dekódovanie štúdie PCR pre hepatitídu C

    Dekódovanie analýzy PCR a enzýmovej imunoanalýzy pre hepatitídu C by mal riešiť špecialista na hepatológiu alebo infekčnú chorobu. Analýza výsledkov PCR je potrebná v kombinácii s biochemickým krvným testom, biopsiou a ultrazvukom. Iba kvalifikovaný lekár bude schopný analyzovať výsledky štúdií a na základe nich predpísať správnu liečbu.

    Dekódovanie kvalitatívnej analýzy.

    Genetický materiál patogénu sa našiel v analyzovanom biologickom materiáli. Infekcia je potvrdená.

    Neexistuje žiadna infekcia alebo množstvo RNA patogénu je pod hranicou citlivosti.

    Dekódovanie kvantitatívnej analýzy.

    Normálna postava pre zdravých ľudí. Znamená to, že v testovanom materiáli nie je prítomná RNA hepatitídy C alebo jej koncentrácia je pod hranicou citlivosti v štúdii.

    Koncentrácia RNA je pod rozsahom kvantifikácie. Takéto výsledky sú interpretované veľmi opatrne, korelujú ich s údajmi z iných štúdií a často vykonávajú druhú štúdiu.

    Úroveň vírusovej záťaže pri danej koncentrácii sa považuje za nízku. Zvyčajne zníženie množstva vírusu znamená, že terapia je úspešná.

    Viac ako 8 * 10 ^ 5 IU / ml

    Úroveň vírusovej záťaže pri danej koncentrácii sa považuje za vysokú.

    Viac ako 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml

    Množstvo RNA je nad hornou hranicou rozsahu kvantifikácie. Nie je možné vyvodiť závery o stupni vírusovej záťaže s týmto výsledkom. Zvyčajne sa v takýchto prípadoch opakuje test s riedením vzorky krvi.

    Dekódovanie genotypizácie.

    Bola detegovaná RNA špecifického genotypu

    V biomateriáli sa deteguje vírus hepatitídy C špecifického genotypu a podtypu. Výsledok je kódovaný rímskymi číslicami a latinkami, napríklad - 1a, 2b. Existuje sedem genotypov a šesťdesiat sedem podtypov, avšak v Rusku existujú iba tri prvé typy.

    Bola detegovaná RNA vírusu hepatitídy C

    V krvi sa RNA nachádza ako vzácny genotyp pre Rusko, ktorý nemožno pripísať prvému, druhému ani tretiemu typu. Je potrebný ďalší výskum.

    Tento výsledok naznačuje, že pacient je zdravý, alebo že úroveň RNA patogénu je príliš malá.

    Situácia je možná, keď je analýza PCR pre hepatitídu C negatívna a enzýmová imunoanalýza deteguje protilátky proti vírusu. To znamená, že pacient mal hepatitídu C v akútnej forme a uzdravil sa. Približne dvadsať prípadov infekcie vedie k spontánnemu vyliečeniu, ak pacientovo telo vykazuje dostatočnú odolnosť voči infekcii.

    Napriek tomu, že PCR je vysoko presná analýza, jej výsledky môžu byť deformované v nasledujúcich situáciách:

    • krv bola prepravovaná do laboratória za neprimeraných podmienok, teplotný režim bol porušený;
    • vzorka biomateriálu bola kontaminovaná;
    • v krvi boli zvyšné stopy heparínu a iných antikoagulancií;
    • V skúmanej látke boli inhibítory - látky, ktoré spomaľujú alebo zastavujú polymerázovú reťazovú reakciu.

    Výhody PCR v porovnaní s inými metódami

    1. Diagnóza v počiatočných fázach. PCR deteguje genetický materiál pôvodcu ochorenia. Pomocou imunofluorescenčnej analýzy je možné určiť iba imunoglobulíny - látky, ktoré telo produkuje ako odpoveď na infekciu. V prípade infekcie spôsobenej hepatitídou C môže byť interval medzi infekciou a nástupom imunitnej odpovede niekoľko týždňov a mesiacov, kedy bude ELISA neúčinná. PCR poskytne odpoveď už v prvom týždni po infekcii.

  • Nízka pravdepodobnosť chyby. V študovanom materiáli sa určuje genetický materiál, ktorý je charakteristický iba pre jeden typ patogénov. To vám umožňuje vylúčiť falošné výsledky. Pomocou testu ELISA sú možné chyby, pretože rovnaký druh protilátok sa môže uvoľniť proti rôznym vírusom - takéto protilátky sa nazývajú krížovo reaktívne.

  • Vysoká citlivosť. PCR môže detegovať RNA patogénu aj v minimálnych množstvách. To umožňuje identifikovať skryté infekcie.
  • Ako sa pripraviť na dodanie krvi na výskum PCR

    Pri analýze PCR sa na hepatitídu C odoberá žilná ​​krv. Zvyčajne sa z pacientovej žily okamžite odoberú dve časti krvi: prvý sa odošle na PCR a druhý pre ELISA. To sa robí s cieľom presnejšie posúdiť, ako veľmi je pacient infikovaný vírusom a ako proti nemu bojuje imunita.

    Zvyčajne sa od pacienta vyžadujú nasledujúce pravidlá:

    • krvný test sa vyšetruje ráno;
    • prestávka medzi posledným jedlom a dodaním krvi by mala byť 8 až 10 hodín;
    • dva alebo tri dni pred analýzou sa musíte vzdať smažených a mastných jedál a alkoholu;
    • dvadsaťštyri hodín pred analýzou by sa mal pacient vyhnúť fyzickej námahe: nenosia váhy, nechodia do telocvične ani do bazéna.

    Predchádzajúci Článok

    fibróza pečene v uzi

    Súvisiace Články Hepatitída